實驗組和對照組3選用發(fā)酵中期添加琥珀酸,此時,菌體增殖放緩,以產(chǎn)酸為主,琥珀酸對三羧酸循環(huán)有正向促進(jìn)作用,而對乙醛酸循環(huán)途徑起**作用,從而導(dǎo)致谷氨酸產(chǎn)量的增加;梯度試驗發(fā)現(xiàn),琥珀酸添加量過**于10g/l),并不會對谷氨酸產(chǎn)量帶來進(jìn)一步的提升,綜合成本考慮,選擇低于10g/l的添加量較為合適。對照組2和實驗組在發(fā)酵中后期添加殼聚糖,能夠改變細(xì)胞壁的通透性,促進(jìn)谷氨酸分泌到胞外,從而提升谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率;但是殼聚糖添加量(超過100mg/l)過大會導(dǎo)致抑菌現(xiàn)象發(fā)生,進(jìn)而造成菌株死亡。雖然,上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實施方案對本發(fā)明作了詳盡的描述,但在本發(fā)明基礎(chǔ)上,可以對之作一些修改或改進(jìn),或在實施案例之外的樹種實施本方法,這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此,在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改,改進(jìn)或范圍的擴(kuò)大,均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。RPMI1640培養(yǎng)基提高了細(xì)胞的存活率和生長速率。江西基礎(chǔ)培養(yǎng)基價格
附圖說明圖1是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,哥倫比亞型擬南芥無菌苗培養(yǎng)的對比效果圖,a:無菌苗在培養(yǎng)基中生長情況;b:無菌苗蓮座葉及根系發(fā)育;c:萌發(fā)率;d主根長度;a和b中bar=;圖2是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,蘭茲貝格型擬南芥無菌植株培養(yǎng)的對比效果圖,a:無菌植株在培養(yǎng)基中生長情況;b:無菌植株地上部分及根系發(fā)育;c:無菌植株花***發(fā)育(左)和花粉的亞歷山大染色(右);d:主根長度;e:株高;f:蓮座葉長度;g:成熟花粉活力;a中bar=、b中bar=、c中花***bar=、c中花粉bar=15um;圖3是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,油菜無菌苗培養(yǎng)的對比效果圖,a:無菌植株在培養(yǎng)基中生長情況;b:無菌苗地上部分及根系發(fā)育;c:莖高;d:莖中粗;e:主根長;f:大于;a中bar=、b中bar=;圖4是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,馬鈴薯無菌苗培養(yǎng)的對比效果圖,a:無菌植株在培養(yǎng)基中生長情況;b:無菌苗地上部分及根系發(fā)育;c:莖高;d:莖中粗;e:根數(shù);a和b中bar=;圖5是cs和ms兩種培養(yǎng)基上,哥倫比亞型擬南芥葉片及根愈傷**誘導(dǎo)的對比效果圖,a:葉片愈傷**;b:葉片愈傷**誘導(dǎo)率;c:根愈傷**;d:根愈傷**誘導(dǎo)率;a和c中bar=;圖6是cs和ms兩種培養(yǎng)基上。北京Ham's F12培養(yǎng)基供應(yīng)商F12培養(yǎng)基提供了豐富的營養(yǎng)支持。
nh4)2so4264mg、nh4h2po4288mg、mgso4·7h2o370mg、cacl2332mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。將本實施例中的廣適性植物**培養(yǎng)基命名為cs基本培養(yǎng)基。實施例二,本實施例廣適性植物**1/2培養(yǎng)基,其每1000ml培養(yǎng)基中含有:kno31331mg、(nh4)2so4132mg、nh4h2po4144mg、mgso4·7h2o185mg、cacl2166mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。將本實施例中的廣適性植物**1/2培養(yǎng)基命名為1/2cs基本培養(yǎng)基。上述實施例中的cs基本培養(yǎng)基、1/2cs基本培養(yǎng)基與現(xiàn)有ms基本培養(yǎng)基及1/2ms基本培養(yǎng)基的成分對比如表1所示:表1ms、cs、1/2ms、1/2cs基本培養(yǎng)基成分表上述實施例中的cs基本培養(yǎng)基和1/2cs基本培養(yǎng)基,若應(yīng)用于植物**培養(yǎng)中的固體培養(yǎng)基制作,可根據(jù)實際需要添加包含但不限于適量***、蔗糖、葡萄糖、白糖、瓊脂、植物凝膠、卡拉膠、大量元素水溶肥等,添加量同ms培養(yǎng)基一致,調(diào)節(jié)ph至,121℃15min滅菌后搖勻分裝。
