大腸桿菌系統(tǒng)通常是小分子細(xì)胞質(zhì)蛋白或結(jié)構(gòu)域表達(dá)的宿主。用大腸桿菌生產(chǎn)蛋白質(zhì),由于只需要簡(jiǎn)單的培養(yǎng)基和條件,因此費(fèi)用低且方便。此外,除了無(wú)細(xì)胞表達(dá),它是速度的系統(tǒng),大腸桿菌倍增時(shí)間(約20min)比酵母(2h)、昆蟲(chóng)細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞都快。一般來(lái)說(shuō),在大腸桿菌中表達(dá)重組蛋白包括:1.將一個(gè)編碼目標(biāo)蛋白的質(zhì)粒導(dǎo)入宿主菌;2.培養(yǎng)細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期;3.誘導(dǎo)蛋白表達(dá)。選擇合適的表達(dá)載體合適的宿主選定后,相應(yīng)的有許多工程化克隆位點(diǎn)和用于驅(qū)動(dòng)蛋白表達(dá)的非編碼序列的載體可用。啟動(dòng)子通常是可誘導(dǎo)的,以在細(xì)胞生長(zhǎng)到合適的密度前阻止目標(biāo)蛋白表達(dá)。大部分載體還提供目標(biāo)蛋白與一系列蛋白標(biāo)簽構(gòu)建融合蛋白的選擇。常用的大腸桿菌表達(dá)載體分為以下兩大類:E.coliRNA聚合酶轉(zhuǎn)錄的載體RANTES還具有抑制某些HIV-1,HIV-2和Simian免疫缺陷病毒(SIV)的菌株的能力。Recombinant Human MICA alpha 3 Protein,mFc Tag
重組腸激酶(rEK)是一種高純度的重組牛腸激酶輕鏈片段,氨基酸序列與牛腸激酶輕鏈一致,有著和天然提取的腸激酶同樣特異的酶切位點(diǎn),切割位點(diǎn)Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合標(biāo)簽,同時(shí)重組腸激酶(rEK)具有比天然酶更高的切割活性。重組腸激酶為采用重組大腸桿菌分泌表達(dá)的高純度、高活性、高特異的牛腸激酶,不含其他蛋白酶,可以在較寬pH范圍(4.5-9.5)和較寬溫度范圍內(nèi)有效切割融合蛋白,并且在各種去垢劑和變性劑存在的條件下仍具有部分活性。本品不含標(biāo)簽,由于具有極高酶切活性,酶切反應(yīng)使用量少,不影響下游蛋白應(yīng)用,可不考慮除去。產(chǎn)品信息規(guī)格100U/200U/500U/1000U/5000U產(chǎn)品性質(zhì)來(lái)源(Source)大腸桿菌表達(dá)分子量(MolecularWeight)理論值25.85kDa外觀(Appearance)澄清、無(wú)色至淡黃色液體酶濃度(EnzymeConcentration)≥5U/uL活性定義(ActivityDefinition)一個(gè)活性單位定義為25°C,12-16h,Recombinant Human 4-1BBL/TNFSF9泛素化反應(yīng)可以修飾蛋白質(zhì),調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)降解。泛素化還影響蛋白質(zhì)體事件,如蛋白質(zhì)定位、活性和功能。
SARS-CoV-2,whichcausestheglobalpandemiccoronavirusdisease2019(Covid-19),belongstoafamilyofvirusesknownascoronaviruses.TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).SeveralemergingSARS-CoV-2genomeshavebeenidentifiedincludingtheOmicron,orB.1.1.529,variant.FirstidentifiedinNovember2021inSouthAfrica,theOmicronvariantquicklybecamethepredominantSARS-CoV-2variantandisconsideredavariantofconcern(VOC).TheOmicronvariantcontains15mutationsinRBDdomainthatpotentiallyaffectviralfitnessandtransmissibility.ThemajorityofthemutationsareinvolvedinACE-2bindingandOmicronbindsACE-2withgreateraffinity,potentiallyexplainingitsincreasedtransmissibility.Severalofthesemutationsarealsoidentifiedinfacilitatingimmuneescapeandreducingneutralizationactivitytoseveralmonoclonalantibodies.
