只要知道緩沖對(duì)的PH值,和要配制的緩沖液的pH值(及要求的緩沖液總濃度),就能按公式計(jì)算[鹽]和[酸]的量。這個(gè)算法涉及對(duì)數(shù)換算,較麻煩,前人為減少后人的計(jì)算麻煩,已為我們總結(jié)出pH值與緩沖液對(duì)離子用量的關(guān)系并列出了表格。只要我們知道要配制的緩沖液的pH,經(jīng)查表便可計(jì)算出所用緩沖劑的比例和用量。例如配制100nm pH5.8濃度為0.1M磷酸緩沖液。經(jīng)查表知pH5.8濃度為0.2M Na2HPO48.0毫升(1M=1 mol/L),而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推論出配制100ml 0.1M的磷酸緩沖液需要0.1M Na2HPO48.0毫升,而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。計(jì)算好后,按計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確稱好固態(tài)化學(xué)成分,放于燒杯中,加少量蒸餾水溶解,轉(zhuǎn)移入100ml容量瓶,加蒸餾水至刻度,搖勻,就能得到所需的緩沖液。各種緩沖溶液的配制,均按表格按比例混合,某些試劑,必須標(biāo)定配成準(zhǔn)確濃度才能進(jìn)行,如醋酸、氫氧化鈉等。另外,所有緩沖溶劑的配制計(jì)量都能從以上的算式準(zhǔn)確獲得。 [2]緩沖溶液在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中有著重要的意義。四川PBS緩沖液答疑解惑
如何計(jì)算緩沖溶液的有效PH范圍電離平衡常數(shù)的負(fù)對(duì)數(shù)加減1之間。即pK±1之間。例如以醋酸/醋酸鹽為共軛酸堿對(duì)的緩沖溶液的有效緩沖范圍是:PKa±1=±1之間。即。緩沖溶液是無(wú)機(jī)化學(xué)及分析化學(xué)中的重要概念,緩沖溶液是指具有能夠維持PH相對(duì)穩(wěn)定性能的溶液。pH值在一定的范圍內(nèi)不因稀釋或外加少量的酸或堿而發(fā)生***的變化,緩沖溶液依據(jù)共軛酸堿對(duì)及其物質(zhì)的量不同而具有不同的pH值和緩沖容量。擴(kuò)展資料:緩沖液的pH值與該酸的電離平衡常數(shù)Ka及鹽和酸的濃度有關(guān)。弱酸的pKa值衡定,但酸和鹽的比例不同時(shí),就會(huì)得到不同的pH值。酸和鹽濃度相等時(shí),溶液的pH值與PKa值相同。酸和鹽濃度等比例增減時(shí),溶液的pH值不變。酸和鹽濃度相等時(shí),緩沖液的緩沖效率為比較高,比例相差越大,緩沖效率越低,緩沖液的一般有效緩沖范圍為pH=pKa±1,pOH=pKb±1。在絡(luò)合滴定和分光光度法等許多反應(yīng)里都要求溶液的pH值保持在一個(gè)范圍內(nèi),以保證指示劑的變色和顯色劑的顯色等,這些條件都是通過加入一定量的緩沖溶液達(dá)到的,所以緩沖溶液是分析測(cè)試中經(jīng)常需要的一種試劑。采用電位滴定法測(cè)定外加酸或堿對(duì)不同配比同一種緩沖溶液的滴定曲線。 中國(guó)臺(tái)灣EBSS緩沖液進(jìn)貨價(jià)緩沖溶液的作用是在有限的范圍內(nèi)調(diào)整溶液的pH值,使待測(cè)溶液的酸度符合分析方法所規(guī)定的范圍。
當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿時(shí),有阻礙溶液pH變化的作用,稱為緩沖作用,這樣的溶液叫做緩沖溶液。弱酸及其鹽的混合溶液(如HAc與NaAc),弱堿及其鹽的混合溶液(如NH3.H2O與NH4Cl)等都是緩沖溶液。由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對(duì)酸的緩沖作用,是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。當(dāng)向這種溶液中加入一定量的強(qiáng)酸時(shí),H離子基本上被A-離子消耗:所以溶液的pH值幾乎不變;當(dāng)加入一定量強(qiáng)堿時(shí),溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。
