PBS液 可配成含0.85%NaCl,pH 7.2的PBS(簡稱pH 7.2 PBS)。 1. PBS儲(chǔ)藏液(10×)配法 NaCl 8.5g KCl 0.2g Na2HP04·12H20 2.85g(或Na2HP04·2H20 1.13g) KH2P04 0.27g 溶于100ml雙蒸水中。 2. PBS應(yīng)用液配法取儲(chǔ)藏液 50ml加雙蒸水450m1即成,經(jīng)103kPa(121.3℃) 15分鐘滅菌,置室溫或4℃保存?zhèn)溆谩?除上述三種常用的平衡鹽溶液外,尚有其他幾種次常用的平衡鹽溶液,如低鈣鎂的Dul-becc。液和無鈣鎂的D-Hanks液(或CMF-Hanks)等??捎糜谂渲葡汉拖礈旒?xì)胞(可防止抑制酶活性和致細(xì)胞凝結(jié)等)。其成分見表1-5,配制辦法可參照上述幾種平衡鹽溶液的辦法舉行。平衡鹽溶液PBS緩沖液常用于組織塊的漂洗、細(xì)胞的洗滌、細(xì)胞或組織的運(yùn)輸。中國澳門有酚紅平衡鹽溶液價(jià)格信息
平衡鹽溶液(BSS)是從Ringer生理鹽水發(fā)展起來的,主要由無機(jī)鹽和葡萄糖組成。BSS中的無機(jī)離子是細(xì)胞生命的必要成分,在維持滲透壓、緩沖作用和調(diào)節(jié)溶液pH方面也起著重要作用。另外,Ca2+、Mg2+能為酶系統(tǒng)的活化提供條件,也是細(xì)胞膜的重要組成成分。葡萄糖等為細(xì)胞代謝提供能量。作為核酸分子的合成也需要S,P等作為基質(zhì)。BSS內(nèi)還含有少量的酚磺酞(酚紅),作為pH變化的指示劑,溶液變酸性時(shí)呈黃色,變堿性時(shí)呈紫紅色,中性時(shí)呈桃紅色,以此來觀察和判定培養(yǎng)液pH的變化。在細(xì)胞培養(yǎng)中,BSS主要有如下用途:①作為配制培養(yǎng)基的基礎(chǔ)溶液:如用Hanks液配制水解乳蛋白培養(yǎng)基等;②配制各種試液:如配“胰酶”消化液;③用于洗滌組織和細(xì)胞。目前**常用的BSS是Hanks液、Earle液和PBS等。(一)BSS的配制要求1.要防止鈣的沉淀BSS配制時(shí)應(yīng)將其中的CaCl2單獨(dú)配制,并將平衡鹽溶液配成濃縮液,使其在稀釋前不讓Ca2+與P042-和C032-接觸,以免產(chǎn)生不溶解的CaP04和CaCO3。避免產(chǎn)生CaC03的方法是將NaHC03單獨(dú)配制,使用時(shí)現(xiàn)加。2.要有良好的緩沖作用Hanks液和Earle液都需一定量的C02平衡。因此應(yīng)將瓶蓋(橡皮塞)蓋緊,以防瓶中CO2逃逸,致使溶液pH增高。pH調(diào)節(jié)液單獨(dú)滅菌時(shí)。 天津PBS平衡鹽溶液價(jià)目表PBS 常用于生物應(yīng)用,是一種配方簡單的水基鹽溶液。
(二)Hanks平衡鹽溶液(Hanksbalancedsaltsolutions,HBSS)為了便于保存和減少有關(guān)成分的化學(xué)反應(yīng),此液可配成20倍濃縮液(20×),10倍濃縮液(10×)和5倍濃縮液(5×)的儲(chǔ)存液(母液)?,F(xiàn)以l0×為例,將其配制方法介紹如下:×母液配制法甲液:取450ml三蒸水依次溶解下列試劑NaCl80gKCl4gMgS04·(含2H20者)待完全溶解后,補(bǔ)足三蒸水至500m1。乙液:取450m1三蒸水依次溶解下列試劑(含12H2O者),補(bǔ)足三蒸水至500ml。、乙液等量用三蒸水稀釋10倍,即成使用液。用前高壓滅菌。例如配制1000m1Hanks使用液,則取三蒸水900ml加入甲液50m1、乙液50m1混勻,用(115℃)高壓滅菌15分鐘。臨用時(shí),用。3.無鈣鎂Hanks(calciumandmagnesiumfreeHanksbufferedsaline,CMF-Hanks)液,也稱D-Hanks液。D-Hanks與Hanks液的一個(gè)主要區(qū)別是前者不含鈣和鎂,常用于配制胰蛋白酶等溶液;而Hanks液*含,不能用于5%C02的環(huán)境,若放于C02孵箱中,溶液將迅速變酸,使用時(shí)應(yīng)注意D-Hanks與Hanks液的這些區(qū)別。【附】:為配制上述Hanks液,應(yīng)先配好。配制方法如下:稱取,置玻璃研缽中細(xì)研,逐漸加入,要記好加NaOH的量,共加至,將研好的酚磺酞液用吸管移入燒瓶中加三蒸水(113℃)高壓滅菌15分鐘。
