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Recombinant Mouse VEGF120

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-11-24

提取的病毒核酸可以直接用于多種實(shí)驗(yàn),主要包括:1.**實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)**:這是一種常用的技術(shù),可以對(duì)病毒核酸進(jìn)行定量檢測(cè)。它通過(guò)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR過(guò)程中的熒光信號(hào)來(lái)確定病毒核酸的數(shù)量。例如,病毒核酸檢測(cè)就是基于此技術(shù),通過(guò)設(shè)計(jì)特異性引物和探針,對(duì)病毒的靶基因進(jìn)行定性檢測(cè)。2.**逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)**:這項(xiàng)技術(shù)用于檢測(cè)RNA病毒,通過(guò)將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增,以檢測(cè)病毒的存在。RT-PCR技術(shù)靈敏而且用途廣,可以用于檢測(cè)細(xì)胞、組織中RNA病毒的含量。3.**等溫?cái)U(kuò)增法**:包括環(huán)介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)和切口延伸等溫?cái)U(kuò)增(NEAR),這些方法在恒溫條件下進(jìn)行,無(wú)需復(fù)雜的設(shè)備,適用于快速、現(xiàn)場(chǎng)的病毒核酸檢測(cè)。4.**數(shù)字PCR(dPCR)**:這是一種高度靈敏的技術(shù),可以對(duì)病毒核酸進(jìn)行定量。它通過(guò)將樣本分配到成千上萬(wàn)的微小反應(yīng)室中,每個(gè)反應(yīng)室單獨(dú)進(jìn)行PCR擴(kuò)增,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒核酸的精確計(jì)數(shù)。5.**核酸雜交技術(shù)**:如熒光原位雜交(FISH),可以用于檢測(cè)特定病毒核酸序列在細(xì)胞或組織中的存在和定位。Cas9 NLS在Cas9蛋白的N端和C端都含有SV40 T抗原的核定位序列,這使得Cas9與gRNA形成的復(fù)合物。Recombinant Mouse VEGF120

Recombinant Mouse VEGF120,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶I(BstDNAPolymeraseI)是一種熱穩(wěn)定的酶,它在高溫下(55-65°C)仍然保持活性,這使得它在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中非常有用,尤其是在需要高溫反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)中,如熱循環(huán)擴(kuò)增(PCR)。BstDNAPolymeraseI具有以下特性:1.**熱穩(wěn)定性**:BstDNAPolymeraseI在高溫下具有較高的穩(wěn)定性,適用于高溫反應(yīng)的實(shí)驗(yàn),如PCR。2.**3'到5'外切酶活性**:這種酶具有3'到5'外切酶活性,能夠切除DNA末端上的非特異性引物和雜交DNA,使其成為等溫?cái)U(kuò)增應(yīng)用的理想酶。3.**耐鹽性**:BstDNAPolymeraseI在高鹽條件下仍能保持穩(wěn)定活性,這在一些特殊的PCR應(yīng)用中非常有用。4.**等溫?cái)U(kuò)增**:由于其3'到5'外切酶活性,BstDNAPolymeraseI用于等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng),如LAMP技術(shù),這種技術(shù)能夠在恒溫下進(jìn)行DNA擴(kuò)增,無(wú)需繁瑣的溫度循環(huán)。5.**快速PCR**:由于其高溫穩(wěn)定性,BstDNAPolymeraseI也可用于快速PCR反應(yīng),縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。6.**高GC含量模板擴(kuò)增**:BstDNAPolymeraseI對(duì)高GC含量模板的擴(kuò)增效果較好,因此在一些難擴(kuò)增的模板中表現(xiàn)出色。Recombinant Human CD52 Protein,hFc Tag隨后,泛素分子從E1轉(zhuǎn)移到泛素結(jié)合酶E2,再通過(guò)泛素連接酶E3的作用,將泛素分子連接到靶蛋白上。

