常用培養(yǎng)基的制備及注意事項(xiàng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馀囵B(yǎng)基的配制原理；掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟；了解常見(jiàn)滅菌、清毒基本原理及方法；掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過(guò)濾除菌的操作方法。二、實(shí)驗(yàn)原理培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長(zhǎng)繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因素和水。根據(jù)微生物的種類(lèi)和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌?，培養(yǎng)基也有不同的種類(lèi)和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用較普遍和較普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時(shí)又稱(chēng)為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需要的較基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，所以可供微生物生長(zhǎng)繁殖之用。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過(guò)升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。培養(yǎng)基，是指供給微生物、植物或動(dòng)物（或組織）生長(zhǎng)繁殖的，由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。遼寧大容量 培養(yǎng)基制備器

配制培養(yǎng)基的原則：調(diào)節(jié)氧化還原電位(Eh)各種微生物對(duì)培養(yǎng)基的Eh要求不同。適宜好氧微生物生長(zhǎng)的Eh值一般為+0.3~+0.4V，厭氧微生物只能在+0.1V以下生長(zhǎng)，因此，培養(yǎng)好氧微生物必須保證氧的供應(yīng)，可在培養(yǎng)基中加入氧化劑提高Eh值。調(diào)節(jié)滲透壓多數(shù)微生物能耐受較大范圍滲透壓的變化。培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度過(guò)大，會(huì)使?jié)B透壓過(guò)高，使細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長(zhǎng)。低滲溶液則使細(xì)胞吸水膨脹易破裂，因此，配制培養(yǎng)基時(shí)要掌握營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度。常在培養(yǎng)基中加人適量的Nacl以提高滲透壓。原料來(lái)源的選擇力求節(jié)約：配制培養(yǎng)基還應(yīng)遵循力求節(jié)約的原則，盡量選用價(jià)格便宜、來(lái)源方便的原料。特別是在工業(yè)發(fā)酵中，培養(yǎng)基用量大，更應(yīng)注意利用低成本的原料，降低產(chǎn)品成本。遼寧大容量 培養(yǎng)基制備器一般培養(yǎng)基用0.IMPa(121℃)維持15~30min即可徹底滅菌。

培養(yǎng)基準(zhǔn)備器的滅菌：培養(yǎng)基準(zhǔn)備器能夠保證快速溫和的制備標(biāo)準(zhǔn)和高敏感性培養(yǎng)基。的加熱冷卻系統(tǒng)加上均勻的攪拌，大程度上減低了對(duì)培養(yǎng)基的熱應(yīng)力，保證了培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)性。培養(yǎng)基準(zhǔn)備器的操作高度安全：滅菌開(kāi)始前，會(huì)有一個(gè)程序自動(dòng)檢查整個(gè)系統(tǒng)的氣密性，例如：鍋蓋的密封圈是否完好，這能夠避免培養(yǎng)基在滅菌過(guò)程中突然漏氣引起卸壓，此外，培養(yǎng)基準(zhǔn)備器有4個(gè)溫度/壓力檢測(cè)器，保證用戶(hù)及工作環(huán)境的高度安全。鍋蓋上裝有**的過(guò)壓安全保護(hù)裝置，在電子檢測(cè)系統(tǒng)失效時(shí)，自動(dòng)卸壓以保障安全。

制備培養(yǎng)基的小技巧1.培養(yǎng)基可按制備也可使用按生產(chǎn)的符合規(guī)定的商品化成品培養(yǎng)基，脫水培養(yǎng)基除附有和使用說(shuō)明外還應(yīng)注明有效期、貯存條件、適用性試驗(yàn)的質(zhì)控菌株和用途。配制時(shí)應(yīng)按使用說(shuō)明上的要求操作，受潮結(jié)塊不能使用，以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求。2.配制培養(yǎng)基使用的容器應(yīng)是玻璃器皿或搪瓷器皿如搪瓷筒、量筒、漏斗、三角燒瓶、刻度吸管、試管、培養(yǎng)皿等。使用的器皿應(yīng)洗凈，用蒸餾水沖凈，烘干后方可使用。禁用金屬容器如鐵、銅、鋁容器，避免金屬離子與培養(yǎng)基成分結(jié)合，生成有害物質(zhì)，影響細(xì)菌生長(zhǎng)。培養(yǎng)基制備器完全稱(chēng)取完畢后，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。

微生物限度:細(xì)胞培養(yǎng)基不是無(wú)菌產(chǎn)品，其中的微生物在一定條件下會(huì)吸收細(xì)胞培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)滋生繁殖，導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)基變質(zhì)失效?？刂萍?xì)胞培養(yǎng)基中細(xì)菌和霉菌，是延長(zhǎng)細(xì)胞培養(yǎng)基有效期的方法之一。清大天一在參考《中華人民當(dāng)?shù)厮幍洹?005版二部附錄第100頁(yè)的口服給藥制劑的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)，并嚴(yán)于該標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品的細(xì)菌數(shù)每1g不得超過(guò)200個(gè)，霉菌數(shù)每1g不得超過(guò)50個(gè)。稱(chēng)取樣品1g，加入無(wú)菌純化水10mL溶解，混勻即得試樣。按中華人民當(dāng)?shù)厮幍?005年版二部附錄ⅪJ微生物限度檢查法進(jìn)行，檢查項(xiàng)目為細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)。檢查法采用平皿法。半組合培養(yǎng)基指一類(lèi)主要以化學(xué)試劑配制，同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。遼寧大容量 培養(yǎng)基制備器

異養(yǎng)微生物的合成能力較弱，不能以CO2作為碳源或主要碳源，故應(yīng)在培養(yǎng)基中至少添加一種有機(jī)物。遼寧大容量 培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基的配置應(yīng)該注意的幾大步驟：常用玻璃儀器的準(zhǔn)備制備培養(yǎng)基所用的吸管、錐形瓶、毛細(xì)吸管、平皿等玻璃儀器用前要用肥皂水洗刷后用清水沖洗干凈，晾干后備用。（1）平皿用紙或布包好，或裝在金屬盒內(nèi)，于121℃高壓蒸汽菌3min后烘干，備用。（2）試管管口用棉花塞或硅氟塑料試管塞塞好，再用布或報(bào)紙包扎好，121℃高壓蒸汽滅菌20℃后烘干，備用。（3）吸管及滴管先用少許棉花塞于吸口端（防止污染物吸出，或橡皮帽內(nèi)的氣體污染），然后用紙包后或裝入金屬吸管筒內(nèi)，于121℃高壓蒸汽滅菌20min后烘干，備用。其他玻璃器皿均應(yīng)按上法處理，也應(yīng)裝金屬筒內(nèi)160℃干熱滅菌2h后，備用。遼寧大容量 培養(yǎng)基制備器