常用培養(yǎng)基的制備及注意事項(xiàng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馀囵B(yǎng)基的配制原理；掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟；了解常見滅菌、清毒基本原理及方法；掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除菌的操作方法。二、實(shí)驗(yàn)原理培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長(zhǎng)繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長(zhǎng)因素和水。根據(jù)微生物的種類和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌囵B(yǎng)基也有不同的種類和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用較普遍和較普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時(shí)又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需要的較基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，所以可供微生物生長(zhǎng)繁殖之用。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。培養(yǎng)基制備器鋁制表面光滑平坦;易于清潔，無孔隙和裂縫，以防培養(yǎng)基流進(jìn)去。陜西培養(yǎng)基制備器多少錢

制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基：培養(yǎng)基滅菌后，如制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基，須趁培養(yǎng)基未凝固時(shí)進(jìn)行。(1)制作斜面培養(yǎng)基。在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上放1支長(zhǎng)0.5-1米左右的木條,厚度為1厘米左右，將試管頭部枕在木條上，使管內(nèi)培養(yǎng)基自然傾斜，凝固后即成斜面培養(yǎng)基。(2)制作平板培養(yǎng)基。將剛剛滅過菌的盛有培養(yǎng)基的錐形瓶和培養(yǎng)皿放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，點(diǎn)燃酒精燈，右手托起錐形瓶瓶底，左手拔下棉塞，將瓶口在酒精燈上稍加灼燒，左手打開培養(yǎng)皿蓋，右手迅速將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，每皿約倒入10毫升，以鋪滿皿底為度。鋪放培養(yǎng)基后放置15分鐘左右，待培養(yǎng)基凝固后，再5個(gè)培養(yǎng)皿一疊，倒置過來，平放在恒溫箱里，24小時(shí)后檢查，如培養(yǎng)基末長(zhǎng)雜菌，即可用來培養(yǎng)微生物。陜西培養(yǎng)基制備器多少錢在配制用于觀察和定量測(cè)定微生物生長(zhǎng)狀況的合成培養(yǎng)基時(shí)，常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑。

培養(yǎng)基制備程序：全自動(dòng)培養(yǎng)基制備器可以快速的準(zhǔn)備好滅菌，放入滅菌鍋，“水套系統(tǒng)”里加入夾層水（滅菌鍋與滅菌鍋腔體之間的夾套水用于有效的熱傳導(dǎo)），加入培養(yǎng)基原料，準(zhǔn)備啟動(dòng)滅菌程序。培養(yǎng)基可以直接在培養(yǎng)基制備器內(nèi)懸浮溶解。強(qiáng)力磁力攪拌培養(yǎng)基在內(nèi)腔里混合的均勻性得到確保，并避免凝結(jié)。培養(yǎng)基還可以選擇使用水浴模式預(yù)先溶解。沒有經(jīng)過專門培訓(xùn)的人員由于直觀的圖形化界面也能夠簡(jiǎn)單的進(jìn)行操作。用戶對(duì)于多達(dá)50個(gè)滅菌參數(shù)可以自定義設(shè)置，它們可以被儲(chǔ)存起來并隨時(shí)調(diào)用。

消毒與滅菌的區(qū)別：消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法單殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（對(duì)于一些不耐高溫的液體）還有化學(xué)藥劑（如酒精、氯氣、石炭酸等）消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法：①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱；③培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法，所用器械是紫外燈。培養(yǎng)基制備器血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。

血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理：血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但好普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成的，而血纖維蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血渭解凍后，也會(huì)存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物并不影響血清本身的質(zhì)量。若想去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過濾膜。何謂熱滅活：一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清，因?yàn)榇思訜岵襟E可以使補(bǔ)體去活化，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有：溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和啟動(dòng)。要根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。陜西培養(yǎng)基制備器多少錢

全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn)：容器可自行拆卸更換和消毒，操作方便。陜西培養(yǎng)基制備器多少錢

微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備的要點(diǎn)：培養(yǎng)基溶化，將中海培養(yǎng)基納入燒杯容器中，加小適量的水，緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂，則不需要對(duì)培養(yǎng)基加熱；相反含有瓊脂，就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。待培養(yǎng)基完全溶解后再加入適量的水?dāng)嚢杈鶆?。如?zhǔn)備的北京中海培養(yǎng)基較多，在不銹鋼鍋中融化加熱，可以用溫水加熱，需不停攪拌，防止焦化。如果不小心出現(xiàn)焦化現(xiàn)象，則制備好的培養(yǎng)基將無法使用，必須重新配制中海生物培養(yǎng)基。不要使用銅或鐵容器溶解制備培養(yǎng)基，因?yàn)殂~或鐵容器可能會(huì)導(dǎo)致容器內(nèi)培養(yǎng)基中銅、鐵超標(biāo)，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，其中培養(yǎng)基中銅含量大于0.3毫克每升，細(xì)菌不適宜生長(zhǎng)。鐵含量超過0.14毫克每升，防止細(xì)菌產(chǎn)生有毒的。容易發(fā)生反應(yīng)和沉淀的藥物應(yīng)單獨(dú)溶解，然后加入培養(yǎng)基中，如磷酸氫二鉀和硫酸鎂。陜西培養(yǎng)基制備器多少錢