先用少許**過的PBS調(diào)成糊狀，然后補足到100ml。置室溫攪拌4小時或冰箱內(nèi)過夜，過濾**，分裝，4℃保存?zhèn)溆?。?或是hanks或是D-hanks液配制（1.稱取胰蛋白酶粉末置燒杯中，先用少許D-Hanks平衡鹽溶液（左右）調(diào)成糊狀，然后再補足D-Hanks平衡鹽溶液，攪拌混勻，置室溫4小時或冰箱過夜，并不斷攪拌振蕩；2.次日，先用濾紙粗濾，再進行過濾**，分裝入瓶中，低溫冰箱保存?zhèn)溆?，常用濃度為或。胰蛋白酶溶液偏酸，使用前可調(diào)用碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至左右。）一般**，至于作用效果，需要消化一次細胞感覺一下，因為不同廠家的酶不一樣，有的作用溫和，有的作用劇烈。4、是否需要四度放置過夜，取決于你的胰酶的純度。過去的胰酶純度不高，所以難以溶解，需要四度過夜.而現(xiàn)在的胰酶純度都很高，就沒有必要四度過夜。從理論上來說，四度放置過夜，給**生長的機會，盡管過濾可以出去**，可是出不掉其代謝產(chǎn)物。胰蛋白酶不溶,有絮狀物的原因，考慮有：1、過期或是酶已經(jīng)部分變性2、溶液ph值不對3、在沒過濾之前的絮狀沉淀是正?，F(xiàn)象，因胰酶多取自動物胰腺，沉淀為**塊。實際消化后細胞狀態(tài)不會有太大差異，注意控制消化時間即可。江蘇EDTA胰酶報價

胰蛋白酶是一種肽鏈內(nèi)切酶，屬于絲氨酸蛋白酶家族，不僅可以水解堿性氨基酸（精氨酸或賴氨酸）羧基端的肽鍵，還可以水解由堿性氨基酸的羧基形成的酰胺鍵或酯鍵。胰蛋白酶可以從牛、豬等哺乳動物的胰臟提取，經(jīng)過純化后獲得結(jié)晶，再制成凍干制劑。牛的胰蛋白酶有223個氨基酸，分子量為23800道爾頓，活性部位的絲氨酸殘基是不可缺少的絲氨酸蛋白酶。胰蛋白酶溶于水，不溶于乙醇、甘油和三氯甲烷等有機溶劑。胰蛋白酶的等電點pH值為10.1，**適pH值范圍在7.8~8.5左右，pH值大于9.0時不可逆失活。鈣離子對胰蛋白酶的酶活具有保護和***作用。[1]江蘇EDTA胰酶報價EDTA是一種化學(xué)螯合劑，主要作用在于能螯合Ca、Mg離子，使細胞分離。

胰酶中的酚紅有哪些作用？酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為pH指示劑，中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。研究表明：酚紅可以模擬固醇類***（特別是雌***）的作用。為避免固醇類反應(yīng)，培養(yǎng)細胞尤其是哺乳類細胞時，建議用不含酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測，在做流式細胞檢測時，也會使用不含酚紅的培養(yǎng)基或者胰酶。圖 2. Phenol red test圖片來源網(wǎng)絡(luò)8、在做細胞凋亡檢測時，細胞為什么不能用含有EDTA的胰酶消化？Annexin V（膜聯(lián)蛋白）是Ca2+依賴的蛋白，EDTA會螯合Ca2+從而影響Annexin V，進而影響結(jié)果，因此需選用不含EDTA的胰酶。建議放入培養(yǎng)箱中進行消化，時間可以長一點。隨時觀察細胞情況，避免消化過度；也可使用細胞刮刀將細胞刮下，后用***吹勻，比消化簡單，還可避免使用胰酶帶來的傷害。

    產(chǎn)品簡介產(chǎn)品簡介：產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱產(chǎn)品包裝產(chǎn)品價格C0201胰酶細胞消化液100ml碧云天生產(chǎn)的胰酶細胞消化液(Trypsin-EDTASolution)含。該消化液經(jīng)過過濾**，可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化，或者一些**的消化。本胰酶細胞消化液具有方便快速的特點，通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細胞。包裝清單：產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱包裝C0201胰酶細胞消化液100ml―說明書1份保存條件：4℃保存，一年有效。注意事項：在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被**污染。胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。為了您的安全和**，請穿實驗服并戴一次性手套操作。使用說明使用說明：1.貼壁細胞的消化：a)吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。b)加入少量胰酶細胞消化液，略蓋過細胞即可，室溫放置30秒至2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同。c)顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用***吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。d)如果發(fā)現(xiàn)消化不足。胰蛋白酶水解或胰蛋白酶化是蛋白質(zhì)被胰蛋白酶消化或處理的過程，因此被稱為胰蛋白酶化。

胰蛋白酶（Trypsin）簡稱胰酶，是一種絲氨酸水解酶，能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基端切斷。在組織細胞的提取、培養(yǎng)，以及體外細胞培養(yǎng)過程中，均會使用到胰蛋白酶消化液，用于水解細胞間蛋白質(zhì)，使組織或細胞離散成單個細胞。胰酶在37℃pH8.0條件下消化能力**強。常用胰酶工作濃度為0.25%。EDTA可以螯合鈣鎂離子，胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速細胞間連接蛋白的水解，起到增強消化的效果。酚紅是一種pH指示劑，溶液偏堿性時呈紫紅色，偏酸性時呈橘紅色，近中性時呈粉紅色。本產(chǎn)品為0.25%胰蛋白酶消化液，含0.25%胰蛋白酶，溶于Hank’s緩沖液，不含EDTA，無酚紅指示劑，經(jīng)0.22μm過濾除菌。胰蛋白酶可以用于原代細胞的傳代過程中分散組織。中國臺灣進口胰酶一般多少錢

胰蛋白酶溶液用于組織和單層細胞的解離。江蘇EDTA胰酶報價

1、細胞培養(yǎng)過程中為什么要使用胰酶呢？胰酶的作用是什么？胰酶是一種蛋白酶，酶切位點是肽鏈的Lys或Arg兩個殘基的羧基端肽鏈，通過在特定位置上降解蛋白，使細胞膜上與培養(yǎng)皿壁結(jié)合處蛋白降解，從而使兩者分離。這時，細胞由于自身內(nèi)部細胞骨架的張力以及培養(yǎng)液表面張力可成為球形。圖1.胰酶酶切位點2、使用胎牛血清培養(yǎng)細胞，在使用胰酶消化時發(fā)現(xiàn)血清可以終止此過程，這是什么原因？血清終止的原理其實是競爭抑制，就是用過量的牛血清中含有的蛋白和胰酶結(jié)合，使胰酶失去消化細胞蛋白的機會。3、為什么使用了胰蛋白酶消化，細胞還是成團的，這可能是什么原因?qū)е碌?？①消化時間不夠②吹打力度不夠③胰酶消化液濃度不夠④細胞密度過高之后才消化傳代⑤胰酶存儲不當(dāng)，或者使用了過期胰酶江蘇EDTA胰酶報價