(三)Earle液一般認(rèn)為Earle液比Hanks液緩沖能力強(qiáng),但Earle液在不用橡皮塞的容器中需加C02平衡(利用5%C02氣體平衡),其配方如下:1.母液A(10×)配法NaCl68.0gKC14.0gMgS04·7H202.0gNaH2P04·H2O1.44g葡萄糖10.0g雙蒸水800ml酚磺酞(0.4%)l00ml將兩者混合即為l0×母液A(900ml)。2.母液B(l0×)配法CaC122.0g雙蒸水l00ml將母液A和B分別經(jīng)67.6kPa(115℃)15分鐘滅菌,待冷后,無菌操作將B液徐徐倒入A液中,并分裝,置4℃保存(稱Earle貯存液)。3.7.5%NaHCO37.5%NaHCO3液的配制是稱取NaHC0315g,溶于200ml蒸餾水中,高壓滅菌后分裝,注意用橡皮塞封住瓶口存放。4.使用液配制法取1份Earle貯存液加9份雙蒸水稀釋后,塞緊瓶塞,寫明標(biāo)記,經(jīng)67.6kPa(115℃)15分鐘滅菌,置室溫或4℃保存?zhèn)溆?。臨用時(shí)在每l00ml的Earle使用液中加入無菌的7.5%NaHC032.9ml(也相當(dāng)于調(diào)至所需pH)。Earle平衡鹽溶液含較高的NaH-C03(2.2g/L),適合于5%C02的培養(yǎng)條件。生理鹽水并不能代替平衡鹽溶液磷酸鹽緩沖液使用。
方法二:母液的配制:0.2MNa2HPO4:稱取71.6gNa2HPO4-12H2O,溶于1000ml水0.2MNaH2PO4:稱取2gNaH2PO4-2H2O,溶于1000ml水各種濃度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2MPB(pH=7.4,100ml):取19ml0.2mol/L的NaH2PO4,81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。然后只需將0.2MPB(pH=7.4)按相應(yīng)比例適當(dāng)稀釋即可,如:0.1MPB(PH=7.4):取500ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。如:0.01MPB(PH=7.4):取50ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。0.02MPB(PH=7.4):取100ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可。若需要NaCl的話,加入NaCl至0.9%(g/100ml)即可。細(xì)胞培養(yǎng)緩沖液——PBS/DPBS。四川HBSS平衡鹽溶液供應(yīng)商
平衡鹽溶液PBS磷酸鹽緩沖液由于不含有鈣離子,不易產(chǎn)生沉淀。中國澳門有酚紅平衡鹽溶液價(jià)格信息
平衡鹽溶液是溶液中電解質(zhì)含量與血漿內(nèi)含量相仿的鹽溶液稱為平衡鹽溶液。等滲鹽水含Na+和Cl-為154mmol/L,而血液內(nèi)Na+和Cl-含量分別為142mmol/L和103mmol/L,兩者相比,等滲鹽水的Cl-含量比血液的Cl-含量高50mmol/L,在重度缺水或休克狀態(tài)下,腎臟血液減少,會(huì)影響正常的排氯功能,從靜脈內(nèi)輸給大量等滲鹽水,有導(dǎo)致血Cl-過高,引起高氯性酸中毒的危險(xiǎn)。因此,用等滲鹽水***缺水有不足之處,而使用平衡鹽溶液可避免輸入過多的Cl-,***缺水更符合生理,且能有助于糾正酸中毒。常用的平衡鹽溶液有乳酸鈉和復(fù)方氯化鈉溶液(1/6M乳酸鈉溶液1/3加復(fù)方氯化鈉溶液2/3);與碳酸氫鈉和等滲鹽水溶液(1.25%碳酸氫鈉溶液1/3和等滲鹽水2/3)兩種。中國澳門有酚紅平衡鹽溶液價(jià)格信息