ProbeOne-StepqRT-PCRKit是一種一步法反轉(zhuǎn)錄實時熒光定量PCR(qRT-PCR)的預混液,主要用于RNA的特異性超高靈敏度定量檢測。以下是它的一些主要特點:1.一步法操作:該試劑盒整合了反轉(zhuǎn)錄和PCR步驟,簡化了操作流程,減少了操作時間,并限度地減少了人為誤差和污染風險。2.高靈敏度檢測:能夠檢測低至10個拷貝的目標序列,適合于低豐度RNA的檢測。3.多重檢測能力:可以在單個反應孔中進行多重檢測,不同基因?qū)煌结?,不同探針對應不同熒光標記,進行多重熒光定量PCR檢測。4.高特異性:通過使用TaqMan探針,該試劑盒提供了高特異性的檢測,可以區(qū)分有單個核苷酸差異的miRNA。5.熱啟動酶:使用的BeyoFast?TaqDNAPolymerase是一種與抗體結(jié)合的熱啟動酶,有效避免非特異性擴增,提高PCR反應的特異性、靈敏度和定量檢測的準確性。6.兼容多種熒光定量PCR儀:提供了LowROX和HighROX,兼容于無需ROX和需要LowROX或HighROX作為校正染料的熒光定量PCR儀。100 mM dATP溶液以其高純度、濃度、強兼容性和性能,成為分子生物學研究中的重要工具。吉林純化工藝服務技術(shù)服務
除了CRISPR-Cas9技術(shù),還有其他幾種基因編輯技術(shù)可以用于金黃色葡萄球菌的研究:1.單堿基編輯技術(shù):這是一種新型的基因編輯技術(shù),可以在不切割DNA雙鏈的情況下實現(xiàn)基因的定點突變。季泉江教授課題組與中國科學院北京基因組所韓大力研究員課題組合作,在金黃色葡萄球菌中建立了單堿基編輯技術(shù),通過融合失活的Cas9蛋白(Cas9D10A)和胞嘧啶脫氨酶(APOBEC1),實現(xiàn)了高效單堿基編輯,有助于研究耐藥機制和開發(fā)新型手段。2.同源重組(HR)修復技術(shù):在某些細菌中,可以通過同源重組機制對CRISPR-Cas9系統(tǒng)產(chǎn)生的雙鏈DNA斷裂進行修復,實現(xiàn)基因的精確編輯。例如,在谷氨酸棒桿菌中,利用CRISPR/Cas9技術(shù)結(jié)合同源重組修復模板,實現(xiàn)了高效的基因缺失和點突變。3.非同源末端連接(NHEJ)相關(guān)蛋白共表達:通過共表達Cas9蛋白和NHEJ相關(guān)蛋白,如連接酶LigD,可以在鏈霉菌中實現(xiàn)有效的基因組編輯,這種方法不依賴于同源重組,可以應用于那些同源重組效率較低的細菌。4.CRISPR干擾技術(shù)(CRISPRi):利用失活的Cas9蛋白(dCas9)阻斷基因的轉(zhuǎn)錄,從而抑制特定基因的表達。這種技術(shù)可以用于研究基因功能和調(diào)控基因表達,已經(jīng)在多種細菌中得到應用。北京酵母表達高通量篩選技術(shù)服務研發(fā)其中,部分條帶(如1,000 bp或5,000 bp)會加亮顯示,便于快速定位和半定量分析。
高靈敏度與特異性該試劑采用了優(yōu)化的反應緩沖體系和抗體修飾的熱啟動TaqDNA聚合酶,能夠顯著提高擴增效率和特異性。即使在低拷貝數(shù)的模板條件下,也能實現(xiàn)穩(wěn)定檢測,例如某些產(chǎn)品可在3copies/反應的水平下實現(xiàn)穩(wěn)定檢出。此外,該試劑還通過添加抑制非特異性擴增的因子,進一步提升了多重反應的準確性。2.高效的多重檢測能力MultiplexProbeqPCRMix(2×,UDGPlus)支持在同一反應體系中進行多達四重的靶基因檢測。這種多重檢測能力極大地提高了實驗效率,減少了樣本用量和檢測時間,特別適用于需要同時檢測多個基因或病原體的場景。3.強大的防污染系統(tǒng)試劑中包含的dUTP/UDG系統(tǒng)能夠有效防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染,從而避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。UDG酶在室溫下即可發(fā)揮作用,確保實驗數(shù)據(jù)的準確性和可靠性。4.快速擴增與操作簡便該試劑支持快速擴增程序,可在短時間內(nèi)完成qPCR反應,例如某些產(chǎn)品可在35分鐘內(nèi)完成45個循環(huán)。同時,2×預混液的設(shè)計使得實驗操作更加簡便,只需加入模板、引物和探針即可進行反應。泛素連接酶E3識別特定的靶蛋白,并促進E2上的泛素轉(zhuǎn)移到靶蛋白的賴氨酸殘基上,形成泛素化標記。DL50plus
