培養(yǎng)基防止污染應(yīng)該注意以下事項(xiàng)：確認(rèn)工作細(xì)胞庫是否被污染，確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染，確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染，均可用細(xì)菌、病菌及支原體無菌試驗(yàn)來確認(rèn)并排除。同時(shí)要對(duì)無菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)際生產(chǎn)中，可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，48小時(shí)即可觀察有無污染。其它：高壓滅菌設(shè)備、過濾除菌設(shè)備均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證，確保滅菌和除菌效果;前者應(yīng)在投產(chǎn)前及其后的每6個(gè)月進(jìn)行驗(yàn)證，后者應(yīng)在每次除菌前、后進(jìn)行驗(yàn)證工作(至少應(yīng)在除菌后進(jìn)行一次)。另外，應(yīng)將有毒區(qū)與無毒區(qū)嚴(yán)格分開，并有各自自立的空氣凈化系統(tǒng)及孵室，有毒區(qū)對(duì)無毒區(qū)應(yīng)保持相對(duì)負(fù)壓，防止病毒對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞(尤其是細(xì)胞庫)的污染。制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器

如何避免沉淀物的產(chǎn)生：在使用血清的時(shí)候，注意下列的操作：①解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，非常容易產(chǎn)生沉淀物。②解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。③勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。④血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。⑤若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高，時(shí)間過久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。內(nèi)蒙古培養(yǎng)基制備器價(jià)格在配制用于觀察和定量測(cè)定微生物生長(zhǎng)狀況的合成培養(yǎng)基時(shí)，常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑。

微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備的要點(diǎn)：培養(yǎng)基分裝，準(zhǔn)備好的中.海培養(yǎng)基根據(jù)用途不同分為燒瓶、試管等容器，分裝試管量大采用自動(dòng)分液器，分裝試管量小，可以用漏斗分液。分液量不超過容器體積的三分之二。三角瓶不要超過體積的二分之一；瓊脂斜面不要超過試管長(zhǎng)度的五分之一。滅菌后斜面應(yīng)為培養(yǎng)基量的三分之一，底層應(yīng)為培養(yǎng)基量的三分之二；半固態(tài)瓊脂的體積為三分之一；用于接種或保護(hù)細(xì)菌的高級(jí)瓊脂，分裝試管長(zhǎng)度的三分之一和四分之一，接種厭氧菌的量應(yīng)達(dá)到三分之二；瓊脂平板90毫米內(nèi)徑13~15毫升，內(nèi)徑70毫米8~10毫升。如果瓊脂平板表面較水，可將平板倒置，置于37℃培養(yǎng)箱中三十分鐘，晾干后使用。每批培養(yǎng)基分裝在二十毫升左右的小玻璃瓶中，與該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌，在以確定這批培養(yǎng)基的很終pH值。

配制培養(yǎng)基的原則：根據(jù)培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)。由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜，不同微生物有不同的營養(yǎng)要求。因此，要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)，配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)微生物有較強(qiáng)的合成能力，能以簡(jiǎn)單的無機(jī)物如co2和無機(jī)鹽合成復(fù)雜的細(xì)胞物質(zhì)。因此，培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)由簡(jiǎn)單的無機(jī)物組成。異養(yǎng)微生物的合成能力較弱，不能以CO2作為碳源或主要碳源，故應(yīng)在培養(yǎng)基中至少添加一種有機(jī)物。注意營養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比要合適：微生物只有在營養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時(shí)才能良好生長(zhǎng)。營養(yǎng)物質(zhì)濃度過低不能滿足現(xiàn)生長(zhǎng)需要，過高又抑制其生長(zhǎng)。例如，適量的蔗糖是異養(yǎng)微生物的良好碳源和能源，但高濃度蔗糖則抑制菌體生長(zhǎng)。金屬離子是微生物生長(zhǎng)所不可缺少的礦質(zhì)養(yǎng)分，但濃度擴(kuò)大，尤其是重金屬離子，反而抑制其生長(zhǎng)，甚至產(chǎn)生殺菌作用。低滲溶液則使細(xì)胞吸水膨脹易破裂，因此，配制培養(yǎng)基時(shí)要掌握營養(yǎng)物質(zhì)的濃度。

培養(yǎng)基的分類：培養(yǎng)基的分裝，應(yīng)按使用的目的和要求，分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵，其外還須用防水紙包扎（現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者）。分裝時(shí)較好能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí)，分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒，以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中，隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌，以為測(cè)定該批培養(yǎng)基較終pH之用。培養(yǎng)基制備器滅菌之后保持的溫度是可以預(yù)設(shè)的。殺菌劑裝入口寬大，并附有保險(xiǎn)鎖。內(nèi)蒙古瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器

制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：體培養(yǎng)基營養(yǎng)成分分布均勻。培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器

制備培養(yǎng)基有什么要求：1、根據(jù)培養(yǎng)基配方的成分按量稱取，然后溶于蒸餾水中，在使用前對(duì)應(yīng)用的試劑藥品應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)。2、PH測(cè)定及調(diào)節(jié)：PH測(cè)定要在培養(yǎng)基冷至室溫時(shí)進(jìn)行，因在熱或冷的情況下，其PH有一定差異，當(dāng)測(cè)定好時(shí)，按計(jì)算量加入堿或酸混勻后應(yīng)再測(cè)試一次。培養(yǎng)基PH值一定要準(zhǔn)確，否則會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)或影響結(jié)果的觀察。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養(yǎng)基的PH降低或升高，故不宜滅菌壓力過高或次數(shù)太多，以免影響培養(yǎng)基的質(zhì)量，指示劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調(diào)完P(guān)H后再加入培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器