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來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-10-03

大腸桿菌表達(dá)的重組抑肽酶(Aprotinin)是一種通過基因工程技術(shù)在大腸桿菌中生產(chǎn)的蛋白酶抑制劑,具有以下特性和應(yīng)用:1.**來源**:重組抑肽酶是通過大腸桿菌(E.coli)表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的,確保了無動(dòng)物源性成分,減少了病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)。2.**結(jié)構(gòu)**:它是一種單體球狀蛋白,由58個(gè)氨基酸組成,具有三個(gè)交聯(lián)二硫鍵的單個(gè)多肽鏈。3.**功能**:作為一種競爭性、可逆的絲氨酸蛋白酶抑制劑,重組抑肽酶能夠抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、激肽釋放酶和血纖維蛋白溶酶等的活性。4.**應(yīng)用**:在生物技術(shù)過程中,重組抑肽酶可以替代動(dòng)物源性抑肽酶,用于重組蛋白生產(chǎn)中抑制絲氨酸蛋白酶的活性,以及在細(xì)胞培養(yǎng)等過程中。5.**產(chǎn)品信息**:通常以粉末形式提供,具有明確的貨號(hào)和規(guī)格,如1mg或10mg的包裝。6.**產(chǎn)品性質(zhì)**:包括外觀、溶解度、純度、蛋白含量、酶濃度和活性定義等詳細(xì)參數(shù)。7.**儲(chǔ)存條件**:凍干粉在2~8℃保存,有效期為2年。8.**使用方法**:推薦的結(jié)合pH>6.0,在pH<3.0的條件下不結(jié)合,可直接使用0.9%NaCl溶解,溶解后可-20℃儲(chǔ)存。9.**注意事項(xiàng)**:產(chǎn)品作科研用途,操作時(shí)需穿著實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套。在基因編輯過程中,Pfu DNA Polymerase 可用于合成高質(zhì)量的單鏈或雙鏈DNA修復(fù)模板。MUC5AC

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提高SpCas9蛋白在基因編輯中的特異性和效率是CRISPR-Cas9技術(shù)發(fā)展的關(guān)鍵。根據(jù)新的研究進(jìn)展,以下是一些提高SpCas9特異性和效率的策略:1.**工程化改造**:通過定向進(jìn)化和蛋白工程的方法,研究人員可以對SpCas9進(jìn)行改造,以提高其在細(xì)胞中的基因編輯活性。例如,JenniferDoudna團(tuán)隊(duì)開發(fā)的工程化iGeoCas9,通過在WED結(jié)構(gòu)域引入突變,顯著提高了基因編輯效率,比野生型GeoCas9高出100倍以上。2.**優(yōu)化gRNA設(shè)計(jì)**:合理設(shè)計(jì)的gRNA可以提高Cas9的特異性,減少脫靶效應(yīng)。研究人員通過生物信息學(xué)工具和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,篩選出與目標(biāo)DNA序列互補(bǔ)性更強(qiáng)且特異性更高的gRNA。3.**使用高保真Cas9變體**:研究人員開發(fā)了高保真Cas9變體,這些變體在保持編輯活性的同時(shí),降低了脫靶風(fēng)險(xiǎn)。例如,通過突變Cas9蛋白的關(guān)鍵氨基酸殘基,可以減少其在非目標(biāo)位點(diǎn)的切割活性。4.**PAM序列的優(yōu)化**:通過改變Cas9蛋白的PAM序列識(shí)別能力,可以擴(kuò)大其靶向范圍,從而提高編輯效率。例如,開發(fā)能夠識(shí)別非典型PAM序列的Cas9變體。5.**遞送系統(tǒng)的優(yōu)化**:使用核糖核的蛋白(RNP)復(fù)合物的形式遞送Cas9和gRNA,可以提高Cas9蛋白的穩(wěn)定性和編輯效率。這種方法避免了mRNA或質(zhì)粒遞送可能引起的免疫反應(yīng)。Recombinant Human IL-37b ProteinTaq DNA Polymerase 能夠在相對較高的溫度下保持穩(wěn)定,其適催化溫度在75-80°C。

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11A型肺炎多糖鼠單抗是針對肺炎鏈球菌11A型多糖的單克隆抗體,具有以下特點(diǎn):1.**特異性**:鼠單抗具有高度的特異性,能夠識(shí)別并結(jié)合到11A型肺炎鏈球菌的多糖抗原。2.**制備方法**:通過將肺炎多糖與乙肝表面蛋白的偶聯(lián)物作為抗原免疫小鼠,然后從小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,篩選出能夠表達(dá)特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞株。3.**應(yīng)用**:11A型肺炎多糖鼠單抗可用于定量檢測33F型肺炎多糖或乙肝表面蛋白,其制備的腹水型單抗對不同批次的樣本回收率為95%~105%。4.**疫苗開發(fā)**:在肺炎鏈球菌疫苗的研發(fā)中,多糖蛋白結(jié)合疫苗是當(dāng)前的趨勢,通過將多糖與蛋白偶聯(lián),可以提供更高效價(jià)的抗體水平和免疫記憶。5.**免疫反應(yīng)**:11A型肺炎多糖鼠單抗能夠誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生針對肺炎多糖的血清抗體,這有助于研究肺炎鏈球菌的免疫機(jī)制。6.**疾病預(yù)防**:肺炎鏈球菌是引起肺炎、腦膜炎和敗血癥等嚴(yán)重疾病的主要病原體,11A型肺炎多糖鼠單抗的研究有助于開發(fā)更有效的疫苗,預(yù)防相關(guān)疾病。7.**研究進(jìn)展**:已有研究報(bào)道了使用半合成寡糖結(jié)合疫苗候選物,能夠激發(fā)對肺炎鏈球菌3型的保護(hù)性免疫反應(yīng)。

