培養(yǎng)基是生物制品領(lǐng)域中常用的物質(zhì),在細(xì)菌和細(xì)胞培養(yǎng)中十分必要,但是現(xiàn)有技術(shù)中有些培養(yǎng)基的某種組份容易分解,造成保存時間短等問題,導(dǎo)致培養(yǎng)基的使用成本十分高。其中,在動物培養(yǎng)基中,谷氨酰胺是一種必要的組份,但是在常溫下,很短的時間內(nèi),約7-10日中培養(yǎng)基中的谷氨酰胺成份就可降解90%以上,這給其商品化帶來很大的困難。這樣的培養(yǎng)基在現(xiàn)有技術(shù)中很多,都具有上述的缺陷,例如,中國CN1087778C公開了一種雜交瘤細(xì)胞的無血清培養(yǎng)基,其中包含有谷氨酰胺成份,但是這種培養(yǎng)基的保存時間十分有限,很難達(dá)到商業(yè)使用的目的。培養(yǎng)基制備器殺菌劑可從此口加入,也可用注射器從硅酮膜注入。山東培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的實驗室制備:正確制備培養(yǎng)基時微生物檢驗的較基礎(chǔ)步驟之一。使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應(yīng)遵守良好實驗室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時,應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說明配置。記錄所有相關(guān)數(shù)據(jù),如質(zhì)量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。使用各別成分制備培養(yǎng)基時,應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制,記錄所有細(xì)節(jié)信息,如;培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質(zhì)含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便潮源。北京培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點:無需排干空氣。
簡單制作培養(yǎng)基,需要完成以下幾個主要步驟:需要對其進(jìn)行消毒處理,普通介質(zhì)使用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘。本發(fā)明適用于各種介質(zhì)的制備,如無特殊要求,可用于滅菌。一些熱成分,如碳水化合物,應(yīng)該單獨制備20%或更多的濃縮液,過濾或間斷殺菌,然后通過無菌操作技術(shù)加入到培養(yǎng)液中。在低溫下,明膠培養(yǎng)基也能殺菌。血、體液及素應(yīng)經(jīng)無菌處理后,加至約50℃冷卻培養(yǎng)基中。需要對培養(yǎng)基的質(zhì)量進(jìn)行檢測。每次處理完培養(yǎng)基,都要仔細(xì)檢查,如破損、浸漬、顏色異常、棉塞污染等,要進(jìn)行篩選和棄置,才能確定pH值。培養(yǎng)基培養(yǎng)一晚,若有細(xì)菌生長,培養(yǎng)基將被丟棄。常規(guī)菌株接種1×2管或瓶培養(yǎng)基,24h培養(yǎng),對生長不良或無菌的菌株進(jìn)行培養(yǎng),追蹤其產(chǎn)生原因,并反復(fù)接種。如不發(fā)生變化,應(yīng)丟棄培養(yǎng)基,禁止使用。
培養(yǎng)基制備的基本方法:1.培養(yǎng)基配方的選定:同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外.一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料.加以比較核對。2、培養(yǎng)基的制備記錄,每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)推各稱,配方及其來源.和各種成份的牌號。較終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份。3.培養(yǎng)基成分的稱取。培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂.較好一次完成,不要中斷??蓪⑴浞街糜诎鴤?cè),每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。5、培養(yǎng)塞pH的初步調(diào)整培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正。全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點:力攪拌,確保培養(yǎng)基受熱均勻,營養(yǎng)均一。
培養(yǎng)基的脫氣:必要時,在使用前將養(yǎng)基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時松開容器蓋子;加熱后蓋緊蓋子,并迅速冷卻至使用溫度。3.添加成分的加入:對熱不穩(wěn)定的添加成分應(yīng)在培養(yǎng)基冷卻至47℃~50℃時加入,滅菌的添加成分加入前應(yīng)冷卻至室溫,避免冷的液體會造成瓊脂凝膠或形成片狀物。4.培養(yǎng)基的棄置:所有污染和未使用的培養(yǎng)基的棄置應(yīng)采用安全的方式,并符合相關(guān)法律法規(guī)的規(guī)定。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基較終pH之用。培養(yǎng)基制備器是供微生物、植物、動物組織和細(xì)菌生長和維持生長用的人工配置的養(yǎng)料。安徽培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試
培養(yǎng)基制備器可直接連接標(biāo)準(zhǔn)、通用的蠕動泵和稀釋、充填培養(yǎng)皿系統(tǒng)。山東培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基質(zhì)量測試:(1)澄清度:水是細(xì)胞培養(yǎng)基的溶劑。細(xì)胞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分只有完全溶解于水才能被細(xì)胞吸收攝取,細(xì)胞才能生長增殖,因此細(xì)胞培養(yǎng)基是否溶解以及培養(yǎng)液是否透明澄清直接影響培養(yǎng)基使用。該項目是通過對水溶解后的細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度檢查,判斷細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度。按中國藥典2005年版二部附錄ⅨB進(jìn)行。(2)pH值:哺乳類動物細(xì)胞生長需要合適的酸堿度,pH過高或者過低都會導(dǎo)致細(xì)胞死亡。pH值的測定也可以檢查細(xì)胞培養(yǎng)基的批間差。清大天一標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定取規(guī)定量供試品,用注射用水(水溫20℃-30℃)溶解至1L,加入規(guī)定量碳酸氫鈉到上述溶液中,用與細(xì)胞培養(yǎng)基溶液pH值相近的兩點標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校準(zhǔn)后的酸度計進(jìn)行測定。按中國藥典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行;加入規(guī)定量的碳酸氫鈉到上述溶液中,按中國藥典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行。山東培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器