為了配制一定pH的緩沖溶液,首先選定一個弱酸,它的pKaφ盡可能接近所需配制的緩沖溶液的pH值,然后計算酸與堿的濃度比,根據(jù)此濃度比便可配制所需緩沖溶液。以上主要以弱酸及其鹽組成的緩沖溶液為例說明它的作用原理、pH計算和配制方法。對于弱堿及其鹽組成的緩沖溶液可采用相同的方法。緩沖溶液在物質(zhì)分離和成分分析等方面應(yīng)用***,如鑒定Mg2+離子時,可用下面的反應(yīng):白色磷酸銨鎂沉淀溶于酸,故反應(yīng)需在堿性溶液中進(jìn)行,但堿性太強(qiáng),可能生成白色Mg(OH)2沉淀,所以反應(yīng)的pH值需控制在一定范圍內(nèi),因此利用NH3.H2O和NH4Cl組成的緩沖溶液,保持溶液的pH值條件下,進(jìn)行上述反應(yīng)。什么是緩沖溶液?請簡述其在生物體中的作用。河南無酚紅緩沖液價格
常用作緩沖溶液的酸類由弱酸及其共軛酸鹽組合成的溶液具有緩沖作用。常見的緩沖體系有:1、弱酸和它的鹽(如HAc---NaAc)2、弱堿和它的鹽(NH3·H2O---NH4Cl)3、多元弱酸的酸式鹽及其對應(yīng)的次級鹽(如NaH2PO4---Na2HPO4)的水溶液組成。而生化實(shí)驗(yàn)室常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羥甲基氨基甲烷)等系統(tǒng),生化實(shí)驗(yàn)或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系,因?yàn)橛袝r影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素并不是緩沖液的pH值,而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖劑都可能產(chǎn)生不需要的化學(xué)反應(yīng)。硼酸鹽:硼酸鹽與許多化合物形成復(fù)鹽、如蔗糖。檸檬酸鹽:檸檬酸鹽離子容易與鈣結(jié)合,所以存在有鈣離子的情況下不能使用。磷酸鹽:在有些實(shí)驗(yàn),它是酶的抑止劑或甚至是一個代謝物,重金屬易以磷酸鹽的形式從溶液中沉淀出來。而且它在。三羥甲基氨基甲烷:它可以和重金屬一起作用,但在有些系統(tǒng)中也起抑制作用。其主要缺點(diǎn)時溫度效應(yīng)。這點(diǎn)往往被忽視,在室溫pH是,4℃時是,37℃時是,因此,4℃配制的緩沖液在37℃進(jìn)行測量時,其氫離子濃度就增加了10倍。在,其緩沖能力極為不理想。 陜西有酚紅緩沖液一般多少錢生化實(shí)驗(yàn)室常常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris(三羥甲基氨基甲烷)等系統(tǒng)。
ph值緩沖液常用三種
pH酸堿度常用的三種標(biāo)準(zhǔn)溶液:pH分別為4.0、7.0和10.0。標(biāo)準(zhǔn)緩沖液(應(yīng)選擇與供試液pH值接近的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液),目前標(biāo)準(zhǔn)溶液有7種,在我國一般使用以下3種溶液:(pH值在25℃時)。1.鄰苯二甲酸氫鉀(KHC8H4O4)pH4.003;0.05M。2.混合磷酸鹽(Na2HPO4):磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉混合鹽溶液pH6.864;0.025M3.硼砂(Na2B4O7·l0H2O)pH9.182;0.01M。三種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的配置方法:1.pH4,鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液:精密稱取在115±5℃干燥2~3小時的鄰苯二甲酸氫鉀[KHC8H4O4]10.12g,加水使溶解并稀釋至1000ml。2.pH7,磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液(pH7.4):精密稱取在115±5℃干燥2~3小時的無水磷酸氫二鈉4.303g與磷酸二氫鉀1.179g,加水使溶解并稀釋至1000ml。3.pH9,硼砂標(biāo)準(zhǔn)緩沖液:精密稱取硼砂[Na2B4O7·10H2O]3.80g(注意:避免風(fēng)化),加水使溶解并稀釋至1000ml,置聚乙烯塑料瓶中,密塞,避免與空氣中二氧化碳接觸。
生物緩沖液pH計校正及使用方法
