麻省理工學院和波士頓大學的研究人員近研究使用一種熒光探針,能夠在大腦細胞處于電活動狀態(tài)時點亮,可以立即對小鼠大腦中多個神經(jīng)元的活動進行成像。麻省理工學院的腦科學和認知科學神經(jīng)技術(shù)教授、兼生物工程學教授EdwardBoyden表示,只需要使用簡單的光學顯微鏡,即可實現(xiàn)這項技術(shù)。神經(jīng)科學家可以將大腦內(nèi)電路的活動進行可視化,并將其與特定行為聯(lián)系起來?!叭绻胙芯恳环N行為或疾病,就需要對神經(jīng)元群體的活動進行成像,讓這些神經(jīng)元群網(wǎng)絡中協(xié)同工作?!盉oyden說。傳統(tǒng)的鈣成像技術(shù)受限于顯微鏡的視野,只能對很小的一片區(qū)域進行記錄。上海神經(jīng)元鈣成像grain lens
對于成像和長時間成像,較重要的是要保證細胞的正常生長。熒光團受激發(fā)光光照后產(chǎn)生的氧化物質(zhì)與蛋白質(zhì)、核酸和脂肪等發(fā)生反應,熒光信號降低的同時(光致退色)也降低了細胞壽命(光線損傷)。在光照過程中氧化劑的產(chǎn)生,主要決定于熒光團的光化學性質(zhì)和光照劑量,因此減少光照劑量成為解決上述問題的途徑之一。光漂白(Photobleaching)指在光的照射下熒光物質(zhì)所激發(fā)出來的熒光強度隨著時間推移逐步減弱乃至消失的現(xiàn)象。熒光成像的質(zhì)量很大程度上依賴于熒光信號強度,提高激發(fā)光強度固然可以提高信號強度,但激發(fā)光的強度不是可以無限提高的,當激發(fā)光的強度超過一定限度時,光吸收就趨于飽和,并不可逆地破壞激發(fā)態(tài)分子,這就是光漂白現(xiàn)象。在顯微技術(shù)中,光漂白使得觀測變得很復雜,因為它會造成破壞,使螢光團無法繼續(xù)放光,從而干擾實驗結(jié)果。合肥動物神經(jīng)元鈣成像哪里有有了鈣成像技術(shù),原本悄無聲息的神經(jīng)活動就變成了一幅斑斕閃爍的壯觀影像。
目前有三種在神經(jīng)元上填充鈣離子指示劑的方法,且都可以用于體內(nèi)和體外研究。第一種方法是利用玻璃吸管將膜滲透性鹽或葡聚糖形式的指示劑注入單個神經(jīng)元中。此方法方便實驗者控制單個神經(jīng)元內(nèi)的鈣離子指示劑濃度且信噪比較高。第二種是利用“批量加載”的方法將鈣離子指示劑染料負載神經(jīng)元,觀察對象為一群神經(jīng)元。盡管此方法可能導致一些膠質(zhì)細胞也被指示劑所標記,但提高了整體神經(jīng)元的標記百分比,使研究者得以觀察到一群神經(jīng)元內(nèi)動作電位相關(guān)性的活動。第三種也較為常用,通過病毒轉(zhuǎn)染的方式使其基因編碼鈣離子指示劑。(A)單細胞注射法;(B)networkloading法;(C)通過病毒轉(zhuǎn)染使其基因編碼鈣離子指示劑(expressionofgeneticallyencodedcalciumindicators,GECI)
nVista神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)是可以在自由活動的動物上進行大范圍的動態(tài)熒光成像的設備。通過nVist,您可以視覺化細胞活動,同步行為學,以及長期追蹤神經(jīng)環(huán)路的活動。nVista被應用于全球的研究機構(gòu)中,產(chǎn)生了影響力的大數(shù)據(jù)庫。主要特征:利用GCamp鈣離子探針進行成像功能完整的數(shù)據(jù)采集軟件,實現(xiàn)對焦,調(diào)焦,行為同步化單細胞分辨率下,可同時捕獲成百上千神經(jīng)元活動長時間追蹤細胞,追蹤時間可長達數(shù)月電子對焦,保證視野范圍的恒定自由動物行為學:可運用標準行為學測量方法,行為操作箱,迷宮,曠場等可進行皮層,深部核團,以及腦干,中腦等區(qū)域的成像記錄動物無需進行適應性訓練鈣離子成像+自由活動行為學1.錨定特殊細胞類型,例如特定的receptor/promotor/geneticmarker2.單細胞的空間分辨率,可以分析細胞在空間內(nèi)的mapping和編碼信息3.動物可在大范圍的曠場內(nèi)自由活動4.長時程追蹤同一細胞的放電規(guī)律變化:用于學習,記憶,藥物成癮等研究。5.可對腦內(nèi)的深部核團進行記錄nVista神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)成像效果好。神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)技術(shù)參數(shù)專業(yè)的數(shù)據(jù)采集軟件Inscopix數(shù)據(jù)采集軟件可記錄成百上千個神經(jīng)元細胞。電子調(diào)焦功能,可通過軟件實現(xiàn)物理調(diào)焦。我們的鈣成像系統(tǒng)集成自動控制和精確計時的多模式輸入端口。
利用鈣成像技術(shù)記錄大腦活動,隨著功能光學成像技術(shù)的發(fā)展,神經(jīng)學家們已經(jīng)可以研究腦區(qū)和神經(jīng)元內(nèi)部的工作情況。功能鈣成像技術(shù)就是其中之一,其主要原理是將外源性熒光信號和生理現(xiàn)象耦合起來——通過熒光染料信號的改變反映細胞內(nèi)游離鈣離子濃度,以此細胞的功能狀態(tài)。目前它被廣泛應用于實時監(jiān)測一群相關(guān)神經(jīng)元內(nèi)鈣離子的變化,從而判斷其功能活動。該技術(shù)的出現(xiàn)使得科學家可以親眼目睹神經(jīng)信號在神經(jīng)網(wǎng)絡之中時間和空間上的傳遞穿梭。鈣成像顯微鏡由軟件控制的電子對焦方式,讓成像更加穩(wěn)定清晰。浙江細胞鈣離子鈣成像哪里買
清醒動物腦功能鈣成像的微型顯微鏡的研究在不斷實踐中。上海神經(jīng)元鈣成像grain lens
鈣成像技術(shù)是一種監(jiān)測組織內(nèi)鈣離子濃度的方法,通過使用鈣離子指示劑,科學家可以觀察神經(jīng)信號在神經(jīng)網(wǎng)絡中的傳遞過程,并了解神經(jīng)元活動與內(nèi)部鈣離子濃度的關(guān)系。在靜息狀態(tài)下,大部分神經(jīng)元的胞內(nèi)鈣離子濃度為50-100nM,而當神經(jīng)元活動的時候,胞內(nèi)鈣離子濃度能上升10-100倍,增加的鈣離子對于含有神經(jīng)遞質(zhì)的突觸囊泡的胞吐釋放過程必不可少。鈣成像是一種生物醫(yī)學技術(shù),主要用于觀察和記錄細胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。鈣離子是細胞內(nèi)重要的信號分子,其濃度的改變可以影響細胞的生理功能和病理狀態(tài)。因此,鈣成像技術(shù)對于研究細胞生物學、神經(jīng)科學、心血管醫(yī)學等領域具有重要意義。上海神經(jīng)元鈣成像grain lens