PCR(PolymeraseChainReaction)是一種復(fù)制核酸片段并提高DNA產(chǎn)量的技術(shù),即所謂的聚合酶鏈式反應(yīng),這種技術(shù)可以在數(shù)小時內(nèi)大量復(fù)制特定的基因片段。由于其高敏感性和高特異性的特點,PCR技術(shù)被應(yīng)用在寵物疾病分子的診斷上,將從疑似患病寵物(血液、眼鼻分泌物、糞便,尿液或腹水)中采樣的極微量病原(細菌、病毒或寄生蟲)特定核酸片段樣本,透過PCR的方式大量被復(fù)制,再以核酸電泳的方式判讀結(jié)果,從而獲得早期、快速、穩(wěn)定和準確的診斷結(jié)果.在寵物醫(yī)療中,目前病毒檢測主要包括膠體金檢測(試紙)和PCR檢測。蘇州寵物PCR技術(shù)在動物疫病檢測的應(yīng)用
巧亦捷核酸檢測一體機有以下幾點優(yōu)勢:1:全自動核酸提取:<1分鐘的手工操作時間:巧亦捷核酸一體機內(nèi)部可自動進行封閉式核酸提取,使得整體手工操作時間小于1分鐘,較為小化人為干預(yù)帶來的操作誤差,是市面上自動化程度比較高的多重病原體解決方案。2、準確、靈敏的創(chuàng)新核酸檢測針對不同的樣本,可以準確地實現(xiàn)從樣本到結(jié)果的判讀,可以處理全血、血清、血漿、糞便、體液、分泌物等各種樣本,實現(xiàn)醫(yī)學界公認的高特異性、高敏感性核酸檢測3、一份樣本多重檢測基于實時熒光定量PCR技術(shù)的多種綜合癥檢測系統(tǒng),一份樣本較為多可以同時檢測多種病原體,這一特性賦予該系統(tǒng)優(yōu)越多樣性的檢測和應(yīng)用,也便于快速進行多種疾病的同時檢測和管理蘇州便攜式PCR檢測方法巧亦捷核酸檢測一體機的靈敏性和特異性上的優(yōu)勢,像犬貓的呼吸道、消化道和貧血等疾病的診斷和鑒別診斷。
目前市面上有很多PCR儀器,一時間讓獸醫(yī)師無從選擇,但大多數(shù)都是PCR擴增儀,即需要人工進行核酸提取和純化。他們都有以下痛點:1、核酸提取和純化的操作麻煩并且需要專業(yè)的技術(shù)人員和場地,有些還需要配置高速離心機,人工核酸提取需要30~40分鐘并容易導(dǎo)致污染。2、人工反復(fù)開蓋加入或倒出試劑,容易導(dǎo)致人為和氣溶膠污染,導(dǎo)致結(jié)果不準確。因此針對寵物醫(yī)院來說,需要一臺集核酸提取、純化和擴增為一體的全自動核酸檢測儀。能更好的控制人工成本及試劑成本。
巧亦捷(ingeNova)是翊新診斷技術(shù)(蘇州)有限公司旗下專注于動物體外診斷檢測的產(chǎn)品品牌,以翊新診斷全資子公司——蘇州翊創(chuàng)生物科技有限公司為主體。巧亦捷系列產(chǎn)品覆蓋了貓呼吸道疫病檢測、貓消化道疫病檢測、犬消化道疫病檢測、寄生蟲等寵物核酸檢測,非洲豬瘟、藍耳等豬病核酸檢測,牛逼支、牛腹瀉等牛羊類食品動物的核酸檢測,人畜共患病核酸檢測,以及魚蝦等水生動物的核酸檢測。全自動薄膜微流控核酸檢測一體機是巧亦捷系列產(chǎn)品的主打檢測平臺,巧亦捷基于此平臺技術(shù)致力于為客戶提供快速、精確的動物疫病診斷整體解決方案。翊新診斷技術(shù)(蘇州)有限公司由微流控技術(shù)領(lǐng)域國際**周朋博士創(chuàng)立。公司依托先進的薄膜微流控技術(shù)開發(fā)一體化、智能化的快速、便捷的POCT體外分子診斷解決方案。針對動物疫病的早期診斷,公司以市場需求為出發(fā)點,開發(fā)出了低成本、無污染、能夠?qū)崿F(xiàn)真正意義上“全自動,全封閉,樣本進,結(jié)果出”的薄膜微流控芯片技術(shù)和可以用于動物疫病現(xiàn)場快速診斷的分子檢測系統(tǒng),從而為動物疫病的現(xiàn)場診斷提供更加便利的檢測手段。目前已開發(fā)非洲豬瘟檢測、寵物呼吸道多聯(lián)檢測、寵物消化道多聯(lián)檢測等多種試劑及檢測方案。許多寵物醫(yī)生表示自己在工作中已經(jīng)離不開PCR儀的幫助了。
巧亦捷核酸一體機采用的TaqMan探針法介紹:TaqMan探針法是具有高度特異性的定量PCR技術(shù)。它的工作原理是在PCR反應(yīng)體系中存在一對PCR引物和一條探針,探針的5′端標記有報告基團,3′端標記有熒光淬滅基團,探針只與模板特異結(jié)合,其結(jié)合位點在兩條引物之間。當探針完整的時候,報告基團的熒光能量被淬滅基團吸收,所以儀器搜集不到信號,隨著反應(yīng)的進展,Taq酶遇到探針,利用3′→5′外切核酸酶的活性把探針切斷,導(dǎo)致報告基團的熒光能量不能被淬滅基團吸收,產(chǎn)生了熒光信號,因此信號的強度就代、表了模板DNA的拷貝數(shù)。巧亦捷核酸一體機配套檢測試劑覆蓋動物診療中常見的犬、貓、豬、牛、水產(chǎn)等病原體核酸檢測。蘇州便攜式PCR檢測方法
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PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)的作用下,由一對特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應(yīng),三個不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴增到多量的一種體外DNA擴增技術(shù)。在反應(yīng)體系內(nèi),以一對人工合成的寡核苷酸作為擴增引物,第一步,模板DNA變性,以構(gòu)成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,目的基因作為模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過80-90℃高溫變性,使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步,模板DNA與引物退火(復(fù)性),模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,引物與模板DNA單鏈互補配對。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP為反應(yīng)原料半保留復(fù)制合成一條新的模板DNA鏈。這三個步驟為一個循環(huán),2-4分鐘即可完成一個循環(huán),2-3小時就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復(fù)制到幾百萬倍,從而實現(xiàn)對靶DNA的放大。由于擴增堿基序列按照靶DNA復(fù)制,因此PCR反應(yīng)具有高度特異性。蘇州寵物PCR技術(shù)在動物疫病檢測的應(yīng)用
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