Endo H糖苷內(nèi)切酶H:結(jié)構(gòu)、功能及其在糖生物學(xué)中的應(yīng)用摘要Endo H糖苷內(nèi)切酶H(Endo H)是一種專門切割N-連接糖鏈的內(nèi)切酶,用于糖生物學(xué)和蛋白質(zhì)工程領(lǐng)域。本文將探討Endo H的結(jié)構(gòu)特性、催化機(jī)制、以及其在研究和臨床應(yīng)用中的潛力。引言N-連接糖基化是一種在真核細(xì)胞中普遍存在的蛋白質(zhì)修飾方式,涉及將糖鏈添加到蛋白質(zhì)的天冬酰胺殘基上。Endo H作為一種內(nèi)切酶,能夠特異性地識(shí)別并切割N-連接糖鏈中的β-N-乙酰葡糖胺苷鍵,從而在蛋白質(zhì)工程和生物制藥中發(fā)揮重要作用。Endo H的結(jié)構(gòu)特性Endo H通常來源于流感嗜血桿菌(Hemophilus influenzae),其分子質(zhì)量約為50 kDa。該酶由兩個(gè)結(jié)構(gòu)域組成:一個(gè)負(fù)責(zé)識(shí)別糖鏈的催化結(jié)構(gòu)域和一個(gè)有助于酶穩(wěn)定性的非催化結(jié)構(gòu)域。催化機(jī)制Endo H的催化機(jī)制涉及對(duì)N-連接糖鏈的特異性識(shí)別和切割。酶的活性位點(diǎn)含有多個(gè)氨基酸殘基,這些殘基與糖鏈的特定結(jié)構(gòu)相互作用,導(dǎo)致酶對(duì)底物的高特異性。Endo H催化的糖苷鍵斷裂是一水解反應(yīng),需要水分子的參與。泛素是一種小分子蛋白,存在于真核生物中,它在細(xì)胞內(nèi)起到調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)降解、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期控制。Recombinant Biotinylated Human CD155/PVR Protein,His-Avi Tag
Endo H糖苷內(nèi)切酶H:結(jié)構(gòu)、功能及其在糖生物學(xué)中的應(yīng)用摘要Endo H糖苷內(nèi)切酶H(Endo H)是一種專門作用于糖鏈的內(nèi)切酶,對(duì)研究蛋白質(zhì)糖基化修飾具有重要意義。本文將探討Endo H的結(jié)構(gòu)特性、催化機(jī)制以及在糖生物學(xué)研究中的應(yīng)用。引言蛋白質(zhì)糖基化是一種普遍存在的翻譯后修飾,對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、穩(wěn)定性和功能發(fā)揮著關(guān)鍵作用。Endo H是一種能夠特異性識(shí)別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈的內(nèi)切酶,廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)糖基化分析。Endo H的結(jié)構(gòu)特性Endo H由菌Helix pomatia分泌,其分子量約為130 kDa。該酶具有一個(gè)催化中心,能夠識(shí)別并切割特定的糖苷鍵。Endo H的三維結(jié)構(gòu)尚未完全解析,但其氨基酸序列和某些關(guān)鍵催化殘基已被確定。催化機(jī)制Endo H通過水解N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)與N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)之間的β-1,4糖苷鍵,從而釋放高甘露糖型N-連接糖鏈。該過程不涉及輔因子,表明Endo H催化機(jī)制可能依賴于其活性位點(diǎn)的氨基酸殘基。Recombinant Human PRAK Protein,Strep-II Tag全長膜蛋白由于其天然構(gòu)象,是跨膜蛋白藥物開發(fā)中的好的抗原。在細(xì)胞中的表達(dá)水平通常較低。
α-凝血酶(α-Thrombin)是一種高度特異性的絲氨酸蛋白酶,由凝血酶原(Prothrombin,II因子)經(jīng)蛋白水解活化而來。它在凝血過程中起著非常重要的作用,不僅能夠促使纖維蛋白凝塊的產(chǎn)生,還負(fù)責(zé)提供反饋信號(hào)來尋找前輔因子:V因子和VIII因子。也可以用作血管收縮劑。在體內(nèi),活化的X因子(FactorXa)切割凝血酶原,釋放出活性肽并將凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶。α-凝血酶由一條輕鏈(Achain)(Mw~6,000)和一條重鏈(Bchain)(Mw~31,000)通過二硫鍵連接而成。某些情況下,α-凝血酶會(huì)發(fā)生自溶生成β-凝血酶和γ-凝血酶。β-凝血酶由對(duì)α-凝血酶A鏈水解并切割含有B鏈糖基化位點(diǎn)的小片段(B1,B2)組合而成。除了用于凝血研究之外,α-凝血酶還常用來位點(diǎn)特異性切割融合蛋白?;蛑亟M時(shí)將凝血酶識(shí)別位點(diǎn)插入在目的蛋白與利于后續(xù)純化和/或表達(dá)的多肽或者蛋白之間,通過凝血酶切割表達(dá)的重組子即可釋放目的蛋白。凝血酶本身可通過親和層析技術(shù)快速去除。本品是由勻質(zhì)化的人凝血酶原經(jīng)由Xa因子,Va因子和磷脂活化而得,經(jīng)SDS-PAGE檢測(cè)確保凝血酶原的完全活化,并以NIH凝血酶的標(biāo)準(zhǔn)品為參考,提供的酶活力不少于3091NIHU/mg。