緩沖液認(rèn)識(shí)作用(二)同時(shí),我們?nèi)梭w的正常生理環(huán)境的維持離不開緩沖溶液,認(rèn)識(shí)學(xué)習(xí)緩沖溶液有利于我們深入認(rèn)識(shí)人體復(fù)雜化學(xué)反應(yīng)的機(jī)制。緩沖溶液對(duì)維持著人體正常的血液p H范圍。其中碳酸-碳酸氫鈉是血漿中**主要的緩沖對(duì),此對(duì)緩沖機(jī)制與肺的呼吸功能及腎的排泄和重吸收功能密切相關(guān)。正常人體代謝產(chǎn)生的二氧化碳進(jìn)入血液后與水結(jié)合成碳酸,碳酸與血漿中的碳酸氫根離子—組成共軛酸堿對(duì),所以緩沖溶液在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中有著重要的意義。 [4]PBS緩沖液的pH值為7.2-7.4,與人體血液等滲,可以維持實(shí)驗(yàn)體系的pH值穩(wěn)定。
2.配制方法:將Tris-HCl平衡苯酚與等體積的氯仿/異戊醇(24:1)混合均勻后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。10%(W/V)SDS組份濃度:10%(W/V)SDS配制量:100ml配制方法:1.稱量10g高純度的SDS置于100-200ml燒杯中,加入約80ml的去離子水,68℃加入溶解2.滴加濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3.將溶液定容至100ml后,室溫保存。2NNaOH組份濃度:2NNaOH配制量:100ml配制方法:1.量取80ml去離子水置于100~200ml塑料燒杯中(NaOH溶解過程中大量放熱,有可能使玻璃燒杯炸裂)。2.稱取8gNaOH小心地逐漸加入到燒杯中,邊加邊攪拌。3.待NaOH完全溶解后,用去離子水將溶液體積定容至100ml。4.將溶液轉(zhuǎn)移至塑料容器中后,室溫保存。NHCl組份濃度:NHCl配制量:100ml配制方法:1.在ml的去離子水中加入ml的濃鹽酸(N),均勻混合。2.室溫保存。5MNaCl組份濃度:5MNaCl配制量:1L配制方法:1.稱取gNaCl置于1L燒杯中,加入約800ml的去離子水后攪拌溶解。2.加去離子水將溶液定容至1L后,適量分成小份。3.高溫高壓**后,4℃保存。20%(W/V)Glucose組份濃度:20%(W/V)Glucose配制量:100ml配制方法:1.稱取20gGlucose置于100~200ml燒杯中,加入約80ml的去離子水后,攪拌溶解。2.加去離子水將溶液定容至100ml。PBS緩沖液是一種常用的生物學(xué)緩沖液。中國(guó)澳門EBSS緩沖液供應(yīng)商
為什么緩沖溶液可以維持PH值的穩(wěn)定呢?四川PBS緩沖液答疑解惑
做ELISA確定抗原**佳包被濃度,做方陣滴定具體怎么做呢?選擇好一份已知為陽(yáng)性和陰性背景的標(biāo)本,將你的抗原用1*CBPH=*PBPH=(8個(gè)條件)后加入96孔板每孔100ul。(一般包被濃度100ng抗原或抗體/孔,**優(yōu)包被條件需進(jìn)行試驗(yàn)選擇)4度過夜取出后甩干,加入20%NBS封閉每孔200ul。37度2h熱封,甩去后拍干即可。將你HRP或AP標(biāo)記的抗原或二抗用酶標(biāo)稀釋液進(jìn)行稀釋(倍比稀釋4個(gè)梯度)即可。棋盤滴定就是板酶交叉,同時(shí)帶上陽(yáng)性、陰性通過試驗(yàn)確定**佳P/N的包被搭配E的試驗(yàn)2.抗原和抗體**佳工作濃度的確定?抗原抗體反應(yīng)要求在**適比例條件下進(jìn)行,ELISA反應(yīng)試劑多,其工作濃度不同對(duì)結(jié)果影響較大,因此必須對(duì)包被抗原(抗體)和酶標(biāo)抗體(抗原)進(jìn)行**佳工作濃度的滴定和選擇,以達(dá)到**佳的測(cè)定條件。?1)方陣(棋盤)滴定法選擇包被抗原的工作濃度用包被液將抗原作一系列稀釋。四川PBS緩沖液答疑解惑