生物緩沖液在實(shí)驗(yàn)分析中經(jīng)常被用到,它的作用是穩(wěn)定溶液的pH值。然而,很多人在實(shí)驗(yàn)中會遇到無法調(diào)節(jié)緩沖液pH值的情況,這是為什么呢?如何解決這個問題呢?下面我將詳細(xì)介紹。首先,從目前使用的pH計來看,國產(chǎn)的pH計或酸度計,校正緩沖液時需要注意以下兩種情況:
1、購買市場上配置好的標(biāo)準(zhǔn)溶液,在聚乙烯瓶中密封儲存。如果在室溫條件下保存1-2個月后,若出現(xiàn)渾濁、沉淀或發(fā)霉等情況,就不能繼續(xù)使用了。已經(jīng)使用過的校正緩沖液也不能再倒回去使用。2、購買緩沖劑并自己配置。大部分廠家生產(chǎn)的緩沖劑都是干燥型的pH緩沖劑,使用時需要將其溶解在之前煮沸15-30分鐘的去離子水中,然后倒入250ml容量瓶中,稀釋至刻度,充分搖勻即可。 緩沖液(Buffer solution)通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對所組成的溶液。
1:50~l:800)后,按行進(jìn)行包被、洗滌。按列分別加入用稀釋液1:100稀釋的強(qiáng)陽性、弱陽性、陰性參考血清及稀釋液(作空白對照),保溫,洗滌。加工作濃度酶標(biāo)抗體,洗滌,加底物顯色,加酸終止反應(yīng)后讀取A值。選擇強(qiáng)陽性參考血清A值;為0.8左右,陰性參考血清A值<0.1的包被抗原稀釋度為工作濃度。?方陣(棋盤)法選擇包被抗體和酶標(biāo)抗體的工作濃度將抗體用包被液稀釋為10mg/L、lmg/L、/L三個濃度按行包被,每一個濃度包被三行(每行3孔),分別在每個濃度包被的***、二、三行中分別加入強(qiáng)陽性抗原,弱陽性抗原和陰性對照,將酶標(biāo)抗抗體用稀釋液稀釋為1:l000、l:5000、l:10000三個濃度,分別加入每個濃度包被的***、二、三列中。加底物顯色,加酸終止反應(yīng),分別讀取A值。以強(qiáng)陽性抗原液A值在,陰性參考A值<**適條件。據(jù)此選擇包被抗體和酶標(biāo)抗體的**佳工作濃度。?二、ELISA**適工作濃度的選擇及標(biāo)準(zhǔn)化操作1**適工作濃度的選擇?1.1間接法測抗體?????酶標(biāo)抗體工作濃度的選擇:①用IgG進(jìn)行包被,洗滌。②將酶標(biāo)IgG用稀釋液作一系列稀釋后分別加入已包被的孔中,保溫、洗滌。③加酸終止反應(yīng)后,讀取吸光度(A)。讀取A值在1.0時的酶標(biāo)抗體稀釋度,作為酶標(biāo)抗體的工作濃度。在生化研究工作中,常常要用到緩沖溶液來維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度.陜西有酚紅緩沖液一般多少錢
為了避免PBS緩沖液對人體的負(fù)面影響,建議使用時遵循正確的使用方法和容器規(guī)格,避免長時間或過量使用。河南無酚紅緩沖液價格
ph值測定常用的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液有哪幾種
ph值測定常用的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液草酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液酒石酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液苯二甲酸氫鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液硼酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液氫氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液在一定程度上能抵抗外加少量酸、堿或稀釋,而保持溶液pH值基本不變的作用稱為緩沖作用。具有緩沖作用的溶液稱為緩沖溶液。緩沖溶液性質(zhì)a.抗酸/堿,抗稀釋作用因?yàn)榫彌_溶液中具有抗酸成分和抗堿成分,所以加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,其pH值基本上是不變的。稀釋緩沖溶液時,酸和堿的濃度比值不改變,適當(dāng)稀釋不影響其pH值。b.緩沖容量緩沖容量是衡量緩沖溶液緩沖能力大小的尺度。緩沖容量的大小與緩沖組分濃度和緩沖組分的比值有關(guān)。緩沖組分濃度越大,緩沖容量越大;緩沖組分比值為1時,緩沖容量比較大。 河南無酚紅緩沖液價格