RecombinantBiotinylatedHumanKIR2DL1Protein,His-AviTag性能參數(shù)分子別名(Synonyms)CD158A;CD158Ankat1;cl-42表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)BiotinylatedHumanKIR2DL1ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-Terminus.ItcontainsHis22-Arg242.[Accession|P43626]分子量大?。∕olecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof27.1kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto48-60kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.制劑(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重構(gòu)方法(Reconstitution)Centrifugethetubebeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.常用的跨膜蛋白表達(dá)系統(tǒng)包括大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)、酵母表達(dá)系統(tǒng)、昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)和哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)等。Recombinant Mouse bFGF/FGF-2 Protein
大腸桿菌系統(tǒng)通常是小分子細(xì)胞質(zhì)蛋白或結(jié)構(gòu)域表達(dá)的宿主。用大腸桿菌生產(chǎn)蛋白質(zhì),由于只需要簡(jiǎn)單的培養(yǎng)基和條件,因此費(fèi)用低且方便。此外,除了無細(xì)胞表達(dá),它是速度的系統(tǒng),大腸桿菌倍增時(shí)間(約20min)比酵母(2h)、昆蟲細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞都快。一般來說,在大腸桿菌中表達(dá)重組蛋白包括:1.將一個(gè)編碼目標(biāo)蛋白的質(zhì)粒導(dǎo)入宿主菌;2.培養(yǎng)細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期;3.誘導(dǎo)蛋白表達(dá)。選擇合適的表達(dá)載體合適的宿主選定后,相應(yīng)的有許多工程化克隆位點(diǎn)和用于驅(qū)動(dòng)蛋白表達(dá)的非編碼序列的載體可用。啟動(dòng)子通常是可誘導(dǎo)的,以在細(xì)胞生長(zhǎng)到合適的密度前阻止目標(biāo)蛋白表達(dá)。大部分載體還提供目標(biāo)蛋白與一系列蛋白標(biāo)簽構(gòu)建融合蛋白的選擇。常用的大腸桿菌表達(dá)載體分為以下兩大類:E.coliRNA聚合酶轉(zhuǎn)錄的載體Recombinant Human MIF這類蛋白質(zhì)在細(xì)胞的信號(hào)傳遞、物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、細(xì)胞間識(shí)別等多種細(xì)胞功能中扮演著重要的角色。
SARS-CoV-2,whichcausestheglobalpandemiccoronavirusdisease2019(Covid-19),belongstoafamilyofvirusesknownascoronaviruses.TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).SeveralemergingSARS-CoV-2genomeshavebeenidentifiedincludingtheOmicron,orB.1.1.529,variant.FirstidentifiedinNovember2021inSouthAfrica,theOmicronvariantquicklybecamethepredominantSARS-CoV-2variantandisconsideredavariantofconcern(VOC).TheOmicronvariantcontains15mutationsinRBDdomainthatpotentiallyaffectviralfitnessandtransmissibility.ThemajorityofthemutationsareinvolvedinACE-2bindingandOmicronbindsACE-2withgreateraffinity,potentiallyexplainingitsincreasedtransmissibility.Severalofthesemutationsarealsoidentifiedinfacilitatingimmuneescapeandreducingneutralizationactivitytoseveralmonoclonalantibodies.
