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美國在體多光子顯微鏡成像分辨率

來源: 發(fā)布時間:2024-03-20

多光子激光掃描顯微鏡的產(chǎn)業(yè)發(fā)展,世界多光子激光掃描顯微鏡產(chǎn)業(yè)主要分布在德國和日本,德國以徠卡顯微系統(tǒng)和蔡司為基礎,日本以尼康和奧林巴斯為基礎。2020年以來,這些企業(yè)占據(jù)了全球多光子激光掃描顯微鏡市場的64.44%,它們的發(fā)展策略影響著多光子激光掃描顯微鏡市場的走向。目前,世界市場對多光子激光掃描顯微鏡的需求正在增長,中國市場的需求增長更快。未來五年多光子激光掃描顯微鏡市場的發(fā)展在中國將仍有巨大的發(fā)展?jié)摿?。由于其非侵入性和高分辨率的特點,多光子顯微鏡在神經(jīng)科學、ai癥研究、免疫學等領域發(fā)揮了重要作用。美國在體多光子顯微鏡成像分辨率

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神經(jīng)科學重要的研究工具-多光子顯微鏡作為神經(jīng)科學重要的研究工具,近年來發(fā)展快速,品牌也眾多。我們通常都是在一間開著冷氣的房間里的超大防震臺上見過這樣一套設備。臺面上復雜的光路也讓我們在使用中小心翼翼,生怕弄壞了哪里而無從修復。你是否想象過一臺放在書桌邊上就能使用的多光子顯微鏡,一臺跟普通顯微鏡一樣操作簡便的多光子顯微鏡,一臺不用擔心會碰壞的多光子顯微鏡,一臺可以在不同實驗室之間搬來搬去的多光子顯微鏡,一臺可以從任意角度進行觀察掃描的多光子顯微鏡?滔博生物TOP-Bright是一家集研發(fā),生產(chǎn),銷售于一體的專注于神經(jīng)科學產(chǎn)品及致力于向高校、科研機構等領域提供實驗室一體化方案的高科技企業(yè)。業(yè)務服務范圍已遍布至全國各地幾百家實驗室。目前公司主營產(chǎn)品是享譽全球的國際品牌和產(chǎn)品,這些儀器設備都是科學研究所必備且不可替代的基礎儀器美國離體多光子顯微鏡價格多少多光子顯微鏡是一種高分辨率的顯微鏡技術,利用多光子激發(fā)熒光的原理來觀察生物樣品的細胞結構和功能。

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多束掃描技術可以同時對神經(jīng)元組織的不同位置進行成像。該技術:對于兩個遠程成像位置(相距1-2mm以上),通常采用兩個**的路徑進行成像;對于相鄰區(qū)域,通常使用單個物鏡的多個光束進行成像。多光束掃描技術必須特別注意激發(fā)光束之間的串擾,這可以通過事后光源分離或時空復用來解決。事后光源分離法是指分離光束以消除串擾的算法;時空復用法是指同時使用多個激發(fā)光束,每個光束的脈沖在時間上被延遲,使不同光束激發(fā)的單個熒光信號可以暫時分離。引入的光束越多,可以成像的神經(jīng)元越多,但多束會導致熒光衰減時間重疊增加,從而限制了分辨信號源的能力;并且復用對電子設備的工作速度要求很高;大量的光束也需要較高的激光功率來維持單束的信噪比,這樣容易導致組織損傷。

現(xiàn)代分子生物學技術的迅速發(fā)展和科技的進步,特別是隨著后基因組時代的到來,人們已經(jīng)能夠根據(jù)需要建立各種細胞模型,為在體研究基因表達規(guī)律、分子間的相互作用、細胞的增殖、細胞信號轉導、誘導分化、細胞凋亡以及新的血管生成等提供了良好的生物學條件。然而,盡管人們利用現(xiàn)有的分子生物學方法,已經(jīng)對基因表達和蛋白質之間的相互作用進行了深入、細致的研究,但仍然不能實現(xiàn)對蛋白質和基因活動的實時、動態(tài)監(jiān)測。在細胞的生理過程中,基因、尤其是蛋白質的表達、修飾和相萬作用往往發(fā)生可逆的、動態(tài)的變化。目前的分子生物學方法還不能捕獲到蛋白質和基因的這些變化,但獲取這些信息對與研究基因的表達和蛋白質之間的相互作用又至關重要。因此,發(fā)展能用于、動態(tài)、實時、連續(xù)監(jiān)測蛋白質和基因活動的方法是非常有必要的。與傳統(tǒng)的熒光顯微鏡相比,多光子顯微鏡具有更好的深度穿透能力和較低光損傷性,可以觀察更深層的組織結構。

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快速光柵掃描有多種實現(xiàn)方式,使用振鏡進行快速2D掃描,將振鏡和可調電動透鏡結合在一起進行快速3D掃描,但可調電動透鏡由于機械慣性的限制在軸向無法快速進行焦點切換,影響成像速度,現(xiàn)可使用空間光調制器(SLM)代替。遠程聚焦也是一種實現(xiàn)3D成像的手段。在LSU模塊中,掃描振鏡進行橫向掃描,ASU模塊包括物鏡L1和反射鏡M,通過調控M的位置實現(xiàn)軸向掃描。該技術不僅可以校正主物鏡L2引入的光學像差,還可以進行快速的軸向掃描。想要獲得更多神經(jīng)元成像,可以通過調整顯微鏡的物鏡設計來擴大FOV,但是具有大NA和大FOV的物鏡通常重量較大,無法快速移動以進行快速軸向掃描,因此大型FOV系統(tǒng)依賴于遠程聚焦、SLM和可調電動透鏡。光子顯微鏡是一種使用可見光或近紅外光的顯微鏡。激光掃描多光子顯微鏡長時間觀察

融合先進激光技術,多光子顯微鏡實現(xiàn)高速、高清晰度成像。美國在體多光子顯微鏡成像分辨率

    對于雙光子(2P)成像而言,離焦和近表面熒光激發(fā)是兩個比較大的深度限制因素,而對于三光子(3P)成像這兩個問題大大減小,但是三光子成像由于熒光團的吸收截面比2P要小得多,所以需要更高數(shù)量級的脈沖能量才能獲得與2P激發(fā)的相同強度的熒光信號。功能性3P顯微鏡比結構性3P顯微鏡的要求更高,它需要更快速的掃描,以便及時采樣神經(jīng)元活動;需要更高的脈沖能量,以便在每個像素停留時間內(nèi)收集足夠的信號。復雜的行為通常涉及到大型的大腦神經(jīng)網(wǎng)絡,該網(wǎng)絡既具有局部的連接又具有遠程的連接。要想將神經(jīng)元活動與行為聯(lián)系起來,需要同時監(jiān)控非常龐大且分布普遍的神經(jīng)元的活動,大腦中的神經(jīng)網(wǎng)絡會在幾十毫秒內(nèi)處理傳入的刺激,要想了解這種快速的神經(jīng)元動力學,就需要MPM具備對神經(jīng)元進行快速成像的能力??焖費PM方法可分為單束掃描技術和多束掃描技術。 美國在體多光子顯微鏡成像分辨率