表達(dá)與純化:重組抑肽酶在大腸桿菌中得到了高效表達(dá),并通過純化過程獲得了純度達(dá)到95%以上的產(chǎn)品。活性驗證:重組抑肽酶展現(xiàn)出與天然抑肽酶相似的酶學(xué)性質(zhì),能夠有效抑制胰蛋白酶的活性。穩(wěn)定性測試:重組抑肽酶在推薦的儲存條件下(-20oC至2-8oC)具有長達(dá)24個月的穩(wěn)定性。討論生產(chǎn)優(yōu)勢:大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)具有成本低、表達(dá)速度快、易于擴大生產(chǎn)等優(yōu)點。此外,重組抑肽酶無動物源性,減少了病毒污染的風(fēng)險,提高了產(chǎn)品的安全性??蒲袘?yīng)用:重組抑肽酶可廣泛應(yīng)用于科研領(lǐng)域,如蛋白純化、細(xì)胞培養(yǎng)、分子生物學(xué)實驗等,提供了一種穩(wěn)定且可靠的實驗工具。工業(yè)生產(chǎn):在工業(yè)生產(chǎn)中,重組抑肽酶可用于重組蛋白藥物的生產(chǎn)過程中,防止蛋白酶降解,提高產(chǎn)品純度和產(chǎn)量。結(jié)論大腸桿菌表達(dá)的重組抑肽酶具有高純度、高活性和良好的穩(wěn)定性,是一種理想的科研和工業(yè)用蛋白酶抑制劑。其無動物源性和高生產(chǎn)效率的特點,為生物技術(shù)領(lǐng)域提供了一種安全、經(jīng)濟的替代品。α-凝血酶(α-Thrombin)在凝血過程中起著非常重要的作用,能夠促使纖維蛋白凝塊的產(chǎn)生。Recombinant Human LAYN Protein,His Tag
牛纖維蛋白原不僅在血液凝固和傷口愈合中發(fā)揮著重要作用,而且在生物醫(yī)學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用前景。深入研究其分子特性和生物學(xué)功能,有助于開發(fā)新的策略,以應(yīng)對與血液凝固相關(guān)的疾病。未來方向未來的研究可以集中在以下幾個方面:牛纖維蛋白原與凝血級聯(lián)反應(yīng)中其他組分的相互作用。牛纖維蛋白原在不同疾病狀態(tài)下的功能變化?;谂@w維蛋白原的新型生物材料的開發(fā)。本綜述總結(jié)了牛纖維蛋白原的分子特性和生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用,為未來的研究提供了方向,并強調(diào)了其在疾病和生物材料開發(fā)中的潛力。Recombinant Biotinylated Human IL-5 Protein,His-Avi Tag透明質(zhì)酸以其獨特的分子結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)在機體內(nèi)發(fā)揮多種重要的生理功能,如潤滑關(guān)節(jié)、調(diào)節(jié)血管壁的通透性。
Trop-2,alsoknownasepithelialglycoprotein-1antigen(EGP-1),isaproteinthatinhumansisencodedbytheTACSTD2gene.Mutationsofthisgeneresultingelatinousdrop-likecornealdystrophy,anautosomalrecessivedisordercharacterizedbyseverecornealamyloidosisleadingtoblindness.產(chǎn)品性質(zhì)別名EGP1;EGP-1;TROP2;GA733-1;gp50;T16;TACSTD2;TROP-2;M1S1;TACD2UniprotNo.P09758表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)RecombinantBiotinylatedHumanTROP-2/TACSTD2ProteinisexpressedfromHEK293cellswithHistagandAvitagattheC-terminal.ItcontainsHis27-Thr274.分子量TheproteinhasapredictedMWof30.5kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto46-55kDabasedonTris-BisPAGEresult.純度>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC活性ELISAData:ImmobilizedAnti-TROP-2Antibody,hFcTagat0.5μg/mL(100μL/well)ontheplate.DoseresponsecurveforBiotinylatedHumanTROP-2,HisTagwiththeEC50of24.1ng/mLdeterminedbyELISA.0EUper1μgoftheproteinbytheLALmethod.制劑Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally5%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.
