培養(yǎng)基pH值不在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)的問題：出現(xiàn)此類情況有很多原因，生物大致分為①廠家質(zhì)量：出廠時(shí)pH不穩(wěn)定。②滅菌問題：是蒸壓過高或殺菌時(shí)間過長，導(dǎo)致葡萄糖焦化，因此，pH值降低。③存放周期：保存時(shí)間超過保質(zhì)期或結(jié)塊水的質(zhì)量有問題。④水質(zhì)問題：采用去離子水/蒸餾水/純凈水等，不要采用礦泉水和自來水。⑤存儲溫度：儲存溫度過高。⑥光線直射等六種原因，可逐一檢查排除解決問題。這樣的培養(yǎng)基稱之為鑒別培養(yǎng)基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基就是一種常用的鑒別性培養(yǎng)基。自動培養(yǎng)基制備器可以快速的準(zhǔn)備好滅菌，放入滅菌鍋。遼寧瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器

制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：a.液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的，其中的成分基本上溶于水，沒有明顯的固形物，液體培養(yǎng)基營養(yǎng)成分分布均勻，易于控制微生物的生長代謝狀態(tài)。b.固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂、明膠、硅膠等，以瓊脂為常用。固體培養(yǎng)基在實(shí)際中用得十分普遍。在實(shí)驗(yàn)室中，它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗(yàn)雜菌、計(jì)數(shù)、保藏、生物測定等。c.半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中，就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例，它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時(shí)可用來觀察微生物的動力，有時(shí)用來保藏菌種。遼寧瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器是供微生物、植物、動物組織和細(xì)菌生長和維持生長用的人工配置的養(yǎng)料。

培養(yǎng)基配制：配制用水，培養(yǎng)基的大部分是水，所以水的質(zhì)量直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。按Waymouth標(biāo)準(zhǔn)，水的電阻應(yīng)為200萬歐姆，一般實(shí)驗(yàn)室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。培養(yǎng)基：培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基，以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）調(diào)pH至7.2-7.4，若pH值超過7.6或遠(yuǎn)低于6.8，則大多數(shù)細(xì)胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌，使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。血清：培養(yǎng)中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高壓滅菌，無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體，置4℃冰箱存放待用。配制時(shí)含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類、時(shí)間而定，一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制，可選用無血清培養(yǎng)基。

常用培養(yǎng)基的制備及注意事項(xiàng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馀囵B(yǎng)基的配制原理；掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟；了解常見滅菌、清毒基本原理及方法；掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除菌的操作方法。二、實(shí)驗(yàn)原理培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因素和水。根據(jù)微生物的種類和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌囵B(yǎng)基也有不同的種類和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用較普遍和較普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時(shí)又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長繁殖所需要的較基本的營養(yǎng)物質(zhì)，所以可供微生物生長繁殖之用。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。培養(yǎng)基pH值的調(diào)正：pH因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化。

含瓊脂的培養(yǎng)基有時(shí)在平板上不凝固或凝固不好問題：在此種情況下，建議對于需要高壓滅菌的培養(yǎng)基,倒入平板前先搖一搖。主要是瓊脂培養(yǎng)基的分子量比較大，在冷卻過程中容易沉淀到底，造成瓊脂不能均勻分布。對于無需高壓滅菌的培養(yǎng)基，不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重復(fù)三至五次煮沸溶解過程，因一次無法保證瓊脂完全溶解。微生物培養(yǎng)基成分中含有染料或指示劑；不同批次的粉狀培養(yǎng)基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高，顏色越深；研磨時(shí)間越長，顏色越深等三個(gè)原因。液體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基的對應(yīng)詞，是微生物或動植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。遼寧瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器

強(qiáng)力磁力攪拌培養(yǎng)基在內(nèi)腔里混合的均勻性得到確保，并避免凝結(jié)。遼寧瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng)：1、培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法，應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外，一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料，加以比較核對，再依據(jù)自己的使用目的，加以選用，記錄其來源。2、培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)基名稱，配方及其來源，和各種成份的牌號，好終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等，記錄應(yīng)復(fù)制一份，原記錄保存?zhèn)洳?，?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3、培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂，好好一次完成，不要中斷?？蓪⑴浞街糜诎鴤?cè)，每稱完一種成分即在配方面軍做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。遼寧瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器