培養(yǎng)平板培養(yǎng)基是被用于獲得微生物純培養(yǎng)的很常用的固體培養(yǎng)基形式,它是冷卻凝固后的固體培養(yǎng)基在無菌培養(yǎng)皿中形成的培養(yǎng)基固體平面,常被簡稱為培養(yǎng)平板。也叫平面培養(yǎng)基、平皿培養(yǎng)基。平板培養(yǎng)基常用于單孢分離,測定菌絲生長速度,觀察菌落的形態(tài),拮抗實(shí)驗(yàn),測定接種空間雜菌數(shù)。平板培養(yǎng)基制作方法如下:將培養(yǎng)皿洗凈、干燥,使各培養(yǎng)皿蓋方向一致,用牛皮紙包好,或放入特制鐵罐內(nèi),注明皿蓋的方向。高壓滅菌或干燥滅菌后備用。取剛滅菌后尚未凝固的培養(yǎng)基置于無菌箱或超凈工作臺(tái)內(nèi),先左手持三角瓶,右手反轉(zhuǎn)手掌用中指和無名指撥出棉塞或硅膠賽(或不翻轉(zhuǎn)手掌用小指和手掌撥出棉塞),同時(shí)將三角瓶轉(zhuǎn)換至右手,而后左手拿平皿,以大拇指和中指將皿蓋打開一縫,至瓶口剛好伸人。三角瓶口經(jīng)火焰燒灼后,傾入滅菌或溶化、冷卻至55~60°C的培養(yǎng)基約15mL(勿使瓶口靠在平皿壁上,以免沾染皿壁),迅速蓋好皿蓋,置于桌上輕輕旋轉(zhuǎn)平皿,使培養(yǎng)基均勻分布于整個(gè)平皿底部,冷凝后即為平板培養(yǎng)基。有時(shí)凝固后的培養(yǎng)基表面有冷凝水,可將平皿蓋打開倒置于37℃溫箱,除去冷凝水,否則將影響平板分離培養(yǎng)效果。為防止冷凝水過多,也可將培養(yǎng)基冷卻至45~50°C再倒平板。高壓蒸汽滅菌一般使培養(yǎng)基pH降低,應(yīng)在配制培養(yǎng)基時(shí)加以調(diào)節(jié)。天津自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng),以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化.迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,較后必須加以補(bǔ)足。海南實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器注意不要過度干燥。商品化的平板瓊脂培養(yǎng)基應(yīng)按照廠商提供的說明使用。
液體培養(yǎng)基:為確定液體培養(yǎng)基的生長率,應(yīng)接種適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)物。下面介紹的是用定量、半定量和定性方法評估生長率和選擇性的方法。所推薦的這些方法都是通過將液體培養(yǎng)基以傾注或劃線方式接種到瓊脂平板上培養(yǎng)后,計(jì)數(shù)或計(jì)算液體培養(yǎng)基分?jǐn)?shù)而得出其生長數(shù)量的。對于液體培養(yǎng)基定性測試方法,則通過肉眼觀察來實(shí)現(xiàn)。目標(biāo)菌和非目標(biāo)菌的定量稀釋法步驟如下:選擇液體培養(yǎng)基10mL/管待檢。接種目標(biāo)菌:將少量測試菌株培養(yǎng)物(每管10CFU~100CFU)接種測試肉湯和標(biāo)準(zhǔn)肉湯,混勻。接種非目標(biāo)菌:將大量測試菌株培養(yǎng)物(每管大于1000CFU)接種測試肉湯和標(biāo)準(zhǔn)肉湯,混勻。
滅菌:分裝好的培養(yǎng)基應(yīng)立即進(jìn)行滅菌。滅菌的方法種類如下:1.高壓蒸汽滅菌法:大多數(shù)熱培養(yǎng)基都可用此法,小量分裝時(shí),用121℃、15min;滅菌量大時(shí),用121℃、30min滅菌;含糖類的培養(yǎng)基只能113℃~115℃、15min滅菌,避免糖類遭破壞。2.煮沸滅菌:對含有不耐高溫物質(zhì)的培養(yǎng)基,可使用此方法。3.過濾除菌:以過濾的方法除菌,用無菌操作技術(shù),定量加入培養(yǎng)基。血液、物品可用無菌操作技術(shù)抽取,加入冷卻到50℃左右的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基含有不耐熱的物質(zhì)時(shí),可用此法。液體培養(yǎng)基具有進(jìn)行通氣培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)。
培養(yǎng)基的制備步驟有哪些:第1,用水:培養(yǎng)基制備用水應(yīng)使用電阻率不小于30萬Ωcm的蒸餾水或與其同質(zhì)的水,較好不使用離子交換器生產(chǎn)的去離子水。第二,稱量。稱量時(shí)要用獨(dú)有的角匙,避免交叉污染而影響檢驗(yàn)結(jié)果;干粉培養(yǎng)基易吸潮,如有條件,盡量在濕度較低的房間稱取培養(yǎng)基。第三,復(fù)水,復(fù)水時(shí)不得用銅鍋或鐵鍋,以防有離子混入培養(yǎng)基中,影響微生物的生長;容器的大小需大于復(fù)水后培養(yǎng)基總體積的2倍以上,避免在加熱溶解過程中,培養(yǎng)基溢出;含有瓊脂粉的培養(yǎng)基,在加熱溶解之前可以浸泡數(shù)分鐘;加熱培養(yǎng)基時(shí)一定要進(jìn)行攪拌,特別是瓊脂類培養(yǎng)基。為避免燒焦和沸騰溢出,對于少量的培養(yǎng)基較好使用沸水浴進(jìn)行加熱。培養(yǎng)基根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基。河南培養(yǎng)基制備器多少錢
培養(yǎng)基制備器勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁。天津自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器:1.操作簡單,安全可靠。溫度和壓力嚴(yán)格控制鎖定裝載艙口和外部蓋子,不存在意外打開,保證了環(huán)境和操作者的安全。內(nèi)部的管道和容器可以更換,方便移除和清洗。每一款MediaPrep高壓滅菌器都是這樣裝配和控制的,是一種標(biāo)準(zhǔn)配置。2.高效而強(qiáng)大的加熱和制冷系統(tǒng)功能強(qiáng)大的加熱器,能夠迅速加熱;快速制冷是通過循環(huán)水和壓力(加入內(nèi)部的軟化水產(chǎn)生的)所進(jìn)行的。利用與外部水連接的盤狀熱交換器,能夠使內(nèi)部迅速冷卻,整個(gè)過程包括:加熱、滅菌和冷卻(至50°C),依據(jù)容器的大小、培養(yǎng)基的數(shù)量和冷卻水的溫度,只需60-120分鐘即可完成。負(fù)載的壓力,有效地避免了培養(yǎng)基過溫失效和培養(yǎng)基中氣泡的產(chǎn)生??諝鈮嚎s機(jī)是內(nèi)置的。全自動(dòng)控制程序,確保內(nèi)部溫度均一,從而保證了配制和滅菌的培養(yǎng)基具有更高的質(zhì)量,整個(gè)過程,在一個(gè)設(shè)定溫度內(nèi),從初的加熱到混合和滅菌,后到冷卻,都是微處理器控制的,而且滅菌之后保持的溫度是可以預(yù)設(shè)的。殺菌劑裝入口寬大,并附有保險(xiǎn)鎖。殺菌劑可從此口加入,也可用注射器從硅酮膜注入。天津自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器