維持15-20分鐘，可殺滅所有的繁殖體和芽胞。本法適用于耐高溫、耐濕物品的**，如普通培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等。（二）下向主要介紹高壓蒸氣**器**效果的驗(yàn)證方法高壓蒸氣**器使物品**后達(dá)到無(wú)菌要求，這是**實(shí)驗(yàn)中的基本保證。高壓**器**效果是否合格足實(shí)驗(yàn)成敗的**基礎(chǔ)**關(guān)鍵的首要步驟。除少數(shù)培養(yǎng)基只需加熱溶解，不需高壓**外，大部分培養(yǎng)基均需121℃高壓**15-30分鐘。尤其是對(duì)無(wú)菌試驗(yàn)培養(yǎng)基**不徹底，直接關(guān)系到對(duì)**的無(wú)菌試驗(yàn)結(jié)果。因此必須認(rèn)真對(duì)高壓**器進(jìn)行**效果的驗(yàn)證。為此我們提供了進(jìn)行**效果驗(yàn)證的一個(gè)簡(jiǎn)易可行的方法。1．試驗(yàn)材料(1)嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片。嗜熱脂肪芽胞桿菌(Bacillusstearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-lO5CFU/片。(2)121℃壓力蒸氣**化學(xué)指示卡。(3)溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基116℃高壓**20分鐘后備用。(4)O—150℃留點(diǎn)溫度計(jì)。2．方法與結(jié)果將嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片（以下簡(jiǎn)稱菌片）用無(wú)菌鑷子放人密封試管中?；瘜W(xué)指示卡和留點(diǎn)溫度計(jì)放入敞口試管中。以上兩種試管各準(zhǔn)備5-10份。分別放置在高壓**器蒸氣口處、底部排氣口處及底部出水口處或上下左右中間5處。如**器為二層，則需放10處。無(wú)血清培養(yǎng)基適用于需要無(wú)血清環(huán)境的細(xì)胞。天津RPMI1640培養(yǎng)基牌子

    發(fā)酵培養(yǎng)基為：葡萄糖80g/l，酵母浸膏20g/l，k2hpo42g/l，mgso4·7h2o50mg/l，cecl30-40mg/l，mnso4·h2o3mg/l，feso4·7h2o3mg/l，vb110mg/l，生物素7μg/l；發(fā)酵工藝同實(shí)施例1，100l發(fā)酵罐中含有70l發(fā)酵培養(yǎng)基。設(shè)置cecl3的添加濃度為0，，如圖1-2所示，隨著cecl3添加量的增加，菌體濃度和谷氨酸含量均有所提升，當(dāng)添加量為10mg/l時(shí)，菌體濃度和谷氨酸含量達(dá)到峰值，然后出現(xiàn)下降趨勢(shì)，但是整個(gè)過(guò)程中，糖酸轉(zhuǎn)化率沒有明顯改變（附圖未顯示）；說(shuō)明cecl3稀土鹽能夠促進(jìn)菌株增殖，提高谷氨酸相關(guān)合成酶的活力，提高谷氨酸的產(chǎn)量，但是過(guò)高的濃度會(huì)造成菌株增殖放緩和死亡，谷氨酸產(chǎn)量相應(yīng)下降。二、通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)確定cecl3添加量為10mg/l，在此基礎(chǔ)上，研究2-羥基乙胺對(duì)菌體濃度、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響。設(shè)置2-羥基乙胺的濃度為，5,10,20,40,80,160mg/l，如圖3-4所示，隨著2-羥基乙胺添加量的增加，菌體濃度隨之增加，相應(yīng)地，谷氨酸含量和糖酸轉(zhuǎn)化率也有所提升，當(dāng)添加量為40mg/l時(shí)，菌體濃度和谷氨酸含量達(dá)到峰值，繼續(xù)增加2-羥基乙胺的濃度，產(chǎn)生明顯的抑菌效果，菌株密度下降明顯；原因是，低濃度的2-羥基乙胺可能促進(jìn)磷脂酰乙醇胺細(xì)胞壁組分的合成。湖南DMEM/F12培養(yǎng)基介紹無(wú)血清培養(yǎng)基提供了純凈的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境。

