N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定義(UnitDefinition)1個酶活力單位指在10μL的反應體系中,37℃條件下1小時從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。儲存條件-15~-25℃保存,有效期1年。使用說明變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目標糖蛋白(1-20μg),至終體積10μL;2)100℃溫度下煮沸10min使其變性,冰上冷卻,離心10秒;3)加入2μL的Buffer2、2μL的10%NP-40、6μL去離子水,總反應體積20μL;4)加入0.2~0.5μL的PNGase,輕輕混勻。在37℃孵育1-3h。非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目標糖蛋白(1-20μg)至體積為20μL。2)加入0.5~1μL的PNGaseF,輕輕混勻。3)37°C孵育4-24h。注意:在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加PNGaseF的量和延長孵育時間。OSM與白血病抑制因子(LIF)密切相關,實際上,除了其在人類中的特定受體外,它實際上還使用了LIF受體。Recombinant Human Midkine
牛凝血酶(Bovine Thrombin),作為一種高特異性的絲氨酸蛋白水解酶,具有重要的生物學功能的科研應用。本文綜述了牛凝血酶的分子特性、生物學作用及其在醫(yī)學研究中的應用。引言凝血酶是血液凝固過程中的關鍵酶,負責將纖維蛋白原轉化為纖維蛋白,從而促進血栓形成。牛凝血酶因其高比活度(>2000 IU/mg)和高純度,在生物醫(yī)學研究中用作工具酶。材料與方法產(chǎn)品來源與純化:牛凝血酶從牛血漿中提取,并通過一系列生物技術手段進行純化?;钚詼y定:利用特定的底物或熒光共振能量轉移(FRET)底物測定凝血酶活性。應用研究:通過體外實驗和體內(nèi)模型,研究牛凝血酶在血液學、分子生物學和藥物開發(fā)中的應用。結果分子特性:牛凝血酶由兩條肽鏈組成,分子量約為37 KD,具有高度的專一性和高效的催化能力。生物學作用:牛凝血酶能夠催化纖維蛋白原水解釋放A肽和B肽,形成纖維蛋白單體,參與血液凝固和傷口愈合。科研應用:牛凝血酶在重組蛋白的特異性斷裂、基因工程產(chǎn)品開發(fā)、以及作為診斷學中的凝血化驗工具等方面展現(xiàn)出重要價值。Recombinant Human TFF3(CDNF)也是一種新型神經(jīng)營養(yǎng)因子,對多巴胺能神經(jīng)元的強大活性,與神經(jīng)膠質(zhì)細胞系衍生的(GDNF)相當。
分子特性:牛凝血酶的分子特性符合高比活度酶的標準,純度達到SDS-PAGE電泳無雜蛋白條帶的要求。穩(wěn)定性:牛凝血酶在室溫下運輸穩(wěn)定,在2~8℃條件下可保存3年而酶活力未有變化。應用效果:在1:2000的質(zhì)量比下,牛凝血酶能有效切割蛋白,適用于科研和工業(yè)生產(chǎn)中的重組融合蛋白特異性斷裂。討論科研應用:牛凝血酶因其高比活度和專一性,在分子生物學、生物化學和生物工程制藥研究中作為工具酶具有重要價值。臨床:作為止血藥物,牛凝血酶在外科手術中的應用超過100年,因其簡便和高效而受到青睞6。生產(chǎn)優(yōu)勢:牛凝血酶的生產(chǎn)穩(wěn)定性好,純度高,不含有其他蛋白酶活性,適合大規(guī)模生產(chǎn)和應用。
