一、為什么緩沖溶液可以維持PH值的穩(wěn)定呢?其實(shí)這主要是因?yàn)榫彌_溶液自身的成分和性能,它的成分里包含了酸、鹽或堿,所以在一定程度上可以抵消外界加入酸性或堿性溶液帶來的影響。二、配制緩沖溶液作用有哪些?1、緩沖溶液是分析檢測實(shí)驗(yàn)中常會用到的溶液,實(shí)驗(yàn)中通常會要求溶液的pH值需要保持在一個規(guī)定的范圍內(nèi),以保證指示劑的顯色或變色,這些通過加入一定量的緩沖溶液就能達(dá)到目的。2、緩沖溶液在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中也起著很重要的作用,主要是因?yàn)榫彌_溶液可以保持機(jī)體正常血液PH范圍,其中碳酸-碳酸氫鈉是血液中主要的緩沖對,這與肺呼吸以及腎功能排泄息息相關(guān)。而機(jī)體正常新陳代謝后產(chǎn)生的CO2,會進(jìn)入血液與水結(jié)合成碳酸,碳酸又與血漿中的碳酸氫根離子組成共軛酸堿對,所以緩沖溶液在醫(yī)學(xué)上就有不可忽視的作用。在生化研究工作中,常常需要使用緩沖溶液來維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度。吉林無酚紅緩沖液技術(shù)指導(dǎo)
pbs緩沖液的配制配方是10X的PBS母液,然后再對其母液進(jìn)行1:10稀釋即可獲得PBS緩沖液。PBS是磷酸鹽緩沖液(PhosphateBufferSaline),是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室**常用的緩沖液之一。其主要成分包括:氯化鈉(NaCl)、氯化鉀(KCl)、磷酸氫二鈉(Na2HPO4)和磷酸二氫鉀(KH2PO4)。配制步驟:清洗干凈所需燒杯、轉(zhuǎn)子和量筒,向一個燒杯裝少量去離子水(約100ml)并放入一個轉(zhuǎn)子后放在稱量天平旁備用;向另一個燒杯裝約800ml去離子水并在微波爐或者水浴鍋(65°以上均可)中加熱。注意:由于實(shí)驗(yàn)室所購買的Na2HPO4常常帶有二水、七水或者十二水,與之對應(yīng)的重量分別為1.78g、2.68g、3.58g。向燒杯中加入預(yù)熱的去離子水,燒杯放置在磁力攪拌器上攪拌溶解。用量筒定容到1L,保存?zhèn)溆?。?00ml10X的PBS母液,加入900ml去離子水即可獲得pH=7.4的PBS緩沖液(無需用pH計(jì)校準(zhǔn)PH值)。遼寧EBSS緩沖液牌子酸和鹽濃度等比例增減時(shí),溶液的pH值不變。
在生化研究工作中,常常需要使用緩沖溶液來維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到研究工作的成效。如果“提取酶”實(shí)驗(yàn)體系的pH值變動或大幅度變動,酶活性就會下降甚至完全喪失。所以配制緩沖溶液是一個不可或缺的關(guān)鍵步驟。緩沖溶液是無機(jī)化學(xué)及分析化學(xué)中的重要概念,緩沖溶液是指具有能夠維持PH相對穩(wěn)定性能的溶液。pH值在一定的范圍內(nèi)不因稀釋或外加少量的酸或堿而發(fā)生***的變化,緩沖溶液依據(jù)共軛酸堿對及其物質(zhì)的量不同而具有不同的pH值和緩沖容量。
pH標(biāo)準(zhǔn)液如何正確使用及其主要作用
pH標(biāo)準(zhǔn)液是一種能使pH值保持穩(wěn)定的溶液。如果向這種溶液中加入少量的酸或堿,或者在溶液中的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生少量的酸或堿,以及將溶液適當(dāng)稀釋,這個溶液的pH值基本上穩(wěn)定不變,這種能對抗少量酸堿或大或稀釋,而使pH值不變化的溶液就稱為緩沖溶液。 pH標(biāo)準(zhǔn)液的如何正確使用: 1、復(fù)合電極不用時(shí),可充分浸泡溶液中。切忌用洗滌液或其他吸水性試劑1/4浸洗。 2、使用前,檢查玻璃電極前端的球泡。正常情況下,電極應(yīng)該透明而無裂紋;球PH計(jì)標(biāo)準(zhǔn)液配制泡內(nèi)要充滿溶液,不能有氣泡存在。 3、測量濃度較大的溶液時(shí),盡量縮短測量時(shí)間,用后仔細(xì)清洗,防止被測液粘附在電極上而污染電極。 4、清洗電極后,不要用濾紙擦拭玻璃膜,而應(yīng)用濾紙吸干,避免損壞玻璃薄膜、防止交叉污染,影響測量精度。 5.測量中注意電極的銀一氯化銀內(nèi)參比電極應(yīng)浸入到球泡內(nèi)氯化物緩沖溶液中,避免電計(jì)顯示部分出現(xiàn)數(shù)字亂跳現(xiàn)象。使用時(shí),注意將電極輕輕甩幾下。 緩沖液濃度和溫度的影響。