    又能使培養(yǎng)基的破壞降低至比較低的工藝條件。許多實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，培養(yǎng)基在高溫**的過(guò)程中，其營(yíng)養(yǎng)成分的破壞在很大程度上可以用一級(jí)反應(yīng)來(lái)描述其反應(yīng)速度：式中—表示營(yíng)養(yǎng)成分破環(huán)的速率，C：表示營(yíng)養(yǎng)成分的濃度K'：為反應(yīng)速度常數(shù)，1/s，應(yīng)速度常數(shù)K'與溫度的關(guān)系，可以使用阿累尼烏斯公式表示之：K'=A'exp-△E'/RT……（1）式中——：反應(yīng)速度常數(shù)，1/S：反應(yīng)的活化能（J/mol）R：氣體常數(shù)，*J/mol*kT：反應(yīng)的***溫度，k同樣，**過(guò)程中的反應(yīng)速度常數(shù)也可以用下式表示出：K=A×exp[-E/RT]……（2）（1）、（2）式可以改寫成下列形式：lg(k,2/k,1)=E,/R×(1/T1–T2)……（3）lg(k2/k1)=E/R×(1/T1–T2)……（4）（3）（4）的意義是指：反應(yīng)的溫度從T1升高到T2，其反應(yīng)的速度常數(shù)分別從k,1增加到k,2；k1增加到k2；培養(yǎng)基的**過(guò)程實(shí)際上是營(yíng)養(yǎng)成分破壞、菌體死亡的兩個(gè)平行性反應(yīng)，對(duì)于平行性反應(yīng)，反應(yīng)溫度的提高，其兩個(gè)平行性反應(yīng)的速度常數(shù)都增加，但增加的幅度（大?。﹨s不同，其比值可以表示為：lg(k2/k1)/lg(k,2/k,1)=E/E,……(5)實(shí)驗(yàn)證明：營(yíng)養(yǎng)成分為破壞的反應(yīng)的活化能E的值為E,=—*103J/mol；而菌體死亡的活化能E芽孢：E=418*103J/mol。

    c、結(jié)果為：在用未調(diào)ph液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，整體長(zhǎng)勢(shì)從優(yōu)至弱分別為1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基、cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基、1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基、ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基；在用ph調(diào)至，整體長(zhǎng)勢(shì)從優(yōu)至弱分別為1/、、1/、；不論是否調(diào)ph至，cs液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的馬鈴薯幼苗長(zhǎng)勢(shì)均優(yōu)于ms液體培養(yǎng)基；不論是否調(diào)ph至，1/2cs液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的馬鈴薯幼苗長(zhǎng)勢(shì)均優(yōu)于1/2ms液體培養(yǎng)基。如圖9和圖10所示。說(shuō)明，1/2cs液體培養(yǎng)基和cs液體培養(yǎng)基應(yīng)用于植物水培時(shí)，不論是否調(diào)節(jié)ph至，均能獲得很好的培養(yǎng)效果，克服了傳統(tǒng)液體培養(yǎng)基必須調(diào)節(jié)ph后才適用于植物水培的缺點(diǎn)。**后說(shuō)明的是，以上實(shí)施例*用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而其不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的宗旨和范圍，則均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。DMEM高糖培養(yǎng)基能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的快速增殖。

