2.配制方法:將Tris-HCl平衡苯酚與等體積的氯仿/異戊醇(24:1)混合均勻后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。10%(W/V)SDS組份濃度:10%(W/V)SDS配制量:100ml配制方法:1.稱量10g高純度的SDS置于100-200ml燒杯中,加入約80ml的去離子水,68℃加入溶解2.滴加濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3.將溶液定容至100ml后,室溫保存。2NNaOH組份濃度:2NNaOH配制量:100ml配制方法:1.量取80ml去離子水置于100~200ml塑料燒杯中(NaOH溶解過程中大量放熱,有可能使玻璃燒杯炸裂)。2.稱取8gNaOH小心地逐漸加入到燒杯中,邊加邊攪拌。3.待NaOH完全溶解后,用去離子水將溶液體積定容至100ml。4.將溶液轉(zhuǎn)移至塑料容器中后,室溫保存。NHCl組份濃度:NHCl配制量:100ml配制方法:1.在ml的去離子水中加入ml的濃鹽酸(N),均勻混合。2.室溫保存。5MNaCl組份濃度:5MNaCl配制量:1L配制方法:1.稱取gNaCl置于1L燒杯中,加入約800ml的去離子水后攪拌溶解。2.加去離子水將溶液定容至1L后,適量分成小份。3.高溫高壓**后,4℃保存。20%(W/V)Glucose組份濃度:20%(W/V)Glucose配制量:100ml配制方法:1.稱取20gGlucose置于100~200ml燒杯中,加入約80ml的去離子水后,攪拌溶解。2.加去離子水將溶液定容至100ml。PBS緩沖液是一種常用的緩沖劑,用于調(diào)節(jié)pH值和保持溶液的穩(wěn)定性。黑龍江有酚紅緩沖液一般多少錢
制備PBS緩沖液的方法制備PBS緩沖液非常簡單,以下是制備1升10×PBS緩沖液的方法:13.將800ml的去離子水加入大容量燒杯中。14.將8g的氯化鈉(NaCl)和0.2g的磷酸二氫鉀(KH2PO4)加入燒杯中,用玻璃棒攪拌均勻。15.用去離子水將溶液補足至1升,繼續(xù)攪拌至完全溶解。16.用蓋子或保鮮膜覆蓋燒杯,將燒杯放入冰箱中冷藏保存。注:若需要使用1×PBS緩沖液,只需取10×PBS緩沖液適量稀釋即可。
制備PBS緩沖液的方法制備PBS緩沖液非常簡單,以下是制備1升10×PBS緩沖液的方法:13.將800ml的去離子水加入大容量燒杯中。14.將8g的氯化鈉(NaCl)和0.2g的磷酸二氫鉀(KH2PO4)加入燒杯中,用玻璃棒攪拌均勻。15.用去離子水將溶液補足至1升,繼續(xù)攪拌至完全溶解。16.用蓋子或保鮮膜覆蓋燒杯,將燒杯放入冰箱中冷藏保存。注:若需要使用1×PBS緩沖液,只需取10×PBS緩沖液適量稀釋即可。 江西PBS緩沖液包括在生化研究工作中,常常要用到緩沖溶液來維持實驗體系的酸堿度.
在生化研究工作中,常常需要使用緩沖溶液來維持實驗體系的酸堿度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到研究工作的成效。如果“提取酶”實驗體系的pH值變動或大幅度變動,酶活性就會下降甚至完全喪失。所以配制緩沖溶液是一個不可或缺的關(guān)鍵步驟。緩沖溶液是無機化學(xué)及分析化學(xué)中的重要概念,緩沖溶液是指具有能夠維持PH相對穩(wěn)定性能的溶液。pH值在一定的范圍內(nèi)不因稀釋或外加少量的酸或堿而發(fā)生***的變化,緩沖溶液依據(jù)共軛酸堿對及其物質(zhì)的量不同而具有不同的pH值和緩沖容量。
pbs緩沖液的配制配方是10X的PBS母液,然后再對其母液進行1:10稀釋即可獲得PBS緩沖液。PBS是磷酸鹽緩沖液(PhosphateBufferSaline),是生物學(xué)實驗室**常用的緩沖液之一。其主要成分包括:氯化鈉(NaCl)、氯化鉀(KCl)、磷酸氫二鈉(Na2HPO4)和磷酸二氫鉀(KH2PO4)。配制步驟:清洗干凈所需燒杯、轉(zhuǎn)子和量筒,向一個燒杯裝少量去離子水(約100ml)并放入一個轉(zhuǎn)子后放在稱量天平旁備用;向另一個燒杯裝約800ml去離子水并在微波爐或者水浴鍋(65°以上均可)中加熱。注意:由于實驗室所購買的Na2HPO4常常帶有二水、七水或者十二水,與之對應(yīng)的重量分別為1.78g、2.68g、3.58g。向燒杯中加入預(yù)熱的去離子水,燒杯放置在磁力攪拌器上攪拌溶解。用量筒定容到1L,保存?zhèn)溆谩H?00ml10X的PBS母液,加入900ml去離子水即可獲得pH=7.4的PBS緩沖液(無需用pH計校準(zhǔn)PH值)。緩沖液的濃度會影響其緩沖能力。
為了配制一定pH的緩沖溶液,首先選定一個弱酸,它的pKaφ盡可能接近所需配制的緩沖溶液的pH值,然后計算酸與堿的濃度比,根據(jù)此濃度比便可配制所需緩沖溶液。以上主要以弱酸及其鹽組成的緩沖溶液為例說明它的作用原理、pH計算和配制方法。對于弱堿及其鹽組成的緩沖溶液可采用相同的方法。緩沖溶液在物質(zhì)分離和成分分析等方面應(yīng)用***,如鑒定Mg2+離子時,可用下面的反應(yīng):白色磷酸銨鎂沉淀溶于酸,故反應(yīng)需在堿性溶液中進行,但堿性太強,可能生成白色Mg(OH)2沉淀,所以反應(yīng)的pH值需控制在一定范圍內(nèi),因此利用NH3.H2O和NH4Cl組成的緩沖溶液,保持溶液的pH值條件下,進行上述反應(yīng)。常用作緩沖溶液的酸類由弱酸及其共軛酸鹽組合成的溶液具有緩沖作用。貴州緩沖液包括什么
試述緩沖溶液在實驗中的作用?黑龍江有酚紅緩沖液一般多少錢
所有操作均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進行,與苯酚接觸過的皮膚部位應(yīng)用大量水清洗,并用肥皂和水洗滌,忌用乙醇。3.苯酚平衡:因為在酸性pH條件下DNA分配于有機相,因此使用苯酚前必須對苯酚進行平衡使其pH值達到,苯酚平衡操作方法如下:①液化苯酚應(yīng)貯存于-20℃,此時的苯酚呈結(jié)晶狀態(tài)。從冰柜中取出的苯酚首先在室溫下放置使其達到室溫,然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。②加入羥基喹啉(8-Quinolinol)至終濃度。該化合物是一種還原劑、RNA酶的不完全抑制劑及金屬離子的弱螯合劑,同時因其呈黃色,有助于方便識別有機相。③加入等體積的1MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。④重復(fù)操作步驟③。⑤加入等體積的MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。⑥重復(fù)操作步驟⑤,稍微殘留部分上層水相。⑦使用pH試紙確認(rèn)有機相的pH值大于。⑧將苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)配制方法:1.說明:從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時常常使用苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)。氯仿可使蛋白質(zhì)變性并有助于液相與有機相的分離,而異戊醇則有助于消除抽提過程中出現(xiàn)的氣泡。黑龍江有酚紅緩沖液一般多少錢