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Recombinant Mouse VEGF R3/FLT4 Protein

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-08-14

    Lambda核酸外切酶(LambdaExonuclease)高度特異性地作用于5'端磷酸化的雙鏈DNA主要通過(guò)以下幾個(gè)方面實(shí)現(xiàn):1.**結(jié)構(gòu)特異性識(shí)別**:Lambda核酸外切酶具有識(shí)別特定DNA結(jié)構(gòu)的能力,特別是5'端磷酸化的雙鏈DNA。這種識(shí)別能力通常由酶的活性位點(diǎn)結(jié)構(gòu)決定,能夠與5'-磷酸基團(tuán)形成特定的相互作用。2.**酶活性位點(diǎn)**:酶的活性位點(diǎn)含有氨基酸殘基,這些殘基能夠與5'-磷酸基團(tuán)形成氫鍵或其他非共價(jià)相互作用,從而穩(wěn)定酶與DNA的結(jié)合。3.**切割機(jī)制**:Lambda核酸外切酶通過(guò)水解5'-磷酸二酯鍵來(lái)降解DNA鏈。它從5'端開(kāi)始,逐個(gè)移除核苷酸,直到遇到非5'-磷酸化的末端或遇到結(jié)構(gòu)上的障礙。4.**低活性對(duì)非特異性底物**:對(duì)于5'-羥基(OH)末端的DNA或單鏈DNA,Lambda核酸外切酶的活性降低,因?yàn)檫@些底物缺乏與酶活性位點(diǎn)結(jié)合所需的特異性相互作用。5.**酶動(dòng)力學(xué)**:Lambda核酸外切酶對(duì)5'-磷酸化雙鏈DNA的酶動(dòng)力學(xué)參數(shù)(如Km和Vmax)與對(duì)非特異性底物的參數(shù)有差異,這反映了其對(duì)特異性底物的高親和力和高催化效率。6.**過(guò)程性(Processivity)**:一旦Lambda核酸外切酶結(jié)合到特異性底物上,它可以連續(xù)移除多個(gè)核苷酸,而不需要頻繁地與底物解離和重新結(jié)合,這增加了酶的效率。TBE (Thymine base editor):這是一種新型的堿基編輯工具,不依賴(lài)脫氨酶,能夠通過(guò)人源化尿嘧啶DNA-糖基化酶。Recombinant Mouse VEGF R3/FLT4 Protein,hFc Tag

Recombinant Mouse VEGF R3/FLT4 Protein,hFc Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

DNA瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的分子生物學(xué)技術(shù),用于分離、鑒定和定量DNA片段。以下是關(guān)于DNA瓊脂糖凝膠電泳的一些關(guān)鍵點(diǎn):1.**原理**:-利用瓊脂糖凝膠作為介質(zhì),DNA片段在電場(chǎng)作用下根據(jù)其大小和電荷差異進(jìn)行分離。較小的DNA片段遷移速度快,而較大的片段遷移速度慢。2.**瓊脂糖**:-一種由瓊脂糖粉末和緩沖液(如TAE或TBE)混合制成的凝膠。瓊脂糖濃度通常在0.7%到2%之間,濃度越高,分辨率越高,但凝膠孔隙越小,遷移速度越慢。3.**樣品準(zhǔn)備**:-DNA樣品通常需要在加載前進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚?,如純化、稀釋?zhuān)袝r(shí)還需添加樣品緩沖液以保證樣品在電泳過(guò)程中的穩(wěn)定性。4.**加載樣品**:-使用微量移液管將樣品和加載緩沖液(通常含有追蹤染料,如溴酚藍(lán))混合后,小心地加載到凝膠孔中。5.**電泳**:-將凝膠置于電泳槽中,連接電源,施加恒定電壓進(jìn)行電泳。電壓和時(shí)間根據(jù)凝膠濃度和所需分辨率進(jìn)行調(diào)整。6.**染色**:-電泳完成后,為了可視化DNA條帶,通常使用熒光染料如EB(溴化乙錠)或SYBRGreen進(jìn)行染色。染色后的凝膠在紫外光下觀察,DNA條帶會(huì)發(fā)出熒光。7.**分析**:-通過(guò)比較DNA條帶的位置和已知大小的DNA標(biāo)準(zhǔn)品(DNAladder),可以估計(jì)DNA片段的大小。

