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藥物藥效評估方案

來源: 發(fā)布時間:2023-08-14

隨著電子產(chǎn)品的大量使用,用眼的時間和強(qiáng)度已遠(yuǎn)超過去,用眼過度引起一系列視力問題。研究表明,高度近視、視網(wǎng)膜疾病、白內(nèi)障、眼干燥關(guān)節(jié)綜合征均與眼細(xì)胞凋亡相關(guān)。斑馬魚的眼部血管結(jié)構(gòu)跟人非常相似,斑馬魚視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)也跟人高度相似。用霉酚酸嗎啉乙酯可以誘發(fā)斑馬魚眼細(xì)胞凋亡,模擬人的眼部疾病。用特異性熒光染色(呈綠色),患有眼疾的斑馬魚眼細(xì)胞凋亡較正常斑馬魚明顯增多,在熒光顯微鏡下可以觀察到。經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實(shí)驗(yàn),眼保護(hù)劑組斑馬魚眼細(xì)胞與正常對照組相似,并未出現(xiàn)模型對照組的大面積細(xì)胞凋亡情況。轉(zhuǎn)基因NBT斑馬魚評價周圍神經(jīng)保護(hù)劑功效。藥物藥效評估方案

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我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和藥物組。其中正常對照組未攝入維拉帕米,模型對照組與藥物組都攝入了等量的維拉帕米(維拉帕米通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。藥物組先攝入地高辛之類的改善心動過緩藥物再攝入維拉帕米。服用改善心動過緩藥物后再加入維拉帕米共同處理至實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)后,我們對斑馬魚統(tǒng)計斑馬魚的心率??梢钥吹?,模型對照組心率明顯減慢,服用藥物組的心率與正常對照組比較相似,沒有明顯的心率減慢。藥物安全評價檢測項(xiàng)目斑馬魚模型實(shí)驗(yàn)評價細(xì)胞凋亡。

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斑馬魚的基因與人類基因的相似度達(dá)到87%,斑馬魚肝臟中有許多與哺乳動物同源的脂質(zhì)代謝酶,與哺乳動物對外源化學(xué)物質(zhì)的防御機(jī)制相當(dāng),包括酶的誘導(dǎo)和氧化應(yīng)激。而且斑馬魚幼魚通體透明,容易觀察到毒性表型。酒精性肝損傷是全世界發(fā)病率和死亡率的主要原因,酒精性肝損傷是過量飲酒的結(jié)果。當(dāng)患者繼續(xù)飲酒時,會誘發(fā)嚴(yán)重的肝損傷形式,如脂肪性肝炎,纖維化,肝硬化和肝細(xì)胞。用乙醇可以誘發(fā)斑馬魚肝臟損傷,模擬人的肝臟疾病。我們評價斑馬魚肝臟毒性有4個指標(biāo):1.肝臟面積;2.肝臟變性程度;3.卵黃囊吸收延遲的發(fā)生率(卵黃囊是脂肪,卵黃囊吸收與肝功能密切相關(guān));4.肝臟病理切片。

腦出血是指非外傷性腦實(shí)質(zhì)內(nèi)部血管破裂引發(fā)的腦內(nèi)出血病癥,占全部腦卒中的20%~30%,急性期病死率為30%~40%。羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMGCR)是他汀類藥物發(fā)揮抑制作用的直接作用點(diǎn),HMGCR功能被抑制會影響血管的完整性和穩(wěn)定性,誘發(fā)腦出血。由于斑馬魚大腦具有典型脊椎動物腦部形態(tài)學(xué)特征,血管與神經(jīng)系統(tǒng)在分子信號通路上與人和哺乳動物的同源性達(dá)到85%以上。在大量攝入辛伐他汀后,斑馬魚腦部也會出現(xiàn)腦出血的情況,患有腦出血的斑馬魚的腦部會出現(xiàn)明顯的片狀出血,而正常斑馬魚沒有;由于腦出血斑馬魚的心搏輸出量和血流速度也會降低,利用血流分析儀可明顯觀察到。腦出血可直接造成反應(yīng)遲鈍、運(yùn)動功能障礙,可通過行為分析軟件觀察斑馬魚的行為軌跡。我們評價斑馬魚腦出血有4個指標(biāo):1.腦出血發(fā)生率;2.心搏輸出量;3.血流速度;4.行為學(xué)(運(yùn)動改善)。藥物毒性試驗(yàn)、毒理毒性檢測評價。

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隨著電子產(chǎn)品的大量使用,用眼的時間和強(qiáng)度已遠(yuǎn)超過去,用眼過度引起一系列視力問題。研究表明,高度近視、視網(wǎng)膜疾病、白內(nèi)障、眼干燥關(guān)節(jié)綜合征均與眼細(xì)胞凋亡相關(guān)。斑馬魚的眼部血管結(jié)構(gòu)跟人非常相似,斑馬魚視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)也跟人高度相似。用霉酚酸嗎啉乙酯可以誘發(fā)斑馬魚眼細(xì)胞凋亡,模擬人的眼部疾病。用特異性熒光染色(呈綠色),患有眼疾的斑馬魚眼細(xì)胞凋亡較正常斑馬魚明顯增多,在熒光顯微鏡下可以觀察到。我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和藥物組。其中正常對照組未攝入霉酚酸嗎啉乙酯,模型對照組與服用眼保護(hù)劑組都攝入了等量的霉酚酸嗎啉乙酯(霉酚酸嗎啉乙酯通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。眼保護(hù)劑組在攝入霉酚酸嗎啉乙酯的同時攝入藍(lán)莓葉黃素酯之類的眼保護(hù)劑。服用一段時間眼保護(hù)劑后,我們對斑馬魚整體做凋亡細(xì)胞特異性染色,觀察細(xì)胞凋亡,同時制作成病理切片觀察眼部的病理結(jié)構(gòu)變化。利用斑馬魚模型評價改善心臟出血功效。藥物的活性評價

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我們將受測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和抗結(jié)腸炎藥物組。其中正常對照組未攝入TNBS,模型對照組與抗結(jié)腸炎藥物組都加入了等量的TNBS(TNBS通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))??菇Y(jié)腸炎藥物組在攝入TNBS的同時攝入潑尼松之類抗結(jié)腸炎藥物。服用一段時間抗結(jié)腸炎藥物組后,我們觀察斑馬魚的腸腔面積變化、杯狀細(xì)胞數(shù)量??梢钥吹?,服用抗結(jié)腸炎藥物的腸腔面積與未加TNBS的正常對照組比較相似,沒有明顯的腸腔面積擴(kuò)大。藥物藥效評估方案

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