    從而提高菌株增殖速率，但是濃度過(guò)大會(huì)導(dǎo)致抑菌現(xiàn)象，后期菌株增殖放緩，以產(chǎn)酸為主，2-羥基乙胺還能夠作為陽(yáng)離子表面活性劑，使得細(xì)胞壁疏松，提高細(xì)胞通透性，促進(jìn)谷氨酸釋放到發(fā)酵液，從而提高了谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率。三、通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)確定cecl3添加量為10mg/l、2-羥基乙胺的添加量40mg/l，在此基礎(chǔ)上，研究發(fā)酵培養(yǎng)基b對(duì)菌體濃度、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響。對(duì)照組1采用發(fā)酵培養(yǎng)基a進(jìn)行發(fā)酵，不采用發(fā)酵培養(yǎng)基b，100l發(fā)酵罐中含有70l發(fā)酵培養(yǎng)基a；發(fā)酵工藝參照實(shí)施例1。對(duì)照組2：發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加琥珀酸，其余同實(shí)施例1。對(duì)照組3：發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加殼聚糖，其余同實(shí)施例1。對(duì)照組4：發(fā)酵培養(yǎng)基a中添加5g/l的琥珀酸，其余同對(duì)照組1。實(shí)驗(yàn)組為實(shí)施例1。具體結(jié)果見表1。表1組別菌濃度od600nm谷氨酸產(chǎn)量g/l糖酸轉(zhuǎn)化率％對(duì)照組：對(duì)照組1采用單一發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵，谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率明顯低于實(shí)驗(yàn)組，各組別菌體濃度差異并不大；對(duì)照組4在對(duì)照組1的基礎(chǔ)上添加了琥珀酸，對(duì)菌體濃度并沒有影響，谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率也沒有明顯差異，可能原因是，發(fā)酵前期以菌體增殖為主，產(chǎn)酸較少，琥珀酸對(duì)菌體增殖并沒有明顯的刺激作用。無(wú)酚紅培養(yǎng)基在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中減少了干擾因素。江蘇MEM培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)

無(wú)酚紅培養(yǎng)基確保了細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。天津RPMI1640培養(yǎng)基牌子

    微量元素在細(xì)胞內(nèi)通常以與有機(jī)物結(jié)合的形式存在。其中鐵在細(xì)胞中參與氧的轉(zhuǎn)運(yùn)；鈷是維生素B12的組成部分，參與葉酸的合成和脂肪酸的合成；鎳能夠***脫氧核糖核酸酶、乙酰輔酶A合成酶等在細(xì)胞內(nèi)具有重要功能的酶，還具有穩(wěn)定核酸結(jié)構(gòu)的功能；亞硒酸鈉中的硒，作為谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的輔基，具有抗過(guò)氧化物能力，參與消除細(xì)胞內(nèi)的脂肪酸過(guò)氧化物，提高細(xì)胞的生長(zhǎng)速率和活性。在低血清、無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基中，為滿足細(xì)胞生長(zhǎng)增殖需要，常常添加一些成份：蛋白質(zhì)、多肽、核苷、嘌呤、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物、脂類、及一些血清替代因子等。其中蛋白質(zhì)具有重要的作用，動(dòng)物細(xì)胞對(duì)許多物質(zhì)（難溶于水的離子或脂類物質(zhì)）的攝取需要借助蛋白質(zhì)的傳遞作用，如白蛋白、傳遞蛋白、貼壁蛋白等能夠攜帶脂肪酸、***、礦物質(zhì)等促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。轉(zhuǎn)鐵蛋白是一種重要的傳遞蛋白，能夠結(jié)合鐵，促進(jìn)細(xì)胞對(duì)鐵離子的吸收，并具有***作用，其促生長(zhǎng)作用可能與其具有生長(zhǎng)因子的功能有關(guān)。胰島素可促進(jìn)細(xì)胞對(duì)葡萄糖和氨基酸的利用，商業(yè)化中一些生長(zhǎng)因子以重組蛋白形式添加到培養(yǎng)基中，主要用來(lái)刺激細(xì)胞增殖，并可促進(jìn)糖元和脂肪酸的合成。乙醇胺是一種重要的刺激細(xì)胞生長(zhǎng)的化合物，是腦磷酸的合成前提。天津RPMI1640培養(yǎng)基牌子