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南京光遺傳鈣成像代理

來源: 發(fā)布時間:2022-07-25

可見光激發(fā)Ca2+熒光探針:與紫外光激發(fā)探針相比,可見光激發(fā)Ca2+探針具有更強(qiáng)的染料吸收性能,對Ca2+變化水平檢測敏感度也更高,能夠降低對活細(xì)胞的光毒性和樣品自發(fā)熒光以及光散射的干擾,且無光譜偏移。較常使用的可見光激發(fā)Ca2+熒光探針有Fluo-3,F(xiàn)luo-4,Rhod-2等,同時他們也都是非比率型指示劑。Fluo-3是較常用的可見光激發(fā)Ca2+熒光指示劑之一,是典型的的單波長指示劑,比較大激發(fā)波長為506nm,比較大發(fā)射波長為526nm。它與Ca2+結(jié)合之前幾乎無熒光,結(jié)合后熒光會增加60至100倍,從而避免了細(xì)胞自身的熒光干擾。實際檢測時推薦使用的激發(fā)波長為488nm左右,發(fā)射波長為525~530nm(圖3)。Fluo-3可以用在激光共聚焦顯微成像或流式細(xì)胞儀中。它還有一個升級版本Fluo-4,在相同Ca2+濃度下信號更強(qiáng)。鈣成像系統(tǒng)支持聯(lián)網(wǎng),基于網(wǎng)絡(luò)的軟件可讓您隨時隨地監(jiān)控數(shù)據(jù)。南京光遺傳鈣成像代理

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nVista神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)是可以在自由活動的動物上進(jìn)行大范圍的動態(tài)熒光成像的設(shè)備。通過nVist,您可以視覺化細(xì)胞活動,同步行為學(xué),以及長期追蹤神經(jīng)環(huán)路的活動。nVista被應(yīng)用于全球的研究機(jī)構(gòu)中,產(chǎn)生了影響力的大數(shù)據(jù)庫。主要特征:利用GCamp鈣離子探針進(jìn)行成像·功能完整的數(shù)據(jù)采集軟件,實現(xiàn)對焦,調(diào)焦,行為同步化單細(xì)胞分辨率下,可同時捕獲成百上千神經(jīng)元活動長時間追蹤細(xì)胞,追蹤時間可長達(dá)數(shù)月電子對焦,保證視野范圍的恒定自由動物行為學(xué):可運(yùn)用標(biāo)準(zhǔn)行為學(xué)測量方法,行為操作箱,迷宮,曠場等可進(jìn)行皮層,深部核團(tuán),以及腦干,中腦等區(qū)域的成像記錄動物無需進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練鈣離子成像+自由活動行為學(xué)1.錨定特殊細(xì)胞類型,例如特定的receptor/promotor/geneticmarker2.單細(xì)胞的空間分辨率,可以分析細(xì)胞在空間內(nèi)的mapping和編碼信息3.動物可在大范圍的曠場內(nèi)自由活動4.長時程追蹤同一細(xì)胞的放電規(guī)律變化:用于學(xué)習(xí),記憶,藥物成癮等研究。5.可對腦內(nèi)的深部核團(tuán)進(jìn)行記錄nVista神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)成像效果好。神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)技術(shù)參數(shù)專業(yè)的數(shù)據(jù)采集軟件Inscopix數(shù)據(jù)采集軟件可記錄成百上千個神經(jīng)元細(xì)胞。電子調(diào)焦功能,可通過軟件實現(xiàn)物理調(diào)焦。南京光遺傳鈣成像代理鈣成像系統(tǒng)具有單細(xì)胞分辨率的大視野的特征。

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鈣離子在很多生理性的活動中都發(fā)揮著重要作用,除了在肌肉細(xì)胞收縮中扮演著重要角色,鈣離子也是神經(jīng)元活動的重要“風(fēng)向標(biāo)”之一:當(dāng)神經(jīng)元膜電位發(fā)生去極化,產(chǎn)生的動作電位傳導(dǎo)到神經(jīng)元軸突末梢時,細(xì)胞膜上的電壓門控鈣離子通道打開,大量鈣離子內(nèi)流,包含神經(jīng)遞質(zhì)的囊泡由突觸前膜釋放至后膜,下游神經(jīng)元就得以接受到上游的信號。因此,鈣離子成像可以追蹤神經(jīng)元動作電位,從而幫助我們了解神經(jīng)元集群的活動,可以用于感知覺,學(xué)習(xí)記憶,社會性行為等各種各樣的研究中。