CHO細胞穩(wěn)定表達技術(shù)服務是生物制藥和生物技術(shù)領(lǐng)域中的一項重要技術(shù),尤其在生產(chǎn)重組蛋白和抗體藥物方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。以下是一些關(guān)于CHO細胞穩(wěn)定表達技術(shù)服務的關(guān)鍵點:1.細胞特性:CHO(ChineseHamsterOvary,中國倉鼠卵巢)細胞由于其遺傳背景清晰、內(nèi)源蛋白分泌少,有利于外源蛋白的分離純化,并且可以在優(yōu)化條件下進行大規(guī)模培養(yǎng)。2.服務內(nèi)容:提供從序列優(yōu)化、載體構(gòu)建、細胞株構(gòu)建,到細胞株優(yōu)化及質(zhì)控檢測的全套服務,包括雙特異性抗體、單抗等CHO細胞株開發(fā)服務,以及蛋白酶、細胞因子等的表達服務。3.技術(shù)優(yōu)勢:服務特色包括穩(wěn)定性良好、高產(chǎn)量、高質(zhì)量、快速的篩選高產(chǎn)細胞株周期(12-16周),以及符合cGMP規(guī)范的合規(guī)性。4.表達載體構(gòu)建:提供可選表達載體,如pAZ-V5系列載體(分泌型、可選His-tag),以及其他商業(yè)化載體,配合不同表達宿主如HEK293系列細胞和CHO系列細胞。5.瞬時轉(zhuǎn)染小試:進行細胞瞬時轉(zhuǎn)染和表達小試,通過WB(WesternBlot)進行表達分析鑒定。6.表達及純化:提供擴大培養(yǎng)、Ni柱親和純化以及重組蛋白鑒定檢測等服務,確保蛋白樣品的質(zhì)量。該產(chǎn)品具有條帶清晰、亮度均勻的特點,即使在反復凍融后仍能保持良好的穩(wěn)定性。
TthDNAPolymerase的熱穩(wěn)定性TthDNAPolymerase具有出色的熱穩(wěn)定性,能在高溫環(huán)境下維持活性。在PCR反應中,面對反復的高溫變性步驟,其結(jié)構(gòu)依然穩(wěn)固,酶活性不易受影響。例如在95℃左右的高溫下長時間孵育,依然能夠有效地催化DNA鏈的合成,保證PCR擴增的順利進行,這使得它在需要高溫條件的核酸擴增實驗中表現(xiàn)好,為復雜基因組的研究和檢測提供了可靠的酶工具,提高了實驗結(jié)果的準確性和重復性。TthDNAPolymerase的逆轉(zhuǎn)錄活性該酶具備獨特的逆轉(zhuǎn)錄活性,除了DNA聚合功能外,還能以RNA為模板合成cDNA。在RT-PCR實驗中,它可以一步完成逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴增過程,簡化了實驗步驟,減少了樣本損失和污染的風險。像在檢測病毒RNA時,TthDNAPolymerase能夠精細地將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA并進行擴增,提高了檢測的靈敏度和效率,為RNA相關(guān)的分子生物學研究和臨床診斷開辟了便捷的途徑。Cre重組酶能夠高效地介導DNA重組過程,不受切除片段長短及位置的影響。它可以在動物體內(nèi)實現(xiàn)基因重組.河北九價HPV病毒樣顆粒表達服務技術(shù)服務開發(fā)
Phusion DNA Polymerase具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性,能夠糾正擴增過程中的錯誤摻入.吉林純化工藝服務技術(shù)服務
Tris-乙酸電泳粉劑(50×TAE):高效、經(jīng)濟的DNA電泳緩沖液在分子生物學實驗中,瓊脂糖凝膠電泳是分析DNA片段大小和純度的關(guān)鍵技術(shù)之一。Tris-乙酸電泳粉劑(50×TAE)作為一種高效、經(jīng)濟的緩沖液原料,因其出色的性能和便捷性,成為實驗室中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點與優(yōu)勢Tris-乙酸電泳粉劑(50×TAE)是一種高濃度的緩沖液原料,主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、乙酸和EDTA(乙二胺四乙酸)。這種配方能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保DNA片段的清晰分離。高效分離:TAE緩沖液具有較低的離子強度,適合分離大分子量的DNA片段。它能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的電流,確保DNA條帶清晰、分辨率高。經(jīng)濟實用:50×的高濃度設(shè)計使得該粉劑在使用時可以根據(jù)實驗需求靈活稀釋,減少浪費,降低實驗成本。穩(wěn)定性高:粉劑形式的TAE在干燥條件下非常穩(wěn)定,不易受環(huán)境因素影響,適合長期儲存。兼容性強:適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView),滿足不同實驗需求。使用方法使用Tris-乙酸電泳粉劑(50×TAE)時,需按照以下步驟操作:稱量粉劑:根據(jù)實驗需求,準確稱取適量的Tris-乙酸電泳粉劑。吉林純化工藝服務技術(shù)服務