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生化實(shí)驗(yàn)中加入緩沖液的目的和作用生物緩沖液是一種能夠保持pH值不受酸堿度影響的溶液,多種細(xì)胞只能在很小的PH范圍內(nèi)活動(dòng),需要有緩沖體系來維持整個(gè)過程不受干擾。尤其是在生化實(shí)驗(yàn)中,生物緩沖液極其受重視,因?yàn)閷?shí)驗(yàn)中的各類物質(zhì)非常容易使PH發(fā)生變化,而這就直接影響到整體工作進(jìn)程。例如在酶活性實(shí)驗(yàn)中,有時(shí)因?yàn)镻H的變化大,會使酶活性下降甚至失活,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行下去,所以在生化實(shí)驗(yàn)中加入緩沖液的主要目的就是維持PH的穩(wěn)定。緩沖溶液在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中有著重要的意義。安徽DPBS緩沖液生產(chǎn)企業(yè)
2.配制方法:將Tris-HCl平衡苯酚與等體積的氯仿/異戊醇(24:1)混合均勻后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。10%(W/V)SDS組份濃度:10%(W/V)SDS配制量:100ml配制方法:1.稱量10g高純度的SDS置于100-200ml燒杯中,加入約80ml的去離子水,68℃加入溶解2.滴加濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3.將溶液定容至100ml后,室溫保存。2NNaOH組份濃度:2NNaOH配制量:100ml配制方法:1.量取80ml去離子水置于100~200ml塑料燒杯中(NaOH溶解過程中大量放熱,有可能使玻璃燒杯炸裂)。2.稱取8gNaOH小心地逐漸加入到燒杯中,邊加邊攪拌。3.待NaOH完全溶解后,用去離子水將溶液體積定容至100ml。4.將溶液轉(zhuǎn)移至塑料容器中后,室溫保存。NHCl組份濃度:NHCl配制量:100ml配制方法:1.在ml的去離子水中加入ml的濃鹽酸(N),均勻混合。2.室溫保存。5MNaCl組份濃度:5MNaCl配制量:1L配制方法:1.稱取gNaCl置于1L燒杯中,加入約800ml的去離子水后攪拌溶解。2.加去離子水將溶液定容至1L后,適量分成小份。3.高溫高壓**后,4℃保存。20%(W/V)Glucose組份濃度:20%(W/V)Glucose配制量:100ml配制方法:1.稱取20gGlucose置于100~200ml燒杯中,加入約80ml的去離子水后,攪拌溶解。2.加去離子水將溶液定容至100ml。北京緩沖液進(jìn)貨價(jià)常用作緩沖溶液的酸類由弱酸及其共軛酸鹽組合成的溶液具有緩沖作用。
Buffer組份濃度:137mMNaCl,mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量:1L配制方法:1.稱量下列試劑,置于1L燒杯中。2.向燒杯中加入約800ml的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?.滴加濃鹽酸將pH值調(diào)節(jié)至,然后加入去離子水將溶液定容至1L。4.高溫高壓**后,室溫保存。注意:上述Buffer中無二價(jià)陽離子,如需要,可在配方中補(bǔ)充1mMCaCl2和mMMgCl2。10M醋酸銨組份濃度:10M醋酸銨配制量:100ml配制方法:1.稱量g醋酸銨置于100~200ml燒杯中,加入約30ml的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?.加去離子水將溶液定容至100ml。3.使用mm濾膜過濾**。4.密封瓶口于室溫保存。注意:醋酸銨受熱易分解,所以不能高溫高壓**。Tris-HCl平衡苯酚配制方法:1.使用原料:大多數(shù)市售液化苯酚是清亮無色的,無需重蒸餾便可用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。但有些液化苯酚呈粉紅色或黃色,應(yīng)避免使用。同時(shí)也應(yīng)避免使用結(jié)晶苯酚,結(jié)晶苯酚必須在160℃對其進(jìn)行重蒸餾除去諸如醌等氧化產(chǎn)物,這些氧化產(chǎn)物可引起磷酸二酯鍵的斷裂或?qū)е翿NA和DNA的交聯(lián)等。因此,苯酚的質(zhì)量對DNA、RNA的提取極為重要,我們推薦使用高質(zhì)量的苯酚進(jìn)行分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。2.操作注意:苯酚腐蝕性極強(qiáng),并可引起嚴(yán)重灼傷,操作時(shí)應(yīng)戴手套及防護(hù)鏡等。