抑肽酶(Aprotinin),又稱為抑蛋白酶肽,是一種競爭性、可逆的絲氨酸蛋白酶抑制劑,可與絲氨酸蛋白酶形成穩(wěn)定復(fù)合物并阻斷酶的活性位點(diǎn),這種結(jié)合是可逆的,大多數(shù)的抑肽酶-蛋白酶復(fù)合物在極端的pH<3.0的條件下解除結(jié)合。抑肽酶抑制糜蛋白酶、胰蛋白酶、激肽釋放酶和血纖維蛋白溶酶,不能抑制Xa因子和凝血酶。從結(jié)構(gòu)上來說,抑肽酶是一種來自牛肺的單體球狀蛋白,由58個(gè)氨基酸組成并排列在具有三個(gè)交聯(lián)二硫鍵的單個(gè)多肽鏈中。重組抑肽酶采用大腸桿菌表達(dá),在GMP法規(guī)下生產(chǎn),不含任何動(dòng)物源成分,無動(dòng)物源性的病毒污染,氨基酸序列與來源于牛肺的抑肽酶完全一致,具有與動(dòng)物源性抑肽酶相同的酶學(xué)性質(zhì),可替代動(dòng)物源性抑肽酶用于各種生物技術(shù)過程中,如:重組蛋白生產(chǎn)中抑制絲氨酸蛋白酶的活性;細(xì)胞培養(yǎng)等。C5aR(C5a 受體)是補(bǔ)體系統(tǒng)的一部分,它有兩種已知的受體:C5aR1(CD88)和C5L2。
糖苷酶F(PNGaseF)是一種酰胺水解酶,經(jīng)過和平空間站伊麗莎菌克隆,主要由腦膜炎膿桿菌等革蘭氏陰性菌分泌。N-糖苷酶F(PNGaseF)在酵母中重組表達(dá)(比活性:100000U/mL),可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖、雜合和復(fù)雜的寡糖糖蛋白。PNGaseF的切割位點(diǎn)為糖蛋白內(nèi)側(cè)N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵,同時(shí)將酶解后蛋白上的天冬氨酰轉(zhuǎn)化為天冬氨酸。本產(chǎn)品帶his標(biāo)簽,常應(yīng)用于抗體及其相關(guān)蛋白完全去糖基化。另外,我司還提供其他類型的糖苷酶,包括酵母重組表達(dá)的N-糖苷酶F(比活性:750000U/mL),內(nèi)切糖苷酶H,內(nèi)切糖苷酶S。產(chǎn)品信息產(chǎn)品性質(zhì)中文別名(Chinesesynonym)N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶F英文別名(Englishsynonym)PNGaseF來源(Source)酵母重組表達(dá)分子量(Molecularweight)36kDa比活性(Specificactivity)100000U/mL緩沖液組分(Buffer)20mMTris-HClpH7.5,50mMNaCl,5mMEDTA,50%Glycerolα-凝血酶是研究血液凝固機(jī)制和血栓性疾病發(fā)展的主要靶點(diǎn)。重組α-凝血酶用于體外測(cè)定。Recombinant Mouse IL-5 R alpha/CD125 Protein,His Tag
使用全長A2AR蛋白進(jìn)行藥物篩選:全長A2AR蛋白可以用于ELISA、SPR親和分析,以篩選和優(yōu)化潛在的A2AR調(diào)節(jié)劑。Recombinant Biotinylated Human CD155/PVR Protein,His-Avi Tag
牛凝血酶(Bovine Thrombin),作為一種高特異性的絲氨酸蛋白水解酶,具有重要的生物學(xué)功能的科研應(yīng)用。本文綜述了牛凝血酶的分子特性、生物學(xué)作用及其在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用。引言凝血酶是血液凝固過程中的關(guān)鍵酶,負(fù)責(zé)將纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,從而促進(jìn)血栓形成。牛凝血酶因其高比活度(>2000 IU/mg)和高純度,在生物醫(yī)學(xué)研究中用作工具酶。材料與方法產(chǎn)品來源與純化:牛凝血酶從牛血漿中提取,并通過一系列生物技術(shù)手段進(jìn)行純化?;钚詼y(cè)定:利用特定的底物或熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)底物測(cè)定凝血酶活性。應(yīng)用研究:通過體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)模型,研究牛凝血酶在血液學(xué)、分子生物學(xué)和藥物開發(fā)中的應(yīng)用。結(jié)果分子特性:牛凝血酶由兩條肽鏈組成,分子量約為37 KD,具有高度的專一性和高效的催化能力。生物學(xué)作用:牛凝血酶能夠催化纖維蛋白原水解釋放A肽和B肽,形成纖維蛋白單體,參與血液凝固和傷口愈合。科研應(yīng)用:牛凝血酶在重組蛋白的特異性斷裂、基因工程產(chǎn)品開發(fā)、以及作為診斷學(xué)中的凝血化驗(yàn)工具等方面展現(xiàn)出重要價(jià)值。Recombinant Biotinylated Human CD155/PVR Protein,His-Avi Tag