培養(yǎng)平板培養(yǎng)基是被用于獲得微生物純培養(yǎng)的很常用的固體培養(yǎng)基形式,它是冷卻凝固后的固體培養(yǎng)基在無菌培養(yǎng)皿中形成的培養(yǎng)基固體平面,常被簡稱為培養(yǎng)平板。也叫平面培養(yǎng)基、平皿培養(yǎng)基。平板培養(yǎng)基常用于單孢分離,測定菌絲生長速度,觀察菌落的形態(tài),拮抗實驗,測定接種空間雜菌數(shù)。平板培養(yǎng)基制作方法如下:將培養(yǎng)皿洗凈、干燥,使各培養(yǎng)皿蓋方向一致,用牛皮紙包好,或放入特制鐵罐內(nèi),注明皿蓋的方向。高壓滅菌或干燥滅菌后備用。取剛滅菌后尚未凝固的培養(yǎng)基置于無菌箱或超凈工作臺內(nèi),先左手持三角瓶,右手反轉(zhuǎn)手掌用中指和無名指撥出棉塞或硅膠賽(或不翻轉(zhuǎn)手掌用小指和手掌撥出棉塞),同時將三角瓶轉(zhuǎn)換至右手,而后左手拿平皿,以大拇指和中指將皿蓋打開一縫,至瓶口剛好伸人。三角瓶口經(jīng)火焰燒灼后,傾入滅菌或溶化、冷卻至55~60°C的培養(yǎng)基約15mL(勿使瓶口靠在平皿壁上,以免沾染皿壁),迅速蓋好皿蓋,置于桌上輕輕旋轉(zhuǎn)平皿,使培養(yǎng)基均勻分布于整個平皿底部,冷凝后即為平板培養(yǎng)基。有時凝固后的培養(yǎng)基表面有冷凝水,可將平皿蓋打開倒置于37℃溫箱,除去冷凝水,否則將影響平板分離培養(yǎng)效果。為防止冷凝水過多,也可將培養(yǎng)基冷卻至45~50°C再倒平板。培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。重慶全自動培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的驗收:購買的培養(yǎng)基到貨后,應(yīng)有專人做好培養(yǎng)基接受和培養(yǎng)基驗收工作,應(yīng)仔細核對生產(chǎn)企業(yè)提供的關(guān)于培養(yǎng)基資料、培養(yǎng)基名稱、規(guī)格數(shù)量、外觀特征、批號、保質(zhì)期是否符合要求。每批培養(yǎng)基到貨物后都應(yīng)對培養(yǎng)基的質(zhì)量進行檢測,滿足檢測方法規(guī)定的要求后方可投入使用。培養(yǎng)基是液體、半固體或固體形式的,含天然或合成成分,用于保證微生物繁殖或保持其活力的物質(zhì)。保存是否得當、配制使用是否正確等都直接影響到檢測結(jié)果的準確性。湖南大容量 培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)酵母菌一般用麥芽汁培養(yǎng)基,培養(yǎng)霉菌則一般用查氏合成培養(yǎng)基。
馬鈴薯培養(yǎng)基的制作過程:(1)稱量和熬煮:按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾,濾渣棄取。濾液補充水分到1000ml。(2)加熱溶解:把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉網(wǎng)上,小火加熱,并用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂完全溶解后,再補充水分至所需量。(3)分裝:按實訓(xùn)要求,將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶內(nèi)。分裝時可用三角漏斗以免使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上造成污染。分裝量:固體培養(yǎng)基約為試管高度的1/5,滅菌后制成斜面,分裝入三角瓶內(nèi)以不超過其容積的一半為宜;半固體培養(yǎng)基以試管高度的1/3為宜,滅菌后垂直待凝。(4)加棉塞:培養(yǎng)基分裝完畢后,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等),以阻止外界微生物進入培養(yǎng)基內(nèi)造成污染,并保證有良好的通氣性能。
無菌補料:通過分裝口可以定量添加無菌添加劑。大尺寸的分裝口帶有安全鎖。通過使用一個瓶子將添加劑添加到分裝開口或通過一個septum膜,使用注射器將添加劑加入,確保了添加劑的無菌添加。無菌分裝:培養(yǎng)基制備器的分裝口可以在分裝的時候打開,用于無菌分裝培養(yǎng)基。硅膠管是使用分裝接頭連接到分裝口。為了確保培養(yǎng)基的無菌分裝,硅膠管和分裝接頭必須提前在滅菌器中滅菌。培養(yǎng)基可以通過集成的空壓機產(chǎn)生的無菌空氣壓力分裝或通過連接到常見的蠕動泵或其他集成成泵的裝置,來進行培養(yǎng)基的分裝。半合成培養(yǎng)基在合成培養(yǎng)基中,加入某種或幾種天然成分。
簡單制作培養(yǎng)基,需要完成以下幾個主要步驟:需要選擇培養(yǎng)基配方,同一種培養(yǎng)基,其表達方式往往存在著差異。所以,除了應(yīng)當嚴格按照標準方法的規(guī)定編制之外,我們一般應(yīng)盡可能收集有關(guān)數(shù)據(jù),加以比較和核對,然后根據(jù)自己的目的選擇和記錄數(shù)據(jù)來源。需記錄培養(yǎng)基的制備,培養(yǎng)基的制備記錄包括培養(yǎng)基的名稱、配方及其來源、pH值、滅菌溫度、時間、配制日期、制備人等,并且要復(fù)印記錄和保存原始記錄備查。對副本的記錄應(yīng)該和培養(yǎng)基一起保存,以防出現(xiàn)混亂。需稱重培養(yǎng)基的成分,培養(yǎng)基成分要準確稱量,并注意防止混淆。每一種成分稱量完畢后,都要在分裝的一面打上記號,然后將分裝的藥物一起放在左邊。每一個成分稱量完之后,都會向右移動。全部稱量完畢,應(yīng)再次檢查。培養(yǎng)基一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。湖南大容量 培養(yǎng)基制備器
全自動培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng):全自動程序,無人值守;分裝過程無需人工干預(yù)。重慶全自動培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備基本方法:培養(yǎng)基配方的選定,同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應(yīng)嚴格按其規(guī)定進行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對,再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來源。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進行pH的初步調(diào)正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2。而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應(yīng)隨時注意探索經(jīng)驗、以期能掌握培養(yǎng)基的很終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。重慶全自動培養(yǎng)基制備器