Recombinant Mouse VEGF120,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

T7EndonucleaseI(T7EI)是一種特殊的DNA內(nèi)切酶,具有以下特點(diǎn):1.**識(shí)別錯(cuò)配DNA**:T7EI能夠識(shí)別并切割不完全配對(duì)的DNA、十字型結(jié)構(gòu)DNA、Holliday結(jié)構(gòu)或交叉DNA以及異源雙鏈DNA。2.**切割位點(diǎn)**:T7EI切割錯(cuò)配位點(diǎn)5'端的、第二或第三個(gè)磷酸二酯鍵。3.**靈敏度**:T7EI對(duì)錯(cuò)配DNA的識(shí)別非常靈敏,能夠檢測(cè)并切割單堿基和多堿基的錯(cuò)配。4.**應(yīng)用**:T7EI常用于CRISPR/Cas9等基因編輯技術(shù)導(dǎo)致的基因突變的鑒定。它通過(guò)識(shí)別錯(cuò)配DNA來(lái)幫助鑒定基因編輯是否成功以及是否有非目標(biāo)效應(yīng)。5.**直接電泳檢測(cè)**:T7EI的產(chǎn)物可以直接通過(guò)電泳進(jìn)行檢測(cè),這使得它在實(shí)驗(yàn)操作中更為方便。6.**來(lái)源**:T7EI來(lái)源于大腸桿菌菌株,是一種麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)和T7核酸內(nèi)切酶I(T7EI)的融合蛋白。7.**成本效益**:盡管T7EI在商業(yè)上使用時(shí)成本較高,但它在大規(guī)模樣本測(cè)試中,尤其是在基因突變鑒定方面,提供了一種有效的篩選方法。8.**特殊注意事項(xiàng)**:T7EI能夠識(shí)別長(zhǎng)度大于或等于2bp的插入、缺失或突變導(dǎo)致的錯(cuò)配DNA,但不能識(shí)別1bp的插入、缺失或突變。這些特點(diǎn)使得T7EndonucleaseI成為基因突變鑒定中一個(gè)非常有用的工具,尤其是在CRISPR/Cas9等基因編輯技術(shù)的應(yīng)用中。

BstDNA聚合酶對(duì)dUTP的耐受性對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有以下影響:1.**防止交叉污染**:BstDNA聚合酶具有較高的dUTP耐受性,這意味著它可以在反應(yīng)體系中添加dUTP/UDG酶防污染系統(tǒng)的情況下工作,有效防止LAMP產(chǎn)物的交叉污染,確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。2.**保持靈敏度和擴(kuò)增效率**:即使在引入dUTP/UDG酶防污染系統(tǒng),使用dUTP替換dTTP的情況下,BstDNA聚合酶的靈敏度及擴(kuò)增效率不受影響。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,在反應(yīng)體系中添加dUTP對(duì)BstDNA聚合酶的擴(kuò)增靈敏度和效率沒(méi)有負(fù)面影響。3.**提高實(shí)驗(yàn)的可靠性**:由于BstDNA聚合酶能夠在高濃度的dUTP存在下保持活性,這使得它在進(jìn)行等溫?cái)U(kuò)增時(shí)更加可靠,尤其是在需要防止DNA污染的實(shí)驗(yàn)中。4.**兼容dUTP/UDG系統(tǒng)**:BstDNA聚合酶對(duì)dUTP的耐受性好,高度兼容dUTP/UDG系統(tǒng),這對(duì)于避免交叉污染和提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。綜上所述,BstDNA聚合酶的高dUTP耐受性為等溫?cái)U(kuò)增實(shí)驗(yàn)提供了一個(gè)重要的優(yōu)勢(shì),即在保持高靈敏度和擴(kuò)增效率的同時(shí),能夠有效防止交叉污染,從而提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。UDG在結(jié)構(gòu)上屬于單功能DNA糖基化酶,它通過(guò)沿著DNA鏈滑動(dòng),識(shí)別尿嘧啶分子,進(jìn)行堿基切除。