Recombinant Human FZD7/Frizzled-7 Protein-VLP牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I可以用于PCR產(chǎn)物的克隆,通過(guò)其識(shí)別序列在引物設(shè)計(jì)中引入,實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增后的DNA片段連接 。

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T4UvsX重組酶的保存和純化是實(shí)驗(yàn)室工作流程中的重要環(huán)節(jié),確保了酶的穩(wěn)定性和活性。以下是根據(jù)搜索結(jié)果提供的信息:保存條件:-T4UvsX重組酶通常在-20°C的條件下保存,可以保持3年的有效期。-某些產(chǎn)品說(shuō)明中提到,該制品不含甘油,可用于建立凍干體系,這可能對(duì)長(zhǎng)期保存和運(yùn)輸有額外的好處。-建議避免反復(fù)凍融,因?yàn)檫@可能會(huì)影響酶的活性。純化過(guò)程:-T4UvsX重組酶是由大腸桿菌表達(dá)和純化的。這意味著科學(xué)家首先將T4噬菌體的uvsX基因克隆到適合在大腸桿菌中表達(dá)的質(zhì)粒載體中。-然后將這個(gè)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌宿主細(xì)胞中,使其表達(dá)T4UvsX蛋白。-接下來(lái),通過(guò)一系列生化步驟從大腸桿菌細(xì)胞中提取和純化T4UvsX蛋白,這些步驟可能包括細(xì)胞裂解、離心、層析等技術(shù)。注意事項(xiàng):-T4UvsX重組酶的保存液中甘油含量為20%,建議單獨(dú)分裝保存,以避免反復(fù)凍融。-該酶無(wú)核酸酶活性,這表明它在催化反應(yīng)時(shí)不會(huì)切割DNA鏈,而是促進(jìn)DNA鏈的重組。-本產(chǎn)品用于科研用途,不應(yīng)用于臨床診斷。應(yīng)用:-T4UvsX重組酶主要用于等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),如重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA),這是一種快速、靈敏的核酸檢測(cè)技術(shù)。通過(guò)遵循這些保存和純化指南,研究人員可以確保T4UvsX重組酶在實(shí)驗(yàn)中的有效性和可靠性。

Benzonase核酸酶殘留檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用確實(shí)非常廣,主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:1.**生物制藥**:在生物制藥行業(yè)中,確保產(chǎn)品中無(wú)核酸酶殘留是非常重要的,以避免潛在的免疫反應(yīng)或影響藥物的穩(wěn)定性和效果。2.**重組蛋白純化**:在蛋白質(zhì)的純化過(guò)程中,去除樣品中的核酸酶殘留對(duì)于提高純度和防止后續(xù)反應(yīng)的干擾至關(guān)重要。3.**疫苗生產(chǎn)**:疫苗制備過(guò)程中,去除DNA污染是滿(mǎn)足監(jiān)管要求和保障疫苗安全性的關(guān)鍵步驟。4.**細(xì)胞培養(yǎng)**:在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,去除培養(yǎng)基中的核酸酶殘留有助于防止細(xì)胞受到不必要的酶活性影響。5.**分子生物學(xué)研究**:在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,如PCR、克隆、基因表達(dá)分析等,去除樣品中的核酸酶殘留可以避免實(shí)驗(yàn)結(jié)果的偏差。6.**食品工業(yè)**:在某些食品加工過(guò)程中,使用Benzonase核酸酶來(lái)降低粘度或去除DNA/RNA,以改善產(chǎn)品特性或滿(mǎn)足特定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。7.**環(huán)境監(jiān)測(cè)**:在環(huán)境樣本中檢測(cè)核酸酶殘留,以評(píng)估環(huán)境污染程度或監(jiān)測(cè)特定生物活動(dòng)。8.**法醫(yī)學(xué)和醫(yī)學(xué)診斷**:在法醫(yī)學(xué)檢測(cè)或某些醫(yī)學(xué)診斷過(guò)程中,準(zhǔn)確檢測(cè)核酸酶殘留對(duì)于案件調(diào)查或疾病診斷具有重要意義。將MAGE-A3基因序列克隆到一個(gè)表達(dá)載體中,該載體通常包含有抗生物質(zhì)抗性基因、啟動(dòng)子、核糖體結(jié)合位點(diǎn)。