分子結構:牛纖維蛋白原由兩個相似的三聚體亞基組成,每個亞基包含Aα、Bβ和γ三個多肽鏈,通過二硫鍵和非共價鍵連接。生物學功能:牛纖維蛋白原在凝血級聯(lián)反應中被凝血酶裂解為纖維蛋白單體,進而聚合形成穩(wěn)定的纖維蛋白凝塊,是止血和傷口修復的關鍵組分。醫(yī)學應用:牛纖維蛋白原在心血管疾病、創(chuàng)傷以及藥物開發(fā)中展現(xiàn)出潛在的應用價值。討論分子特性:牛纖維蛋白原的分子結構為理解其在凝血過程中的功能提供了基礎,同時為設計新型抗凝血藥物提供了可能。疾病研究:牛纖維蛋白原在血栓形成和溶解中的作用,為研究如深靜脈血栓、心肌梗死等疾病的分子機制提供了重要信息。生物醫(yī)學應用:牛纖維蛋白原的穩(wěn)定性和可用性使其成為研究血液凝固機制和開發(fā)新型生物材料的理想模型。α-凝血酶在肝臟中作為非活性前體-凝血酶原合成,在凝血級聯(lián)反應中被啟用,這種活性酶由285個氨基酸組成。
CD30,又稱KI抗原和Tnfrsf8,是一種120kdaI型跨膜糖蛋白,屬于tnf受體超家族。成熟的人CD30由一個361AA細胞外域(ECD)和六個富含半胱氨酸的重復,28AA跨膜段和188AA細胞質(zhì)域。相比之下,小鼠和大鼠CD30缺乏90AA的ECD,并且只包含三個富含半胱氨酸的重復。在ECD的共同區(qū)域內(nèi),人CD30與小鼠CD30和大鼠CD30的序列認同率分別為53%和49%。人類CD30的交替剪接產(chǎn)生一個等形,包括細胞質(zhì)域的C132AA。CD30通常在抗原細胞和B細胞上表達。但是,它在霍奇金氏病(紅-斯特恩伯格細胞上)、其他淋巴瘤、慢性炎癥中,以及自體免疫。CD30與CD30配體/tnfsf8結合,TH細胞、單核細胞、粒細胞和髓質(zhì)胸腺上皮細胞上表達。產(chǎn)品性質(zhì)別名CD30;CD30KI-1;CD30Lreceptor;TNFRSF8;D1S166EKi-1;CD30KI-1工會編號P28908-1表達區(qū)間及表達系統(tǒng)重組的人CD30/Tnfrsf8蛋白表達于在C-端有標記和AVI標記的HK293細胞。它含有……。分子量大約41.3公里。由于糖基化,蛋白質(zhì)遷移到70-100kda基于三聯(lián)頁面結果。純度SDS-PAGE和高效液相色譜法測定的95%。Fractalkine,指定為CX3CL1,與大多數(shù)其他趨化因子不同,CX3CL1是I型跨膜(TM)粘附蛋白。HPV16 E7(86-93)
成熟的人IL-28A是一種約22-25 kDa蛋白,與小鼠和大鼠IL-28A共享66%的氨基酸序列身份,并顯示跨物種活性。Recombinant Human Midkine
牛纖維蛋白原:止血中的關鍵成分及生物醫(yī)學應用摘要牛纖維蛋白原(Fibrinogen,F(xiàn)g),也稱為凝血因子I,是一種在血液凝固過程中發(fā)揮關鍵作用的血漿糖蛋白。本文討論了牛纖維蛋白原的結構特性、提取方法以及各種生物醫(yī)學應用,突出其在研究和中的重要性。引言牛纖維蛋白原是一種分子量較大的糖蛋白(約340 kDa),由肝臟的肝細胞合成。它在血液凝固的然后一步中起著主要作用,在那里它被轉化為不溶性的纖維蛋白網(wǎng),穩(wěn)定了血凝塊。該分子由兩個相同的半部分組成,每個半部分包含三個多肽鏈(α、β和γ),通過二硫鍵連接。結構特性纖維蛋白原的結構完整性對其功能至關重要。每個分子的一半包含三個鏈(α、β、γ),具有不同的分子量(α約63.5 kDa,β約56 kDa,γ約47 kDa)和大約4%的碳水化合物。這些鏈通過二硫鍵相互連接,這對于維持蛋白質(zhì)的構象和活性至關重要。提取和純化已經(jīng)開發(fā)了各種方法來提取和純化血漿中的牛纖維蛋白原。傳統(tǒng)方法包括鹽析、色譜法和乙醇沉淀。鹽析,特別是使用硫酸銨,是一種常見的方法,因其簡單有效而受到青睞。然而,通過這些方法獲得的纖維蛋白原純度可能會有所不同,需要進一步的純化步驟,如離子交換色譜法,以實現(xiàn)更高程度的純化。Recombinant Human Midkine