Recombinant Mouse VEGF120,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

pA-MNase(蛋白A-微球菌核酸酶)在以下實(shí)驗(yàn)中特別有用:1.**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**:這是一種用于研究蛋白質(zhì)-DNA相互作用的技術(shù),pA-MNase在此技術(shù)中用于在免疫沉淀后切割染色質(zhì)DNA,以分析特定蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合位點(diǎn)。2.**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**:這是一種蛋白質(zhì)-基因組互作研究技術(shù),pA-MNase在此技術(shù)中用于在目標(biāo)蛋白質(zhì)被抗體識(shí)別后,通過(guò)核酸酶活性切割附近的DNA,從而釋放與目標(biāo)蛋白質(zhì)相互作用的DNA片段。CUT&RUN技術(shù)相比傳統(tǒng)的ChIP-Seq具有實(shí)驗(yàn)周期短、信噪比高、可重復(fù)性好以及細(xì)胞投入量低的優(yōu)勢(shì),尤其適用于早期胚胎發(fā)育、干細(xì)胞、**以及表觀遺傳學(xué)等研究領(lǐng)域。3.**染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)**:pA-MNase在染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)中用于染色質(zhì)片段化,它在核小體間DNAlinker上進(jìn)行切割保持了核小體的完整性,并且由于其溫和的酶解條件,消除了超聲功率的可變性和超聲過(guò)程中染色質(zhì)乳化所帶來(lái)的負(fù)面影響。4.**去除核酸污染**:pA-MNase也可用于去除細(xì)胞裂解液中的核酸,以減少樣品的粘度,這對(duì)于后續(xù)的蛋白質(zhì)分析實(shí)驗(yàn)尤為重要。

泛素連接酶E3識(shí)別特定的靶蛋白,并促進(jìn)E2上的泛素轉(zhuǎn)移到靶蛋白的賴氨酸殘基上,形成泛素化標(biāo)記。Recombinant Biotinylated Human TLR3 Protein,His-Avi Tag

通過(guò)優(yōu)化crRNA的設(shè)計(jì),可以提高FnCas12a的特異性和靈敏度,例如在microRNA檢測(cè)中 。Recombinant Mouse VEGF120

在PCR實(shí)驗(yàn)中,除了BsuDNAPolymerase,還有幾種聚合酶適合高溫?cái)U(kuò)增,包括:1.**TaqDNAPolymerase**:這是常用的PCR聚合酶,來(lái)源于Thermusaquaticus,能夠在72°C的比較好活性溫度下工作。它具有良好的熱穩(wěn)定性,可以承受PCR的熱變性步驟,且中途不需要再添加酶。2.**PfuDNAPolymerase**:來(lái)源于Pyrococcusfuriosus,具有出色的熱穩(wěn)定性和3'→5'外切酶活性,提供校正功能,適用于對(duì)PCR保真性要求較高的實(shí)驗(yàn),如基因篩選、克隆表達(dá)、突變檢測(cè)、定點(diǎn)突變等。3.**VentDNAPolymerase**:來(lái)源于Litoralis棲熱球菌,具有3'→5'外切酶活性,可以去除錯(cuò)配的堿基,具有校對(duì)功能,保真度比TaqDNAPolymerase高5~15倍。4.**KODDNAPolymerase**:來(lái)自Thermococcuskodakaraensis,具有高保真性和高熱穩(wěn)定性,保真性比PfuDNAPolymerase更高,優(yōu)化后的PCR反應(yīng)緩沖液能使得其擴(kuò)增速度達(dá)到Taq酶的2倍、Pfu酶的5-6倍。5.**BstDNAPolymerase**:來(lái)源于Bacillusstearothermophilus,具有3'到5'外切割活性,適用于等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng),如LAMP技術(shù),可在恒溫下進(jìn)行DNA擴(kuò)增,無(wú)需繁瑣的溫度循環(huán)。Recombinant Mouse VEGF120