一項由葡萄牙尚帕莫未知中心,牛津大學(xué),哥倫比亞大學(xué),荷蘭鹿特丹伊拉斯謨大學(xué),麻省理工學(xué)院,倫敦大學(xué),德國MaxPlanck生物控制論研究所,德國圖歐賓根大學(xué)多方合作的研究于2020年11月4日在Neuron上發(fā)表了題為TheAnteriorCingulateCortexPredictsFutureStatestoMediateModel-BasedActionSelection的文章,作者通過一個新的兩步謎題任務(wù)了解基于模型的決策使用對行為具體后果的預(yù)測,在小鼠的一系列決策任務(wù)中使用Inscopix顯微鈣成像和光遺傳學(xué)來證明前扣帶皮層(ACC)預(yù)測了行動將導(dǎo)致的狀態(tài),而不僅*是預(yù)測它們是好是壞,并判斷結(jié)果是否與這些預(yù)測相符。研究結(jié)果表明,ACC是基于模型的控制的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn),在預(yù)測所選操作的未來狀態(tài)方面發(fā)揮著特定作用。鈣成像技術(shù)(calcium imaging)是指利用鈣離子指示劑或指示監(jiān)測組織內(nèi)鈣離子濃度的方法。

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不論采用哪一類鈣離子指示劑,總體上成像記錄過程是非常類似的。包含鈣離子指示劑的細(xì)胞可以通過熒光顯微鏡(fluorescencemicroscope)觀測,然后通過CCD攝像機(jī)捕捉、記錄圖像?,F(xiàn)在鈣成像技術(shù)主要在以下幾類神經(jīng)科學(xué)研究方面有廣泛應(yīng)用:1.記錄培養(yǎng)的神經(jīng)元的活動。2.記錄腦片上神經(jīng)元的活動。記錄神經(jīng)元的活動。由于離體實驗本身的限制,現(xiàn)在越來越多的神經(jīng)方面科學(xué)家傾向于做在體鈣成像實驗,希望能得到更準(zhǔn)確且更能反應(yīng)生理狀況的數(shù)據(jù)。得益于雙光子熒光顯微鏡的發(fā)展,現(xiàn)在在實驗動物處于huoti狀態(tài)下的鈣成像技術(shù)取得了飛速進(jìn)展。4.記錄神經(jīng)元樹突和樹突棘(spine)的活動。由于對于實驗精度的要求,有些科學(xué)家不僅只想記錄單個神經(jīng)元的反應(yīng),他們還想更確切地知道神經(jīng)元上哪些樹突和樹突棘參與了某個行為,也就是說他們需要在huoti條件下,對單根樹突以及某些spine進(jìn)行鈣成像記錄實驗。由于雙光子熒光顯微鏡和GCaMP6基因編碼鈣離子指示劑的發(fā)展,現(xiàn)在,對樹突和樹突棘用鈣成像實驗進(jìn)行記錄也成為了可能。細(xì)胞內(nèi)鈣成像技術(shù)是通過向細(xì)胞內(nèi)載入鈣指示劑。神經(jīng)元鈣成像價位

鈣離子也是神經(jīng)元活動的重要“風(fēng)向標(biāo)”之一。南京光遺傳鈣成像代理

多種鈣離子指示劑和鈣成像手段的存在使研究人員能夠根據(jù)具體的實驗需要進(jìn)行選擇。同樣,選擇合適的檢測設(shè)備也是至關(guān)重要的。對于使用CCD/sCMOS相機(jī)的成像系統(tǒng)來說,有兩個要求是很基本的:采集速度:根據(jù)不同的應(yīng)用所需的相機(jī)幀速也不同,對于神經(jīng)細(xì)胞來說,一般要求相機(jī)速度至少在10fps以上,有些高速應(yīng)用場景可能需要幾百甚至上千Hz的幀速。靈敏度:為了盡可能降低光漂白和其他副作用(特別是藍(lán)光激發(fā)時),需要降低激發(fā)光強(qiáng)度。因此相機(jī)要在較寬的發(fā)射光波長范圍上具有高靈敏度,才能檢測到弱光條件下的信號,并適應(yīng)不同的染料的光譜發(fā)射特性。南京光遺傳鈣成像代理

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