K+主要分布在細(xì)胞內(nèi)液，細(xì)胞內(nèi)K+對(duì)于***某些酶是必需的，并在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+在細(xì)胞外液中的作用是將**內(nèi)部細(xì)胞之間相互粘著，在細(xì)胞內(nèi)參與許多重要的細(xì)胞生理活動(dòng)，如傳導(dǎo)、參與肌肉細(xì)胞收縮等。在懸浮培養(yǎng)時(shí)，為了減少細(xì)胞的聚集和附著，要減少Ca2+的濃度。Mg2+是構(gòu)成細(xì)胞間質(zhì)的重要成分，對(duì)于細(xì)胞間相互穩(wěn)定結(jié)合有很重要的意義。磷的化合物對(duì)細(xì)胞物質(zhì)代謝和生理功能調(diào)控有重要作用。其他成分：肽、核苷、嘌呤等。可幫助細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)及維持某些特殊細(xì)胞系的生長(zhǎng)。分類低血清細(xì)胞培養(yǎng)基概述營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基是維持細(xì)胞活性及高密度生長(zhǎng)的基礎(chǔ)，營(yíng)養(yǎng)缺乏容易引起細(xì)胞凋亡，新生牛血清中所含大部分營(yíng)養(yǎng)成分可以通過化學(xué)成分明確的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如氨基酸維生素等成分組合取代。低血清培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分大優(yōu)于基礎(chǔ)培養(yǎng)基，*需添加1％～5％新生牛血清，而對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、形態(tài)、活性和功能沒有影響甚至有所改善。在國(guó)外低血清培養(yǎng)基早已有之，如Gibco等。但是他們的低血清培養(yǎng)基是在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中選擇性的加入重組胰島素（recombinantinsulin）、人源轉(zhuǎn)鐵蛋白（human(holo)tran-sferrin）以及牛血清白蛋白等，有些還包含一些生長(zhǎng)因子。無酚紅培養(yǎng)基在敏感細(xì)胞系的培養(yǎng)中表現(xiàn)優(yōu)越。江西培養(yǎng)基供應(yīng)商

    cs液體培養(yǎng)基和1/2cs液體培養(yǎng)基在用不同ph超純水(ph為)配制時(shí)的ph都較為穩(wěn)定，在未調(diào)ph的情況下，可直接用于多種植物培養(yǎng)。如圖8所示。(2)以克新18號(hào)馬鈴薯無菌苗為例，觀察在未調(diào)ph和將ph調(diào)至：a、培養(yǎng)基制作方法：隨機(jī)選取超純水，測(cè)得其ph為，用于配制8種不同的液體培養(yǎng)基。第一種：1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基，其為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于ph為；第二種：1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基，其為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于ph為；第三種：ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基，其為取ms基本培養(yǎng)基置于ph為；第四種：cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基，其為取cs基本培養(yǎng)基置于ph為；第五種：1/，其為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于ph為，調(diào)ph至；第六種：1/，其為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于ph為，調(diào)ph至；第七種：，其為取ms基本培養(yǎng)基置于ph為，調(diào)ph至；第八種：，其為取cs基本培養(yǎng)基置于ph為，調(diào)ph至。b、培養(yǎng)方法：從培養(yǎng)實(shí)例4所述培養(yǎng)基獲得長(zhǎng)勢(shì)**的馬鈴薯幼苗，在清水中緩苗2-3d后選取長(zhǎng)勢(shì)一致的馬鈴薯幼苗，如圖9-a所示，置于上述8種不同液體培養(yǎng)基8d，每隔2d更新1次液體培養(yǎng)基；于溫度22-23℃、濕度50-70％、光照強(qiáng)度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照時(shí)間14h、黑暗時(shí)間10h)條件下培養(yǎng)。甘肅減血清培養(yǎng)基答疑解惑減血清培養(yǎng)基提高了實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性。

    培養(yǎng)實(shí)例2和對(duì)比培養(yǎng)例2的培養(yǎng)結(jié)果比較：蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基和1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100％；在相同條件下培養(yǎng)28d時(shí)，與1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基相比，1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基中的幼苗長(zhǎng)勢(shì)更佳，在平均株高、蓮座葉大小、根長(zhǎng)、花朵數(shù)量等方面均優(yōu)于1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基；并且，采用上述培養(yǎng)方法，不論是1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基還是1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基，均能獲得形態(tài)完整的花粉，且花粉活力高達(dá)％，其特點(diǎn)在于選擇了蘭茲貝格型擬南芥作為培養(yǎng)對(duì)象，且選擇了高度適中的培養(yǎng)盒進(jìn)行培養(yǎng)，克服了傳統(tǒng)培養(yǎng)方法無法獲得擬南芥整個(gè)生育期無菌苗的缺點(diǎn)，所獲無菌花***可直接用于花*離體培養(yǎng)等研究?jī)?nèi)容。如圖2所示。培養(yǎng)實(shí)例3：油菜無菌苗培養(yǎng)與培養(yǎng)實(shí)例1不同的地方在于：步驟(1)所用種子為中雙11號(hào)油菜種子，其余完全同培養(yǎng)實(shí)例1。1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：中雙11號(hào)油菜種子在1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％，培養(yǎng)9d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯、平均株高為，葉色濃綠，莖稈粗壯、平均莖中粗為，根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為(>)、平均主根長(zhǎng)為。如圖3所示。對(duì)比培養(yǎng)例3：將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基，其余完全同培養(yǎng)實(shí)例3，1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。