應(yīng)用蛋白質(zhì)糖基化分析Endo H常用于分析蛋白質(zhì)的糖基化模式。通過(guò)Endo H處理,可以移除蛋白質(zhì)上的高甘露糖型糖鏈,從而簡(jiǎn)化糖鏈結(jié)構(gòu),便于進(jìn)一步的分析。生物制藥在生物制藥領(lǐng)域,Endo H用于改善重組蛋白藥物的糖基化質(zhì)量。通過(guò)調(diào)整培養(yǎng)條件和使用Endo H,可以優(yōu)化蛋白質(zhì)的糖鏈結(jié)構(gòu),提高藥物的療效和穩(wěn)定性。疾病研究Endo H也在疾病相關(guān)蛋白質(zhì)的糖基化研究中發(fā)揮作用。例如,腫瘤細(xì)胞表面的糖鏈結(jié)構(gòu)與正常細(xì)胞不同,Endo H可用于研究這些變化及其在疾病進(jìn)展中的作用。前景展望隨著對(duì)蛋白質(zhì)糖基化重要性認(rèn)識(shí)的增加,Endo H的應(yīng)用范圍預(yù)計(jì)將進(jìn)一步擴(kuò)大。未來(lái)研究可能會(huì)集中在開(kāi)發(fā)更高效、專一性的Endo H變體,以及探索其在個(gè)性化醫(yī)療和精細(xì)中的應(yīng)用。結(jié)論Endo H作為一種重要的工具酶,在糖生物學(xué)研究和蛋白質(zhì)工程中扮演著關(guān)鍵角色。深入理解其結(jié)構(gòu)和功能,將有助于推動(dòng)相關(guān)領(lǐng)域的科學(xué)進(jìn)展和臨床應(yīng)用。CX3CL1還通過(guò)募集巨噬細(xì)胞以及通過(guò)募集和介導(dǎo)破骨細(xì)胞前體的粘附而導(dǎo)致傷口愈合。
RecombinantBiotinylatedHumanKIR2DL1Protein,His-AviTag性能參數(shù)分子別名(Synonyms)CD158A;CD158Ankat1;cl-42表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)BiotinylatedHumanKIR2DL1ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-Terminus.ItcontainsHis22-Arg242.[Accession|P43626]分子量大?。∕olecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof27.1kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto48-60kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.制劑(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重構(gòu)方法(Reconstitution)Centrifugethetubebeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.雙堿性內(nèi)切酶又稱為Kex2蛋白酶、YSCF蛋白酶,在酵母體內(nèi)Kex2蛋白酶負(fù)責(zé)加工killer toxin和α-factor的前體。Recombinant Human BTLA(His-Avi Tag)
α-凝血酶(α-Thrombin)可以啟動(dòng)XIII因子和血小板,或者用作血管收縮劑。Recombinant Human MICA alpha 3 Protein,mFc Tag
Cas9核酸酶是一種向?qū)NA(guideRNA,gRNA)引導(dǎo)的核酸內(nèi)切酶,可催化雙鏈DNA的裂解。NLS-Cas9-EGFP在Cas9核酸酶的基礎(chǔ)上進(jìn)行改造,它在N端包含一個(gè)核定位信號(hào)(NLS),在C端包含一個(gè)EGFP和一個(gè)6X(His)序列。當(dāng)Cas9以NLS序列表達(dá)時(shí),Cas9RNP復(fù)合物在進(jìn)入細(xì)胞后立即定位到細(xì)胞核。不需要體內(nèi)轉(zhuǎn)錄或翻譯,提高了效率。此外,與其他系統(tǒng)相比,EGFP標(biāo)簽可作為追蹤或分類轉(zhuǎn)染細(xì)胞的報(bào)告器,通過(guò)熒光細(xì)胞分選(FACS)富集所需基因組編輯的細(xì)胞群。它降低了在基因組編輯應(yīng)用中與單細(xì)胞克隆和基因分型相關(guān)的人工和成本。產(chǎn)品特點(diǎn)如下:無(wú)DNA:沒(méi)有外部DNA添加;高切割效率:NLS確保Cas9蛋白高效進(jìn)入細(xì)胞核;低脫靶效應(yīng):Cas9核酸酶的瞬時(shí)表達(dá)提高了切割的特異性;節(jié)省時(shí)間:無(wú)需轉(zhuǎn)錄和翻譯;減少勞動(dòng)力:通過(guò)基于EGFP的FACS富集細(xì)胞群以進(jìn)行所需的基因組編輯。C端His標(biāo)簽增加了融合蛋白檢測(cè)方法的選擇。可應(yīng)用于:通過(guò)體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA。通過(guò)電穿孔或注射與特定gRNA結(jié)合時(shí)的體內(nèi)基因編輯。通過(guò)基于EGFP的FACS富集細(xì)胞群以進(jìn)行所需的基因組編輯。儲(chǔ)存條件-25~-15℃保存,有效期1年。Recombinant Human MICA alpha 3 Protein,mFc Tag