發(fā)酵培養(yǎng)基為:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,cecl30-40mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;發(fā)酵工藝同實施例1,100l發(fā)酵罐中含有70l發(fā)酵培養(yǎng)基。設(shè)置cecl3的添加濃度為0,,如圖1-2所示,隨著cecl3添加量的增加,菌體濃度和谷氨酸含量均有所提升,當(dāng)添加量為10mg/l時,菌體濃度和谷氨酸含量達(dá)到峰值,然后出現(xiàn)下降趨勢,但是整個過程中,糖酸轉(zhuǎn)化率沒有明顯改變(附圖未顯示);說明cecl3稀土鹽能夠促進(jìn)菌株增殖,提高谷氨酸相關(guān)合成酶的活力,提高谷氨酸的產(chǎn)量,但是過高的濃度會造成菌株增殖放緩和死亡,谷氨酸產(chǎn)量相應(yīng)下降。二、通過上述實驗確定cecl3添加量為10mg/l,在此基礎(chǔ)上,研究2-羥基乙胺對菌體濃度、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響。設(shè)置2-羥基乙胺的濃度為,5,10,20,40,80,160mg/l,如圖3-4所示,隨著2-羥基乙胺添加量的增加,菌體濃度隨之增加,相應(yīng)地,谷氨酸含量和糖酸轉(zhuǎn)化率也有所提升,當(dāng)添加量為40mg/l時,菌體濃度和谷氨酸含量達(dá)到峰值,繼續(xù)增加2-羥基乙胺的濃度,產(chǎn)生明顯的抑菌效果,菌株密度下降明顯;原因是,低濃度的2-羥基乙胺可能促進(jìn)磷脂酰乙醇胺細(xì)胞壁組分的合成。無血清培養(yǎng)基有助于維持細(xì)胞的純凈生長環(huán)境。
C)大腸埃希菌++--產(chǎn)氣腸桿菌--++志賀菌屬-+--沙門菌屬-+-+表硫化氫和尿素酶試驗對腸桿菌屬的鑒別試驗傷寒沙門菌甲型副傷寒沙門菌變形桿菌志賀菌屬大腸埃希菌克雷伯菌屬硫化氫試驗-/+++++++---尿素酶試驗--+--+乳糖發(fā)酵試驗----++在培養(yǎng)基中加入指示劑或某種化學(xué)物質(zhì)**不需要的**生長,利于需要的**分離,這種培養(yǎng)基稱為選擇性培養(yǎng)基。常用的抑菌劑有膽鹽、煌綠、玫瑰紅鈉、亞硒酸鈉等。常用的指示荊有溴甲酚紫、溴麝香草酚藍(lán)等。美藍(lán)是氧化還原指示劑。例如,在培養(yǎng)基內(nèi)加入青霉素可**革蘭陽性**,而利于革蘭陰性**的生長;如果加入鏈霉素,則可獲得與加青霉素相反的選擇效果;加入制霉素可*****,有利于**的分離。又如亞**鉍瓊脂,既能**革蘭陽性**生長,又能**許多革蘭陰性**生長,但傷寒沙門菌卻能在這個培養(yǎng)基上生長出具有棕色環(huán)的菌落。SS瓊脂是臨床**檢驗中一種常用的選擇性培養(yǎng)基。大腸埃希菌在SS培養(yǎng)基上,因發(fā)酵乳糖而產(chǎn)酸,使指示劑中性紅變深,并使膽鹽沉淀,所以菌落紅色而不透明。沙門菌分解含硫氨基酸而產(chǎn)生硫化氫,硫化氫與枸櫞酸鐵形成硫化鐵,所以菌落中心呈黑色。痢疾志賀菌,既不發(fā)酵乳糖也不產(chǎn)生硫化氧。MEM培養(yǎng)基常用于多種哺乳動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)。北京減血清培養(yǎng)基供應(yīng)商
F12培養(yǎng)基含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì),支持細(xì)胞的生長。江西基礎(chǔ)培養(yǎng)基價格
**早開發(fā)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基(minimalessentialmedium,MEM),其本質(zhì)為含有鹽、氨基酸、維生素和其他必需營養(yǎng)物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎(chǔ)上,DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各種合成細(xì)胞培養(yǎng)基被不斷開發(fā)出來。常用合成培養(yǎng)基的配方此處不詳細(xì)介紹,其特性及應(yīng)用的范圍見表1-2。表1-2常用合成培養(yǎng)基的特性及應(yīng)用的范圍培養(yǎng)基名稱特性及應(yīng)用范圍199細(xì)胞培養(yǎng)基添加適量的血清后,可***用于多種細(xì)胞培養(yǎng),并用于**學(xué)、*苗生產(chǎn)等。MEM細(xì)胞培養(yǎng)基MEM(MinimalEssentialMedium)培養(yǎng)基有含Earle's平衡鹽的類型,也有含Hanks'平衡鹽的類型;有高壓**型的,也有過濾**型的;還有含非必需氨基酸的類型。是**基本、適用范圍**廣的細(xì)胞培養(yǎng)基。DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是由Dulbecco在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良獲得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)兩種類型。細(xì)胞生長快。附著稍差的腫*細(xì)胞、克隆培養(yǎng)用高糖效果較好,常用于雜交*的骨髓*細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)。IMDM細(xì)胞培養(yǎng)基IMDM(Iscove’smodifiedDMEM)是由Iscove在DMEM基礎(chǔ)上改良,增加了幾種氨基酸和胱氨酸量等??捎糜陔s交*細(xì)胞培養(yǎng)。江西基礎(chǔ)培養(yǎng)基價格