培養(yǎng)基配置原則：選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)，總體而言，所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子、水及能源，但由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜，不同微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的，因此首先要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡單的無機(jī)物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等復(fù)雜的有機(jī)物，因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以（或應(yīng)該）由簡單的無機(jī)物組成。在該培養(yǎng)基配制過程中并未專門加入其他碳源物質(zhì)，而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源。就微生物主要類型而言，有細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌、原生動(dòng)物、藻類及病毒之分，培養(yǎng)它們所需的培養(yǎng)基各不相同。在實(shí)驗(yàn)室中常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（或簡稱普通肉湯培養(yǎng)基）培養(yǎng)細(xì)菌，用高氏I號(hào)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)放線菌，培養(yǎng)酵母菌一般用麥芽汁培養(yǎng)基，培養(yǎng)霉菌則一般用查氏合成培養(yǎng)基。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒，以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。上海瓊脂培養(yǎng)基制備器

制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基：培養(yǎng)基滅菌后，如制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基，須趁培養(yǎng)基未凝固時(shí)進(jìn)行。(1)制作斜面培養(yǎng)基。在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上放1支長0.5-1米左右的木條,厚度為1厘米左右，將試管頭部枕在木條上，使管內(nèi)培養(yǎng)基自然傾斜，凝固后即成斜面培養(yǎng)基。(2)制作平板培養(yǎng)基。將剛剛滅過菌的盛有培養(yǎng)基的錐形瓶和培養(yǎng)皿放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，點(diǎn)燃酒精燈，右手托起錐形瓶瓶底，左手拔下棉塞，將瓶口在酒精燈上稍加灼燒，左手打開培養(yǎng)皿蓋，右手迅速將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，每皿約倒入10毫升，以鋪滿皿底為度。鋪放培養(yǎng)基后放置15分鐘左右，待培養(yǎng)基凝固后，再5個(gè)培養(yǎng)皿一疊，倒置過來，平放在恒溫箱里，24小時(shí)后檢查，如培養(yǎng)基末長雜菌，即可用來培養(yǎng)微生物。上海瓊脂培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。

培養(yǎng)基配制方法：正確制備培養(yǎng)基是微生物檢驗(yàn)的較基礎(chǔ)步驟之一，使用脫水培養(yǎng)基和其他成分，尤其是含有有毒物質(zhì)（如膽鹽或其他選擇劑）的成分時(shí)，應(yīng)遵守良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說明配制。如重量（體積）、pH、制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實(shí)驗(yàn)室使用各種基礎(chǔ)成分制備培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制，并記錄相關(guān)信息，如：培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級(jí)別、每個(gè)成分物質(zhì)含量、制造商、批號(hào)、pH、培養(yǎng)基體積（分裝體積）、無菌措施（包括實(shí)施的方式、溫度及時(shí)間）、配置日期、人員等，以便溯源。

Systec培養(yǎng)基準(zhǔn)備器的工作模式：它擁有2個(gè)主要工作模式與2個(gè)附加模式可供選擇，參數(shù)可自己設(shè)置。1.標(biāo)準(zhǔn)模式：制備標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基、或高敏感性培養(yǎng)基。滅菌溫度/時(shí)間及分裝時(shí)間均可設(shè)置。2.巧克力瓊脂模式：一種特殊的2步制備程序，可制備復(fù)雜培養(yǎng)基。在一次滅菌后可通過補(bǔ)料口添加營養(yǎng)物質(zhì)，如血液等，然后進(jìn)行二次升溫。3.水浴模式：正式滅菌前在30–80°C下，對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行溶解處理。在滅菌鍋中可以放置玻璃器皿，并對(duì)玻璃器皿中的液體進(jìn)行水浴加熱。4.滅菌模式：啟用滅菌模式后，可以當(dāng)作普通的臺(tái)式滅菌器，用來對(duì)少量試管、燒瓶等玻璃器皿滅菌。培養(yǎng)基制備器系統(tǒng)自動(dòng)調(diào)整供給樣品劑量保證了重現(xiàn)性結(jié)果。

常用培養(yǎng)基的制備及注意事項(xiàng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馀囵B(yǎng)基的配制原理；掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟；了解常見滅菌、清毒基本原理及方法；掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除菌的操作方法。二、實(shí)驗(yàn)原理培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因素和水。根據(jù)微生物的種類和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌?，培養(yǎng)基也有不同的種類和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用較普遍和較普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時(shí)又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長繁殖所需要的較基本的營養(yǎng)物質(zhì)，所以可供微生物生長繁殖之用。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。培養(yǎng)基制備器解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。上海瓊脂培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基制備器滅菌鍋關(guān)閉放氣閥前，將鍋內(nèi)氣體排干凈。上海瓊脂培養(yǎng)基制備器

在制備培養(yǎng)基時(shí)，通常要考慮以下因素：(1)pH值多數(shù)細(xì)胞系在pH=7.4下生長得很好。盡管各細(xì)胞株之間細(xì)胞生長*pH值變化很小，但一些正常的成纖維細(xì)胞系以pH=7.4～7.7，轉(zhuǎn)化細(xì)胞以pH=7.0～7.4更合適。據(jù)報(bào)道，上皮細(xì)胞以pH=5.5合適。為確定*佳pH值，做一個(gè)簡單的生長實(shí)驗(yàn)或特殊功能分析酚紅常用作指示劑，pH=7.4呈紅色，pH=7.0變橙色，pH=6.5變黃色，而pH=7.6呈紅色中略帶藍(lán)色，pH=7.8呈紫色。由于對(duì)顏色的觀察有很大的主觀性，因而必須用無菌平衡鹽溶液和同樣濃度的酚紅配一套標(biāo)準(zhǔn)樣，放在與制備培養(yǎng)基相同的瓶子中。(2)緩沖能力碳算鹽緩沖系統(tǒng)由于毒性小、成本低、對(duì)培養(yǎng)物有營養(yǎng)作用，因此比其他緩沖系統(tǒng)用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。(3)滲透壓多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)滲透壓有很寬的耐受范圍，一般常用冰點(diǎn)降低或蒸汽壓升高測(cè)定。如果自己配培養(yǎng)基，可通過測(cè)定滲透壓防止稱量和稀釋等造成的誤差。上海瓊脂培養(yǎng)基制備器