微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:稱取數(shù)量,用1/100的電子天平稱出培養(yǎng)基所需的藥物。首先參照配方計算出配制相應(yīng)培養(yǎng)基需要各成分的數(shù)量,然后用電子天平準(zhǔn)確稱取重量(將稱量紙折疊成簸箕盛藥)。培養(yǎng)基過濾,如果對配制的培養(yǎng)基沒有特殊要求,這一步可以省略。中'海培養(yǎng)基如有渾濁和沉淀現(xiàn)象,可將需要澄清的液體培養(yǎng)基用油紙過濾。固體介質(zhì)可以用雙層紗布過濾,中間有一層薄薄的脫脂棉。如果過濾法不能滿足澄清要求,可以采用蛋清澄清法,即將培養(yǎng)基加熱冷卻至五十度至六十度,不超過三角瓶一半的容量。每一千毫升放入1~2個蛋清,用力搖晃三至五分鐘,用121℃高壓蒸汽滅菌二十分鐘,趁熱取出過濾。培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。甘肅瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基質(zhì)量測試:(1)澄清度:水是細(xì)胞培養(yǎng)基的溶劑。細(xì)胞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分只有完全溶解于水才能被細(xì)胞吸收攝取,細(xì)胞才能生長增殖,因此細(xì)胞培養(yǎng)基是否溶解以及培養(yǎng)液是否透明澄清直接影響培養(yǎng)基使用。該項目是通過對水溶解后的細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度檢查,判斷細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度。按中國藥典2005年版二部附錄ⅨB進(jìn)行。(2)pH值:哺乳類動物細(xì)胞生長需要合適的酸堿度,pH過高或者過低都會導(dǎo)致細(xì)胞死亡。pH值的測定也可以檢查細(xì)胞培養(yǎng)基的批間差。清大天一標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定取規(guī)定量供試品,用注射用水(水溫20℃-30℃)溶解至1L,加入規(guī)定量碳酸氫鈉到上述溶液中,用與細(xì)胞培養(yǎng)基溶液pH值相近的兩點標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校準(zhǔn)后的酸度計進(jìn)行測定。按中國藥典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行;加入規(guī)定量的碳酸氫鈉到上述溶液中,按中國藥典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行。吉林瓊脂培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)由簡單的無機物組成。
微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:培養(yǎng)基滅菌處理:分裝完成的培養(yǎng)基應(yīng)馬上滅菌。其殺毒滅菌方式主要有三種類型:高壓蒸汽滅菌方式,此方法可用于大多數(shù)耐熱培養(yǎng)基。對于小份:使用121°C十五分鐘;大份:121°C三十分鐘;對于含碳水化合物的中.海培養(yǎng)基,需113~115°C十五分鐘。滅菌以避免糖分的破壞。煮沸滅菌法方式,此方法可用于含有不耐高溫物質(zhì)的培養(yǎng)基。過濾除菌方式,過濾除菌,采用無菌技術(shù)定量添加培養(yǎng)基。血液和可以用無菌技術(shù)抽取并加入冷卻至約五十度的培養(yǎng)基中。當(dāng)中'海培養(yǎng)基中含有不耐熱物質(zhì)時可以使用此方法。
簡單制作培養(yǎng)基,需要完成以下幾個主要步驟:簡單制作培養(yǎng)基,必須將其過濾并澄清液體介質(zhì)必須完全澄清,普通液體介質(zhì)可用濾紙過濾,濾紙應(yīng)折成折扇狀或漏斗狀,以免濾紙因水力不均而破裂。當(dāng)溫度較高時,培養(yǎng)基可以用干凈的白天鵝絨過濾。新制肉、肝、血、馬鈴薯等濾液,必須用絲絨布過濾,再用濾紙一次又一次地過濾。若過濾方法不能滿足澄清的要求,則應(yīng)采用蛋清過濾。需要對介質(zhì)分類處理,按培養(yǎng)基及試管內(nèi)其它燒瓶使用的容器、用途分為適當(dāng)。貨運量超過每2個集裝箱3個容量包裝的要求。封堵也是容器外包,可用防水防潮紙塞紙封堵容器內(nèi)棉。電動式裝配機采用定量很好的重用或半自動解。預(yù)處理和預(yù)處理對滅菌容器的清洗要干燥,滅菌時要徹底,培養(yǎng)基要干燥。一只小玻璃瓶批培養(yǎng)基被檢測出,培養(yǎng)基被一批pH批作為該值基準(zhǔn)時,應(yīng)被分成20mL的培養(yǎng)基進(jìn)行消毒處理。培養(yǎng)基長時間的高溫滅菌會使某些不耐熱的物質(zhì)破壞,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖。
配制培養(yǎng)基應(yīng)遵循的幾個原則:1、目的明確:培養(yǎng)不同的微生物必須采用不同的培養(yǎng)條件;培養(yǎng)目的不同,原料的選擇和配比不同;2、營養(yǎng)協(xié)調(diào):微生物細(xì)胞組成元素的調(diào)查或分析,是設(shè)計培養(yǎng)基時的重要參考依據(jù),微生物細(xì)胞內(nèi)各種成分間有一較穩(wěn)定的比例。3、理化適宜:指培養(yǎng)基的pH值、滲透壓、水活度和氧化還原電勢等物理化學(xué)條件較為適宜。4、經(jīng)濟節(jié)約:配制培養(yǎng)基時應(yīng)盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成份,特別是在發(fā)酵工業(yè)中,以降低生產(chǎn)成本。Systec培養(yǎng)基準(zhǔn)備器能夠保證快速溫和的制備標(biāo)準(zhǔn)和高敏感性培養(yǎng)基。福建瓊脂培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等。甘肅瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的使用:1.瓊脂培養(yǎng)基的融化:將培養(yǎng)基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經(jīng)過高壓滅菌的培養(yǎng)基盡量減少重新加熱的時間,避免過度加熱。培養(yǎng)基融化后立即移開,室溫靜置片刻(約2min),以免玻璃容器發(fā)生破裂。融化后的培養(yǎng)基放入47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫,冷卻到47℃~50℃所需的時間取決于培養(yǎng)基的類型、體積和在水鍋里的分裝量。融化后內(nèi)培養(yǎng)基應(yīng)盡快使用,放置時間一般不超過4h。剩余的培養(yǎng)基固后不得再次融化使用。特別是靈敏性培養(yǎng)基,應(yīng)根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),縮短融化后放置的時間。甘肅瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器