泛素化是通過三個酶促步驟實現(xiàn)的。在ATP依賴的過程中,泛素酶(E1)催化與泛素形成活性硫酯鍵,然后轉(zhuǎn)移到泛素載體蛋白的活性位點半胱氨酸(E2)。泛素級聯(lián)對特定底物蛋白的選擇性依賴于E2結(jié)合酶(細(xì)胞中包含的相對較少)和泛素-蛋白連接酶(E3)之間的相互作用,迄今為止已經(jīng)鑒定出600多種這種酶。E3s是一個大的,多樣化的蛋白質(zhì)組,其特征是幾個確定的基序之一。這些包括HECT(與e6相關(guān)蛋白c端同源),RING(真正有趣的新基因)或U-box(沒有Zn2+結(jié)合配體的完整補充的修飾的RING基序)結(jié)構(gòu)域。而HECTE3s在泛素化過程中具有直接的催化作用,RING和U-boxE3s促進(jìn)蛋白質(zhì)泛素化。后兩種E3類型充當(dāng)適配器類分子。它們使E2和底物足夠接近,從而促進(jìn)底物的泛素化。雖然許多RING-typee3,如MDM2和c-Cbl,可以單獨發(fā)揮作用,但其他一些是作為更大的多蛋白復(fù)合體的組成部分,如后期促進(jìn)復(fù)合體。綜上所述,這些多面的特性和相互作用使E3s能夠利用泛素-蛋白酶體系統(tǒng),在真核生物的所有細(xì)胞中提供一種強大而具體的蛋白質(zhì)機制。該篩選了11種常用E2結(jié)合酶,可以篩選具有E3連接酶活性的蛋白所匹配的E2酶.(CDNF)也是一種新型神經(jīng)營養(yǎng)因子,對多巴胺能神經(jīng)元的強大活性,與神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞系衍生的(GDNF)相當(dāng)。
SARS-CoV-2,whichcausestheglobalpandemiccoronavirusdisease2019(Covid-19),belongstoafamilyofvirusesknownascoronavirusesthatalsoincludeMERS?CoVandSARS-CoV-1.Coronavirusesarecommonlycomprisedoffourstructuralproteins:Spikeprotein(S),Envelopeprotein(E),Membraneprotein(M)andNucleocapsidprotein(N).TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheSproteinishomotrimeric,witheach~180-kDamonomerconsistingoftwosubunits,S1andS2.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).BeforebindingtotheACE-2receptor,structuralanalysisoftheS1trimershowsthatonlyoneofthethreeRBDdomainsisinthe"up"conformation.Thisisanunstableandtransientstatethatpassesbetweentrimericsubunitsbutisneverthelessanexposedstatetobetargetedforneutralizingantibodytherapy.PolyclonalantibodiestotheRBDoftheSARS-CoV-2proteinhavebeenshowntoinhibitinteractionwiththeACE-2receptor,confirmingRBDasanattractivetargetforvaccinationsorantiviraltherapy.在蛋白質(zhì)表達(dá)體系中,腸激酶常用于切割融合標(biāo)簽,從而釋放出目的蛋白,特別是在pET表達(dá)系統(tǒng)中。Recombinant Biotinylated Human IL-5 Protein,His-Avi Tag
Kex2不能識別和切割單一堿性氨基酸即精氨酸或賴氨酸的羧基端肽鍵。Recombinant Human LAYN Protein,His Tag
糖苷酶F(PNGaseF)酶活定義(UnitDefinition)1個酶活力單位指在10μL的反應(yīng)體系中,37℃條件下1小時從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。儲存條件-25~-15℃保存,有效期1年。使用方法1、變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化:1)在水中加入1μLBuffer1和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg),至終體積10μL;2)100℃溫度下煮沸10min使其變性,冰上冷卻,離心10秒;加入2μL的Buffer2、2μL的10%NP-40、6μL去離子水,總反應(yīng)體積20μL;加入1-2μL的PNGase,輕輕混勻。在37℃孵育1-3h。2、非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化:1)在水中加入2μL的Buffer2和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg)至體積為20μL。2)加入2~5μL的PNGaseF,輕輕混勻。3)37°C孵育4-24h。注意:在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加PNGaseF的量和延長孵育時間。注意事項1.PNGaseF建議搭配我司提供的配套緩沖液使用,按我司說明書建議的操作量配套緩沖液足夠。如您由于使用體系造成配套緩沖液不足,可咨詢當(dāng)?shù)劁N售進(jìn)行購買Recombinant Human LAYN Protein,His Tag