細(xì)胞培養(yǎng)常用水和平衡鹽溶液的配制方法:水是細(xì)胞賴以生存的主要環(huán)境,營養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物都必須溶解在水中,才能為細(xì)胞吸收和排泄。而且,水溶液對(duì)維持細(xì)胞形態(tài)、進(jìn)行生物化學(xué)反應(yīng)、溫度傳導(dǎo)、調(diào)節(jié)滲透壓和酸堿度的平衡都有著重要作用。體外培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)水的質(zhì)量很敏感,要求很高。水的純度不夠,即使混雜有一些含量極微的有害元素,有時(shí)也會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生不利的影響,甚至引起細(xì)胞中毒死亡。因此,配制培養(yǎng)液的水必須經(jīng)過純化。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室需要純凈的水,常可分為離子交換水和蒸餾水兩種。前者由于仍然帶有非離子物質(zhì)和有機(jī)物,在組織培養(yǎng)中很少使用。組織培養(yǎng)必須使用玻璃蒸餾器制備的三次蒸餾水;二次蒸餾水或外購的金屬蒸餾器制的蒸餾水只能用于清洗器皿,蒸餾水的儲(chǔ)存對(duì)保持水的質(zhì)量有很大影響;周圍環(huán)境和空氣能使水污染或改變其pH,所以儲(chǔ)存水的容器要盡量減少啟開的次數(shù),避免和外界過多接觸,存放時(shí)間不宜太長,一般不要超過兩周,**好現(xiàn)制現(xiàn)用。二、平衡鹽溶液(balancedsaltsolution,BSS),主要由無機(jī)鹽和葡萄糖組成。BSS中的無機(jī)離子不僅是細(xì)胞生命所需成分,而且在維持滲透壓、緩沖和調(diào)節(jié)溶液的酸堿度方面,起著重要作用。 HBSS 通常用作細(xì)胞培養(yǎng)基中的緩沖系統(tǒng),有助于維持較佳的生理 pH 值。江蘇EBSS平衡鹽溶液供應(yīng)商家
PBS緩沖液的保存方法:加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙猓缓蠹尤霛恹}酸調(diào)pH至,**后定容到1L。高溫高壓滅菌后置于4攝氏度冰箱保存待用。PBS緩沖液一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用,具體試劑一般也有不同的比例配方,在針對(duì)性上就有了更好的效果。1xPBS緩沖液就是。2xPBS就是2倍濃度,使用時(shí)稀釋一倍使用。。PBS緩沖液的作用:不僅偽要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,對(duì)完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在**適條件下參與生物反應(yīng),所以使用PBS是***個(gè)選擇。PBS也不是都能用的,有的生物活性物質(zhì)需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持**佳的條件保證生物活性物質(zhì)保持其**完整的特性。廣東HBSS平衡鹽溶液技術(shù)指導(dǎo)平衡鹽溶液可以在溫度、氣體組成變化時(shí)緩沖,且pH 值范圍很廣,以此保證正常的pH和滲透壓。
平衡鹽溶液是溶液中電解質(zhì)含量與血漿內(nèi)含量相仿的鹽溶液稱為平衡鹽溶液。等滲鹽水含Na+和Cl-為154mmol/L,而血液內(nèi)Na+和Cl-含量分別為142mmol/L和103mmol/L,兩者相比,等滲鹽水的Cl-含量比血液的Cl-含量高50mmol/L,在重度缺水或休克狀態(tài)下,腎臟血液減少,會(huì)影響正常的排氯功能,從靜脈內(nèi)輸給大量等滲鹽水,有導(dǎo)致血Cl-過高,引起高氯性酸中毒的危險(xiǎn)。因此,用等滲鹽水***缺水有不足之處,而使用平衡鹽溶液可避免輸入過多的Cl-,***缺水更符合生理,且能有助于糾正酸中毒。常用的平衡鹽溶液有乳酸鈉和復(fù)方氯化鈉溶液(1/6M乳酸鈉溶液1/3加復(fù)方氯化鈉溶液2/3);與碳酸氫鈉和等滲鹽水溶液(1.25%碳酸氫鈉溶液1/3和等滲鹽水2/3)兩種。[1]中文名平衡鹽溶液