Recombinant Mouse VEGF R3/FLT4 Protein,hFc Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

染料預(yù)混合的PCRMasterMix是一種特殊的PCR反應(yīng)液,它在配方中已經(jīng)預(yù)先加入了適合電泳分析的染料。這種設(shè)計(jì)使得PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物可以直接用于凝膠電泳,無(wú)需額外添加上樣緩沖液,從而簡(jiǎn)化了操作流程并減少了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。以下是一些關(guān)于染料預(yù)混合PCRMasterMix的特點(diǎn):1.**方便性**:由于省去了擴(kuò)增后添加上樣緩沖液的步驟,使得PCR到電泳的過(guò)渡更為簡(jiǎn)便快捷。2.**一致性**:預(yù)混合的染料確保了每次PCR實(shí)驗(yàn)中使用的染料濃度一致,有助于提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性。3.**可視化**:一些染料預(yù)混合PCRMasterMix使用的染料在紫外光下具有明顯的熒光或顏色變化,有助于在電泳過(guò)程中實(shí)時(shí)監(jiān)控DNA條帶的形成。4.**兼容性**:預(yù)混合的染料通常與各種類(lèi)型的PCR儀器和電泳設(shè)備兼容。5.**穩(wěn)定性**:預(yù)混合的染料在MasterMix中保持穩(wěn)定,直到使用時(shí)才與DNA樣本接觸,減少了染料降解或失效的風(fēng)險(xiǎn)。6.**靈敏度**:某些染料具有較高的靈敏度,可以檢測(cè)到極少量的DNA,有助于提高PCR檢測(cè)的靈敏度。7.**安全性**:預(yù)混合的染料減少了操作過(guò)程中的接觸次數(shù),降低了樣品交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)。

由于其高活性,pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶允許從極少量的細(xì)胞中進(jìn)行實(shí)驗(yàn),如單細(xì)胞水平的研究。Recombinant Mouse BRAK/CXCL14

利用牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I的連接原理,可以在無(wú)需DNA連接酶的情況下,快速高效地連接DNA片段,實(shí)現(xiàn)克隆。Recombinant Mouse VEGF R3/FLT4 Protein,hFc Tag

pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是一種經(jīng)過(guò)改造的高活性Tn5轉(zhuǎn)座酶,與ProteinA融合,形成一種新型融合酶,應(yīng)用于CUT&Tag技術(shù)中,用于研究蛋白質(zhì)與基因組DNA的相互作用。這種融合酶具備以下特點(diǎn):1.**高活性**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是超高活性的突變形式,體外轉(zhuǎn)座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的N端結(jié)構(gòu)域?yàn)镻roteinA的一部分,可以與免疫球蛋白的Fc區(qū)相互作用,特別是與大多數(shù)哺乳動(dòng)物的IgG結(jié)合。3.**Tn5轉(zhuǎn)座酶活性**:C端結(jié)構(gòu)域?yàn)門(mén)n5轉(zhuǎn)座酶,能夠特異性識(shí)別轉(zhuǎn)座子兩端反向重復(fù)的ME序列(MosaicEnd),并在形成轉(zhuǎn)座復(fù)合體后隨機(jī)插入靶DNA中。4.**應(yīng)用廣**:適用于CUT&Tag技術(shù)、高通量測(cè)序建庫(kù)、ATAC-seq等,特別適用于早期胚胎發(fā)育、干細(xì)胞、以及表觀遺傳學(xué)等研究領(lǐng)域。5.**操作簡(jiǎn)便**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)步驟,可以在一步反應(yīng)中實(shí)現(xiàn)DNA片段化和接頭連接,從細(xì)胞到二代測(cè)序文庫(kù)的轉(zhuǎn)化過(guò)程需9小時(shí)。6.**低細(xì)胞投入量**:CUT&Tag技術(shù)允許從低至60個(gè)細(xì)胞的樣本中獲得結(jié)果,甚至可以應(yīng)用于單細(xì)胞水平的研究。7.**高質(zhì)量結(jié)果**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用可以保證DNA片段化,同時(shí)獲得的蛋白純度高、核酸殘留低。Recombinant Mouse VEGF R3/FLT4 Protein,hFc Tag