ph值緩沖液常用三種
pH酸堿度常用的三種標(biāo)準(zhǔn)溶液:pH分別為4.0、7.0和10.0。標(biāo)準(zhǔn)緩沖液(應(yīng)選擇與供試液pH值接近的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液),目前標(biāo)準(zhǔn)溶液有7種,在我國一般使用以下3種溶液:(pH值在25℃時(shí))。1.鄰苯二甲酸氫鉀(KHC8H4O4)pH4.003;0.05M。2.混合磷酸鹽(Na2HPO4):磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉混合鹽溶液pH6.864;0.025M3.硼砂(Na2B4O7·l0H2O)pH9.182;0.01M。三種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的配置方法:1.pH4,鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液:精密稱取在115±5℃干燥2~3小時(shí)的鄰苯二甲酸氫鉀[KHC8H4O4]10.12g,加水使溶解并稀釋至1000ml。2.pH7,磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液(pH7.4):精密稱取在115±5℃干燥2~3小時(shí)的無水磷酸氫二鈉4.303g與磷酸二氫鉀1.179g,加水使溶解并稀釋至1000ml。3.pH9,硼砂標(biāo)準(zhǔn)緩沖液:精密稱取硼砂[Na2B4O7·10H2O]3.80g(注意:避免風(fēng)化),加水使溶解并稀釋至1000ml,置聚乙烯塑料瓶中,密塞,避免與空氣中二氧化碳接觸。 緩沖液能夠提供酶所需的適pH值,這對于酶的活性至關(guān)重要。
PBS溶液又稱磷酸鹽緩沖溶液,一般選擇Na2HPO4和KH2PO4配制,因?yàn)殁c鹽溶解的較慢。根據(jù)不同pH的溶液,稱量不同質(zhì)量的磷酸鹽,也可以用pH計(jì)調(diào)溶液的pH。PBS一般用作支持電解質(zhì)。
配置方法播報(bào)編輯采用去離子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液,按以下步驟進(jìn)行:(1) 配制1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4;(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;(3) 將18.2%(體積分?jǐn)?shù))KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合; 為什么緩沖溶液可以維持PH值的穩(wěn)定呢?北京緩沖液進(jìn)貨價(jià)
緩沖溶液的作用是在有限的范圍內(nèi)調(diào)整溶液的pH值,使待測溶液的酸度符合分析方法所規(guī)定的范圍。安徽DPBS緩沖液生產(chǎn)企業(yè)
pH緩沖液的使用方法和配制保存
pH緩沖液是確保pH測量值精確的重要因素。標(biāo)準(zhǔn)緩沖液用于校準(zhǔn)pH傳感器和檢查其性能。pH緩沖液的緩沖能力是其重要的屬性。即使將外部物質(zhì)加入緩沖液中,這一屬性仍可使pH緩沖液保持恒定的pH值。pH緩沖液使用方法:首先取少量校正液潤洗小量杯,然后加入適量校正液(液面高度沒過電極的感應(yīng)探頭即可)。按照電子pH測試筆使用說明書進(jìn)行校正。由于校正液是高精密的液體,是電子ph測試筆精確度的保障,因此用過的校正液不能再倒回瓶中,以免影響校正液精度,帶入細(xì)菌等,造成校正液無法繼續(xù)使用。 安徽DPBS緩沖液生產(chǎn)企業(yè)