常用培養(yǎng)基的制備及注意事項一、實驗?zāi)康牧私馀囵B(yǎng)基的配制原理;掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟;了解常見滅菌、清毒基本原理及方法;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除菌的操作方法。二、實驗原理培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因素和水。根據(jù)微生物的種類和實驗?zāi)康牟煌?,培養(yǎng)基也有不同的種類和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用較普遍和較普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,有時又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長繁殖所需要的較基本的營養(yǎng)物質(zhì),所以可供微生物生長繁殖之用。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。培養(yǎng)基制備器勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁。瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器售后
培養(yǎng)基的驗收:購買的培養(yǎng)基到貨后,應(yīng)有專人做好培養(yǎng)基接受和培養(yǎng)基驗收工作,應(yīng)仔細(xì)核對生產(chǎn)企業(yè)提供的關(guān)于培養(yǎng)基資料、培養(yǎng)基名稱、規(guī)格數(shù)量、外觀特征、批號、保質(zhì)期是否符合要求。每批培養(yǎng)基到貨物后都應(yīng)對培養(yǎng)基的質(zhì)量進(jìn)行檢測,滿足檢測方法規(guī)定的要求后方可投入使用。培養(yǎng)基是液體、半固體或固體形式的,含天然或合成成分,用于保證微生物繁殖或保持其活力的物質(zhì)。保存是否得當(dāng)、配制使用是否正確等都直接影響到檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。新疆不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,較好一次完成,不要中斷。
培養(yǎng)基分裝機(jī)簡介:TW-AF簡易培養(yǎng)基分裝機(jī)流量范圍1-570毫升/分鐘。采用彩色液晶和觸摸屏技術(shù),操作界面簡單,直觀,明了。為了減小不必要的風(fēng)扇噪音,采用了智能溫控技術(shù)。含瓊脂培養(yǎng)基溫度控制在45-48°C,接觸碟培養(yǎng)基分裝1分鐘大約分裝15個,沉降菌培養(yǎng)皿培養(yǎng)基分裝1分鐘大約10-15個。做無菌用的液體培養(yǎng)基分裝等。物品效價測定碟子培養(yǎng)基分裝等。觸摸屏技術(shù),方便改寫任意體積,任意份數(shù),任意時間間隔,任意速度??梢苑盅b微生物檢驗稀釋劑:先分裝225ml稀釋劑,一次幾個樣品,分裝幾份;再分裝9ml稀釋劑到試管,較后分裝培養(yǎng)基(營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、霉菌和酵母菌培養(yǎng)基等)一機(jī)多用,體積小,不占地方,方便移動。
濕熱滅菌:濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進(jìn)行,高壓滅菌一般采用121℃±3℃滅菌15min,具體培養(yǎng)基按食品微生物學(xué)檢驗標(biāo)準(zhǔn)中的規(guī)定進(jìn)行滅菌。培養(yǎng)基體積不應(yīng)超過1000mL,否則滅菌時可能會造成過度加熱。所有的操作應(yīng)按照標(biāo)準(zhǔn)或使用說明的規(guī)定進(jìn)行。滅菌效果的控制是關(guān)鍵問題。加熱后采用適當(dāng)?shù)姆绞嚼鋮s,以防加熱過度。這對于大容量和敏感培養(yǎng)基十分重要,例如含有煌綠的培養(yǎng)基。過濾除菌:過濾除菌可在真空或加壓的條件下進(jìn)行。使用孔徑為0.2μm的無菌設(shè)備和濾膜。消毒過濾設(shè)備的各個部分或使用預(yù)先消毒的設(shè)備。一些濾膜上附著有蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)(如物品),為了達(dá)到有效過濾,應(yīng)事先將濾膜用無菌水潤濕。有的培養(yǎng)基還含有素和色素,用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。
平板的制備和儲存:傾注融化的培養(yǎng)基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少為3mm(直徑90mm的平皿,通常要加入18mL?20mL瓊脂培養(yǎng)基)。將平皿蓋好皿蓋后放到水平平面使瓊脂冷卻凝固。如果平板需儲存,或者培養(yǎng)時間超過48h或培養(yǎng)溫度高于40℃,則需要傾注更多的培養(yǎng)基。凝固后的培養(yǎng)基應(yīng)立即使用或存放于暗處和(或)5±3℃冰箱的密封袋中,以防止培養(yǎng)基成分的改變。在平板底部或側(cè)邊做好標(biāo)記,標(biāo)記的內(nèi)容包括名稱、制備日期和(或)有效期。也可使用適宜的培養(yǎng)基編碼系統(tǒng)進(jìn)行標(biāo)記。將倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延長儲存期限。為了避免冷凝水的產(chǎn)生,平板應(yīng)冷卻后再裝入袋中。儲存前不要對培養(yǎng)基表面進(jìn)行干燥處理。對于采用表面接種形式培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,應(yīng)先對瓊脂表面進(jìn)行干燥:揭開平皿蓋,將平板倒扣于烘箱或培養(yǎng)箱中(溫度設(shè)為25~50℃);或放在有對流的無菌凈化臺中,直到培養(yǎng)基表面的水滴消失為止。注意不要過度干燥。商品化的平板瓊脂培養(yǎng)基應(yīng)按照廠商提供的說明使用。培養(yǎng)基制備器溫度和壓力嚴(yán)格控制鎖定裝載艙口和外部蓋子。瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器售后
對一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長時間的貯存,必須放在3~6℃的冰箱內(nèi)。瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器售后
微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:調(diào)培養(yǎng)基pH,雖然中海培養(yǎng)基中含有緩沖物質(zhì),可以盡量使培養(yǎng)基的pH值保持在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi),但如果配制的培養(yǎng)基不能要求,則必須進(jìn)行必要的調(diào)整。如果您有校準(zhǔn)過的pH計,則可以使用pH計。如果沒有,可以使用精確的pH試紙,然后根據(jù)需要使用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸進(jìn)行微調(diào)。使用0.1氫氧化鈉或0.1mol/L鹽酸進(jìn)行調(diào)整至所需的pH值。培養(yǎng)基有酸性或堿性,pH值一般為7.4~7.6。對于需要用氫氧化鈉高壓滅菌的介質(zhì),將pH調(diào)至比要求值高0.1~0.2個單位,因為用氫氧化鈉調(diào)節(jié)時,高壓滅菌后介質(zhì)的pH值要降低0.1~0.2。如果微生物培養(yǎng)基中含有碳酸鈣,則無需調(diào)整pH值。瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器售后