PBS緩沖液是實(shí)驗(yàn)室中常用的緩沖液之一,不管是免疫組化實(shí)驗(yàn)還是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),都經(jīng)常會(huì)用到PBS緩沖液。以下是我整理的一些PBS緩沖液的配置方法。PBS緩沖液的配制:方法一:含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡稱為PBS-T)配制方法為:1.稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),氯化鈉(NaCl),氯化鉀(KCl),吐溫-20,加水;2.PBS:PhosphateBufferedSaline;3.PBS1L配方pH7.4:磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g;4.磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g;5.氯化鈉(NaCl):8g;6.氯化鉀(KCl)0.2g;7.加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙?,然后加入濃鹽酸調(diào)pH至7.4,***定容到1L;平衡鹽溶液可滿足體外實(shí)驗(yàn)中組織、細(xì)胞的生存和代謝的基本需要。
平衡鹽溶液是一種用于實(shí)驗(yàn)室和生物技術(shù)領(lǐng)域的溶液,用于維持細(xì)胞和組織的滲透壓和離子平衡。以下是一些常用的平衡鹽溶液配方:1.PBS(磷酸鹽緩沖液):PBS是常用的細(xì)胞培養(yǎng)和洗滌細(xì)胞的緩沖液。它的配方如下:-NaCl:8.0g/L-KCl:0.2g/L-Na2HPO4:1.44g/L-KH2PO4:0.24g/L-調(diào)節(jié)pH至7.42.D-PBS(無鈣鎂磷酸鹽緩沖液):D-PBS與PBS相似,但不含有鈣鎂離子,適用于細(xì)胞洗滌和蛋白實(shí)驗(yàn)。-NaCl:8.0g/L-KCl:0.2g/L-Na2HPO4:1.44g/L-KH2PO4:0.24g/L-調(diào)節(jié)pH至7.43.HEPES緩沖液:HEPES是一種弱酸,用于維持細(xì)胞培養(yǎng)的pH穩(wěn)定。-NaCl:8.0g/L-KCl:0.2g/L-MgCl2:0.2g/L-CaCl2:0.2g/L-HEPES:1.2g/L-調(diào)節(jié)pH至7.44.TBS(Tris緩沖鹽水):TBS是一種常用的緩沖液,用于蛋白質(zhì)電泳和免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。-Trisbase:12.1g/L-Glycine:2.38g/L-NaCl:8.8g/L-調(diào)節(jié)pH至8.05.DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium):DMEM是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)液,含有較高濃度的葡萄糖和氨基酸。-DMEM粉末:100g/L-NaHCO3:1.5g/L-調(diào)節(jié)pH至7.4這些平衡鹽溶液的配方可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行調(diào)整,如添加***、血清等。使用時(shí),請(qǐng)確保按照配方準(zhǔn)確配制,并注意無菌操作。DPBS也用于生物應(yīng)用,水基緩沖液,包括氯化鈉和磷酸鹽緩沖液。陜西平衡鹽溶液牌子
HBSS 的碳酸氫鈉水平較低,用于在沒有 CO2 的情況下培養(yǎng)。江蘇EBSS平衡鹽溶液供應(yīng)商家
PB和PBS緩沖液的主要區(qū)別在于成分和應(yīng)用領(lǐng)域。??12?PB(磷酸鹽緩沖液)?是由磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉按一定比例混合而成的緩沖液,主要用于維持化學(xué)反應(yīng)、合成反應(yīng)等化學(xué)領(lǐng)域的pH環(huán)境。它是**普通的緩沖溶液,用于維持一定的pH環(huán)境。?PBS(磷酸鹽緩沖生理鹽水)?則是在PB的基礎(chǔ)上加入了氯化鈉(NaCl),形成了磷酸鹽緩沖生理鹽水。PBS不僅具有良好的緩沖作用,還具有很好的鹽平衡能力,可以調(diào)節(jié)滲透壓,維持穩(wěn)定的pH和滲透壓,提供必要的營養(yǎng)環(huán)境。PBS廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)研究中,作為溶劑使用,保護(hù)試劑的活性。簡而言之,PB側(cè)重于化學(xué)領(lǐng)域的pH維持,而PBS則在生物化學(xué)研究中提供了更接近生理?xiàng)l件的緩沖和滲透壓調(diào)節(jié),適用于細(xì)胞培養(yǎng)、分子克隆等生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。江蘇EBSS平衡鹽溶液供應(yīng)商家