酵母重組表達(dá)的N-糖苷酶F(PNGaseF)在實(shí)際應(yīng)用中具有以下優(yōu)勢:1.**高比活性**:具有高達(dá)750,000U/mL的比活性,這表明該酶在催化反應(yīng)中具有很高的效率。2.**快速反應(yīng)**:新型的FastPNGaseF能在數(shù)分鐘內(nèi)完成徹底且無偏好性的去糖基化,縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。3.適用性:PNGaseF可以用于天然或變性條件下的糖蛋白或糖多肽的去N-糖基化修飾。4.**無其他糖苷酶活性**:該酶專一性高,無其他糖苷酶活性,確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。5.**His標(biāo)簽**:帶有His標(biāo)簽,便于通過親和層析進(jìn)行純化和檢測。6.**穩(wěn)定性和儲(chǔ)存條件**:在含有50%甘油的儲(chǔ)存緩沖液中,-15~-25℃保存,有效期長達(dá)1年。7.**簡化的實(shí)驗(yàn)流程**:FastPNGaseF簡化了實(shí)驗(yàn)流程,減少了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,同時(shí)保持了靈敏度和重復(fù)性。8.**兼容性好**:去糖基化后的產(chǎn)物可以直接用于下游的色譜或質(zhì)譜分析,無需額外的純化步驟。9.**無偏好性**:能夠迅速且無偏好性地去除所有的N-糖鏈,確保了獲得的糖鏈分布能夠表示抗體的正確組成。Pfu DNA Polymerase 具有較高的保真度,能夠在DNA合成過程中減少錯(cuò)誤摻入的堿基,降低非目標(biāo)突變的發(fā)生率。

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PreScissionProtease(PSP)是一種由人鼻病毒14型的3C蛋白酶(humanrhinovirus(HRV)type143Cprotease)和GST組成的融合蛋白。它具有以下特點(diǎn):1.**特異性識(shí)別**:PreScissionProtease能在低溫下(4°C)特異識(shí)別短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly氨基酸殘基之間進(jìn)行酶切。2.**依賴結(jié)構(gòu)**:底物的識(shí)別和切割不僅依賴于融合蛋白的一級(jí)結(jié)構(gòu),還依賴于融合蛋白的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)。3.**分離GST標(biāo)簽**:它可以特異性的將pGEX-6P系列等載體表達(dá)出的帶有酶底物識(shí)別多肽序列融合蛋白的GST標(biāo)簽進(jìn)行分離。4.**表達(dá)宿主**:本品由大腸桿菌中重組表達(dá),并以無菌液體形式提供。5.**物理性質(zhì)**:分子量約為46kDa,物理外觀為無菌無色液體。6.**儲(chǔ)存緩沖液**:25mMTris-HCl(pH8.0),150mMNaCl,1mMEDTA,5mMDTT,50%(V/V)Glycerin。7.**酶切緩沖液**:10×酶切緩沖液為500mMTris-HCl(pH7.0),1.5MNaCl,10mMEDTA,10mMDTT。8.**純度**:經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析,純度大于95%。9.**酶活定義**:在5℃條件下反應(yīng)16小時(shí),能夠切割10μg的GST標(biāo)簽的融合蛋白達(dá)90%以上所需的酶量定義為一個(gè)活性單位。Probe qPCR Mix (2×)通常含有熱啟動(dòng)DNA聚合酶,這種聚合酶在高溫下激發(fā),可以減少非特異性擴(kuò)增 。PTD-p65-P1 Peptide

隨后,泛素分子從E1轉(zhuǎn)移到泛素結(jié)合酶E2,再通過泛素連接酶E3的作用,將泛素分子連接到靶蛋白上。MUC5AC

酵母重組表達(dá)的PNGaseF(N-糖苷酶F)是一種用于蛋白質(zhì)去糖基化實(shí)驗(yàn)的酰胺水解酶,具有以下特點(diǎn)以確保實(shí)驗(yàn)中的活性和穩(wěn)定性:1.**高效性**:具有高比活性,例如750000U/mL,這有助于快速高效地進(jìn)行去糖基化反應(yīng)。2.**穩(wěn)定性**:在含有50%甘油的儲(chǔ)存緩沖液中,比較好的活性和穩(wěn)定性可維持長達(dá)24個(gè)月。3.**使用條件**:可以在原生或變性條件下使用,對于變性條件下的去糖基化,建議添加NP-40以解除SDS的抑制作用。4.**儲(chǔ)存條件**:建議在-15~-25℃保存,有效期1年。5.**酶活定義**:1個(gè)酶活力單位指在10μL的反應(yīng)體系中,37℃條件下1小時(shí)從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。6.**操作簡便**:提供了使用說明,包括變性和非變性條件下的蛋白質(zhì)去糖基化步驟。7.**His標(biāo)簽**:產(chǎn)品帶有His標(biāo)簽,便于在實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行純化和檢測。8.**純度**:純度達(dá)到95%以上,通過SDS-PAGE和完整ESI-MS進(jìn)行確定。9.**快速反應(yīng)**:有些產(chǎn)品如FastPNGaseF,可以在數(shù)分鐘內(nèi)完成徹底且無偏好性地去糖基化。10.**注意事項(xiàng)**:產(chǎn)品供科研使用,操作時(shí)應(yīng)穿戴適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)室防護(hù)裝備。遵循這些指導(dǎo)原則和產(chǎn)品說明,可以確保PNGaseF在實(shí)驗(yàn)中的活性和穩(wěn)定性,從而獲得可靠的去糖基化結(jié)果。MUC5AC