牛凝血酶(Bovine Thrombin),作為一種高特異性的絲氨酸蛋白水解酶,具有重要的生物學(xué)功能的科研應(yīng)用。本文綜述了牛凝血酶的分子特性、生物學(xué)作用及其在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用。引言凝血酶是血液凝固過程中的關(guān)鍵酶,負(fù)責(zé)將纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,從而促進(jìn)血栓形成。牛凝血酶因其高比活度(>2000 IU/mg)和高純度,在生物醫(yī)學(xué)研究中用作工具酶。材料與方法產(chǎn)品來源與純化:牛凝血酶從牛血漿中提取,并通過一系列生物技術(shù)手段進(jìn)行純化?;钚詼y(cè)定:利用特定的底物或熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)底物測(cè)定凝血酶活性。應(yīng)用研究:通過體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)模型,研究牛凝血酶在血液學(xué)、分子生物學(xué)和藥物開發(fā)中的應(yīng)用。結(jié)果分子特性:牛凝血酶由兩條肽鏈組成,分子量約為37 KD,具有高度的專一性和高效的催化能力。生物學(xué)作用:牛凝血酶能夠催化纖維蛋白原水解釋放A肽和B肽,形成纖維蛋白單體,參與血液凝固和傷口愈合??蒲袘?yīng)用:牛凝血酶在重組蛋白的特異性斷裂、基因工程產(chǎn)品開發(fā)、以及作為診斷學(xué)中的凝血化驗(yàn)工具等方面展現(xiàn)出重要價(jià)值。泛素蛋白(Ubiquitin,簡(jiǎn)稱Ub)是一種在真核細(xì)胞中普遍存在的小分子蛋白,具有高度保守性。
Cas9核酸酶是一種向?qū)NA(guideRNA,gRNA)引導(dǎo)的核酸內(nèi)切酶,可催化雙鏈DNA的裂解。NLS-Cas9-EGFP在Cas9核酸酶的基礎(chǔ)上進(jìn)行改造,它在N端包含一個(gè)核定位信號(hào)(NLS),在C端包含一個(gè)EGFP和一個(gè)6X(His)序列。當(dāng)Cas9以NLS序列表達(dá)時(shí),Cas9RNP復(fù)合物在進(jìn)入細(xì)胞后立即定位到細(xì)胞核。不需要體內(nèi)轉(zhuǎn)錄或翻譯,提高了效率。此外,與其他系統(tǒng)相比,EGFP標(biāo)簽可作為追蹤或分類轉(zhuǎn)染細(xì)胞的報(bào)告器,通過熒光細(xì)胞分選(FACS)富集所需基因組編輯的細(xì)胞群。它降低了在基因組編輯應(yīng)用中與單細(xì)胞克隆和基因分型相關(guān)的人工和成本。產(chǎn)品特點(diǎn)如下:無DNA:沒有外部DNA添加;高切割效率:NLS確保Cas9蛋白高效進(jìn)入細(xì)胞核;低脫靶效應(yīng):Cas9核酸酶的瞬時(shí)表達(dá)提高了切割的特異性;節(jié)省時(shí)間:無需轉(zhuǎn)錄和翻譯;減少勞動(dòng)力:通過基于EGFP的FACS富集細(xì)胞群以進(jìn)行所需的基因組編輯。C端His標(biāo)簽增加了融合蛋白檢測(cè)方法的選擇??蓱?yīng)用于:通過體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA。通過電穿孔或注射與特定gRNA結(jié)合時(shí)的體內(nèi)基因編輯。通過基于EGFP的FACS富集細(xì)胞群以進(jìn)行所需的基因組編輯。儲(chǔ)存條件-25~-15℃保存,有效期1年。跨膜蛋白的多功能性使它們成為理想的藥物作用靶點(diǎn),例如四次跨膜蛋白CD20、Claudin18.2。Recombinant Rat CINC-1/CXCL1
隨著年齡的增長(zhǎng),人體合成透明質(zhì)酸的能力會(huì)逐漸下降,導(dǎo)致皮膚中透明質(zhì)酸的含量降低。Recombinant Mouse bFGF/FGF-2 Protein
3C-like蛋白酶是中東呼吸綜合征冠狀病毒(MERS-CoV)等其它冠狀病毒的繁殖過程中極為重要的蛋白酶。它已成為人類在抗冠狀病毒領(lǐng)域中的研究熱點(diǎn)。本文基于計(jì)算生物學(xué)方法對(duì)與MERS-CoV同屬的蝙蝠冠狀病毒HKU4(HKU4-CoV)的43個(gè)肽類3C-like蛋白酶抑制劑分子,建立三維定量構(gòu)效關(guān)系(3D-QSAR)模型。在基于配體疊合的基礎(chǔ)上,發(fā)現(xiàn)比較分子相似性指數(shù)分析法(CoMSIA)中的四個(gè)場(chǎng)組合(位阻場(chǎng)、靜電場(chǎng)、氫鍵供體場(chǎng)與氫鍵受體場(chǎng))為比較好的模型(Q2=0.522,Rncv2=0.996,Rpre2=0.904;Q2:交叉驗(yàn)證相關(guān)系數(shù),Rncv2:非交叉驗(yàn)證相關(guān)系數(shù),Rpre2:驗(yàn)證集分子的預(yù)測(cè)值相關(guān)系數(shù)),并借助該模型通過分子對(duì)接(docking)與分子動(dòng)力學(xué)(MD)方法闡明了配受體結(jié)合作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:(1)基于比較好的CoMSIA模型基礎(chǔ)上的三維等勢(shì)圖形象地說明了分子基團(tuán)的位阻作用、靜電作用、氫鍵供體與氫鍵受體作用對(duì)分子生物活性的影響;(2)分子對(duì)接研究結(jié)果顯示了疏水性以及結(jié)晶水、氨基酸His166和Glu169在配體和受體結(jié)合過程中產(chǎn)生重要作用;Recombinant Mouse bFGF/FGF-2 Protein