所有操作均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,與苯酚接觸過的皮膚部位應(yīng)用大量水清洗,并用肥皂和水洗滌,忌用乙醇。3.苯酚平衡:因?yàn)樵谒嵝詐H條件下DNA分配于有機(jī)相,因此使用苯酚前必須對苯酚進(jìn)行平衡使其pH值達(dá)到,苯酚平衡操作方法如下:①液化苯酚應(yīng)貯存于-20℃,此時(shí)的苯酚呈結(jié)晶狀態(tài)。從冰柜中取出的苯酚首先在室溫下放置使其達(dá)到室溫,然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。②加入羥基喹啉(8-Quinolinol)至終濃度。該化合物是一種還原劑、RNA酶的不完全抑制劑及金屬離子的弱螯合劑,同時(shí)因其呈黃色,有助于方便識別有機(jī)相。③加入等體積的1MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。④重復(fù)操作步驟③。⑤加入等體積的MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。⑥重復(fù)操作步驟⑤,稍微殘留部分上層水相。⑦使用pH試紙確認(rèn)有機(jī)相的pH值大于。⑧將苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)配制方法:1.說明:從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時(shí)常常使用苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)。氯仿可使蛋白質(zhì)變性并有助于液相與有機(jī)相的分離,而異戊醇則有助于消除抽提過程中出現(xiàn)的氣泡。常用作緩沖溶液的酸類由弱酸及其共軛酸鹽組合成的溶液具有緩沖作用。廣西DPBS緩沖液價(jià)格對比
什么是緩沖溶液?請簡述其在生物體中的作用。吉林無酚紅緩沖液技術(shù)指導(dǎo)
pH緩沖液的配制及其保存:1.pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)保存在干燥的地方,如混合磷酸鹽pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在空氣濕度較大時(shí)就會發(fā)生潮解,一旦出現(xiàn)潮解,pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)即不可使用。2.配制pH標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)使用二次蒸餾水或者是去離子水。如果是用于0.1級pH計(jì)測量,則可以用普通蒸餾水。3.配制pH標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)使用較小的燒杯來稀釋,以減少沾在燒杯壁上的pH標(biāo)準(zhǔn)液。存放pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的塑料袋或其它容器,除了應(yīng)倒干凈以外,還應(yīng)用蒸餾水多次沖洗,然后將其倒入配制的pH標(biāo)準(zhǔn)溶液中,以保證配制的pH標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確無誤。4.配制好的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液一般可保存2—3個月,如發(fā)現(xiàn)有渾濁、發(fā)霉或沉淀等現(xiàn)象時(shí),不能繼續(xù)使用。5.堿性標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)裝在聚yi烯瓶中密閉保存。防止二氧化碳進(jìn)入標(biāo)準(zhǔn)溶液后形成碳酸,降低其pH值。吉林無酚紅緩沖液技術(shù)指導(dǎo)