    愈傷**誘導(dǎo)率為100％。如圖6所示。對(duì)比培養(yǎng)例6：將cs基本培養(yǎng)基替換為ms基本培養(yǎng)基，其余完全同培養(yǎng)實(shí)例6，ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基的誘導(dǎo)結(jié)果為：本氏***葉片愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，培養(yǎng)15-18d的葉片略微增厚，在葉片四周產(chǎn)生較少的淡綠色愈傷**，愈傷**誘導(dǎo)率為90％，在愈傷**團(tuán)塊上產(chǎn)生的嫩綠色不定芽數(shù)量較少；本氏***根愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，培養(yǎng)9-11d在切口處產(chǎn)生大量淡黃色致密的愈傷**，愈傷**誘導(dǎo)率為100％。如圖6所示。培養(yǎng)實(shí)例6和對(duì)比培養(yǎng)例6的誘導(dǎo)結(jié)果比較：用上述方法進(jìn)行本氏***葉片愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基愈傷**誘導(dǎo)率為100％，而ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基的誘導(dǎo)率*為90％，在所述相同培養(yǎng)條件下，與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基相比，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基可更快誘導(dǎo)出大量致密的葉片愈傷**、產(chǎn)生更多的不定芽；用上述方法進(jìn)行本氏***根愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)出的根愈傷**形態(tài)相近，兩種培養(yǎng)基的根愈傷**誘導(dǎo)率均為100％。如圖6所示。培養(yǎng)實(shí)例7：水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)(1)水稻種子消毒及篩選：a、選種：以秈稻縉恢10號(hào)為例，將水稻種子晾曬干燥后于4℃下長(zhǎng)期保存，挑選籽粒飽滿、大小基本一致的水稻種子，用剪刀從種子中部剪開，去除谷殼。無酚紅培養(yǎng)基確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

    文獻(xiàn)2“混合硝酸稀土對(duì)谷氨酸產(chǎn)生菌的影響，氨基酸雜志”發(fā)現(xiàn)，在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的稀土元素，能夠提高谷氨酸的產(chǎn)量。申請(qǐng)人之前的**技術(shù)“一種谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基制備方法”，在常規(guī)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn)，通過添加菌體蛋白浸膏來替代酵母膏氮源，不但節(jié)約了成本，還能提高氨基酸發(fā)酵產(chǎn)率，一舉兩得。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：在已有發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，申請(qǐng)人針對(duì)微生物發(fā)酵的特點(diǎn)，繼續(xù)進(jìn)行了改進(jìn)，以提高發(fā)酵效率，據(jù)此，提出了一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基，其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b；所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加，然后間隔12h以上添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。進(jìn)一步地，所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖，酵母浸膏，k2hpo4，mgso4·7h2o，2-羥基乙胺，cecl3，mnso4·h2o，feso4·7h2o，vb1，生物素；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph，**，制得發(fā)酵培養(yǎng)基a。進(jìn)一步地，所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為：取各原料：琥珀酸，尿素，殼聚糖；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph，**，制得發(fā)酵培養(yǎng)基b。推薦地，所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖50-100g/l，酵母浸膏10-30g/l，k2hpo41-5g/l。無酚紅培養(yǎng)基避免了酚紅對(duì)細(xì)胞的潛在毒性作用。廣西DMEM高糖培養(yǎng)基答疑解惑

無酚紅培養(yǎng)基在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中減少了潛在的毒性作用。江西培養(yǎng)基供應(yīng)商

    所描述的實(shí)施例**是本申請(qǐng)一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒旧暾?qǐng)中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都應(yīng)當(dāng)屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實(shí)施例1一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基，其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b；所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加，然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖80g/l，酵母浸膏20g/l，k2hpo42g/l，mgso4·7h2o50mg/l，2-羥基乙胺40mg/l，cecl310mg/l，mnso4·h2o3mg/l，feso4·7h2o3mg/l，vb110mg/l，生物素7μg/l；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基a；所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為：取各原料：琥珀酸5g/l，尿素2g/l，殼聚糖80mg/l；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基b；采用常規(guī)發(fā)酵工藝：將黃色短桿菌gdk-9按8％接種量將種子液（od600nm為）接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)24h，然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b，繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h，收集發(fā)酵液；整個(gè)發(fā)酵培養(yǎng)過程中，控制發(fā)酵溫度35℃，通風(fēng)比1∶，攪拌轉(zhuǎn)速300r/min，溶氧維持在20％。江西培養(yǎng)基供應(yīng)商