溶化:培養(yǎng)基放入燒杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻璃棒攪拌。如果培養(yǎng)基中不含有瓊脂,培養(yǎng)基不需要加熱;如果含有瓊脂,則需要用本生燈或電磁爐加熱煮沸,完全溶解后,再補(bǔ)齊所需水,并攪拌均勻。如果配置的培養(yǎng)基量很大,可用不銹鋼鍋加熱溶化,可先用溫水加熱并隨時(shí)攪動(dòng),防止焦化,如有焦化現(xiàn)象,配制的培養(yǎng)基就不能使用,要重新配制。配制培養(yǎng)基時(shí)不可用銅或鐵的容器溶化,因銅或鐵制容器可能會(huì)使培養(yǎng)基中的銅和鐵的含量超標(biāo),影響實(shí)驗(yàn)(培養(yǎng)基中銅含量大于0.3mg/L,細(xì)菌不宜生長(zhǎng),鐵含量超過(guò)0.14mg/L,妨礙細(xì)菌產(chǎn)有害)。對(duì)容易發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生沉淀的藥品,要分開(kāi)溶解,較后加入培養(yǎng)基,如磷酸二氫鉀和硫酸鎂。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過(guò)升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。遼寧Systec培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基配制后一般都有沉渣或混濁出現(xiàn)醫(yī)學(xué),需過(guò)濾成清晰透明后方可使用,常用的過(guò)濾方法如下:1.液體培養(yǎng)基:液體培養(yǎng)基必須清晰,以便觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況,常用濾紙過(guò)濾,亦可在加熱前加入用水稀釋的雞蛋白(1000ml培養(yǎng)基用1個(gè)雞蛋白)在100℃加熱后保持60~70℃,40~60分鐘,使其不溶性物質(zhì)附于凝固的蛋白上而沉淀,然后再用虹吸法吸出上清液或以濾紙過(guò)濾。2.固體培養(yǎng)基:如系瓊脂培養(yǎng)基,于加熱融化后需趁熱以絨布或兩層紗布中夾脫脂棉過(guò)濾;亦可用自然沉淀法,即將瓊脂培養(yǎng)基盛人鋁鍋或廣口搪瓷容器內(nèi),以高壓(103.43kPa)蒸汽融化15分鐘后,靜置高壓鍋內(nèi)過(guò)夜,次日將瓊脂傾出,用刀將底部沉渣切去,再融化即可收清晰的瓊脂培養(yǎng)基。遼寧Systec培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器不存在意外打開(kāi),保證了環(huán)境和操作者的安全。
培養(yǎng)基的類(lèi)別按照培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分:培養(yǎng)基按其物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基三類(lèi)。(1)古體培養(yǎng)基。是在培養(yǎng)基中加入凝固劑,有瓊脂、明膠、硅膠等。古體培養(yǎng)基常月于微生物分離、鑒定、計(jì)數(shù)和菌種保存等方面。(2)液體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基中不加任何凝固劑。這種培養(yǎng)基的成分均勻,微生物能充按標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的培養(yǎng)時(shí)間和溫度對(duì)接種后的平板進(jìn)行培養(yǎng),目標(biāo)菌應(yīng)呈現(xiàn)良好生長(zhǎng),并有典型的菌落外觀、大小和形態(tài),非目標(biāo)菌應(yīng)是微弱生長(zhǎng)或無(wú)生長(zhǎng)。
培養(yǎng)基的脫氣:必要時(shí),在使用前將養(yǎng)基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時(shí)松開(kāi)容器蓋子;加熱后蓋緊蓋子,并迅速冷卻至使用溫度。3.添加成分的加入:對(duì)熱不穩(wěn)定的添加成分應(yīng)在培養(yǎng)基冷卻至47℃~50℃時(shí)加入,滅菌的添加成分加入前應(yīng)冷卻至室溫,避免冷的液體會(huì)造成瓊脂凝膠或形成片狀物。4.培養(yǎng)基的棄置:所有污染和未使用的培養(yǎng)基的棄置應(yīng)采用安全的方式,并符合相關(guān)法律法規(guī)的規(guī)定。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌,以為測(cè)定該批培養(yǎng)基較終pH之用。制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn):易于控制微生物的生長(zhǎng)代謝狀態(tài)。
高效而強(qiáng)大的加熱和制冷系統(tǒng):功能強(qiáng)大的加熱器,能夠迅速加熱;快速制冷是通過(guò)循環(huán)水和壓力(加入內(nèi)部的軟化水產(chǎn)生的)所進(jìn)行的。利用與外部水連接的盤(pán)狀熱交換器,能夠使內(nèi)部迅速冷卻,整個(gè)過(guò)程包括:加熱、滅菌和冷卻(至50°C),依據(jù)容器的大小、培養(yǎng)基的數(shù)量和冷卻水的溫度,只需60-120分鐘即可完成。負(fù)載的壓力,有效地避免了培養(yǎng)基過(guò)溫失效和培養(yǎng)基中氣泡的產(chǎn)生。空氣壓縮機(jī)是內(nèi)置的。全自動(dòng)控制程序,確保內(nèi)部溫度均一,從而保證了配制和滅菌的培養(yǎng)基具有更高的質(zhì)量,整個(gè)過(guò)程,在一個(gè)設(shè)定溫度內(nèi),從z初的加熱到混合和滅菌,z后到冷卻,都是微處理器控制的,而且滅菌之后保持的溫度是可以預(yù)設(shè)的。殺菌劑裝入口寬大,并附有保險(xiǎn)鎖。殺菌劑可從此口加入,也可用注射器從硅酮膜注入。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說(shuō)明配置。遼寧Systec培養(yǎng)基制備器
液體培養(yǎng)基:為確定液體培養(yǎng)基的生長(zhǎng)率,應(yīng)接種適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)物。遼寧Systec培養(yǎng)基制備器
微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備的要點(diǎn):對(duì)LST培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí),發(fā)酵管內(nèi)可能存在氣泡。為了防止發(fā)酵管內(nèi)形成氣泡,可以采取以下措施:倒置的小管充滿培養(yǎng)基,不留氣泡,然后加入含有LST的試管中。在關(guān)閉殺菌鍋的排氣閥之前,將鍋內(nèi)的氣體排空。試管塞不要塞得太緊。使用硅膠塞時(shí),請(qǐng)勿使用橡膠塞。不可過(guò)早打開(kāi)殺菌鍋,等殺菌鍋內(nèi)的氣壓和溫度降到與室溫相同或相差不大時(shí)再打開(kāi)殺菌鍋。如果按照以上方法操作還有氣泡,可以用水作為培養(yǎng)基組的對(duì)照試驗(yàn)。如果培養(yǎng)基組有氣泡,對(duì)照組沒(méi)有氣泡,可以確定培養(yǎng)基本身原因。遼寧Systec培養(yǎng)基制備器