間充質(zhì)間質(zhì)細胞(MSCs)體外擴增的培養(yǎng)基一般添加胎牛血清FBS,但是考慮到異種傳染及免疫反應(yīng)的風(fēng)險,監(jiān)管機構(gòu)并不鼓勵使用。人血小板裂解液除了不存在異種免疫反應(yīng)或牛病原體傳染的風(fēng)險,有助于增強間充質(zhì)干細胞的擴增,也相對容易地根據(jù)良好的生產(chǎn)規(guī)范程序生產(chǎn),并已用于臨床應(yīng)用,因此現(xiàn)如很多資料顯示血小板裂解液已被證明是擴增MSCs一種非常有效的FBS替代方法(參考文獻1)。 血小板裂解液由血漿組成,含有纖維蛋白原和凝血因子,對于一般細胞培養(yǎng)中涉及的含鈣培養(yǎng)基來說通常需要加入抗凝劑(常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等)來防止凝膠形成,其中肝素較為常用。
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本研究中使用的HPL是Stemulate公司兩款人源血小板裂解液(NH和H)是在工業(yè)規(guī)模(很小批量為20L)生產(chǎn)的,具備高度的批間一致性。將脂肪來源的間充質(zhì)干細胞在DME/F-12中添加10%Stemulate-NH或10%FBS進行傳代培養(yǎng)11代。在DME/F-12中分別添加5、7.5或10%Stemulate-NH,并與10%胎牛血清進行比較。羊膜來源間充質(zhì)干細胞也在2.5或5%Stemulate中培養(yǎng),與10%胎牛血清相比。牙髓來源的骨髓間充質(zhì)干細胞在DME/F-12中添加不同濃度的Stemulate-NH或Stemulate-H,并與添加10%FBS的培養(yǎng)基進行比較。在所有實驗中,每天都監(jiān)測細胞,每次傳代結(jié)束時,收獲細胞,并使用臺盼藍和一個自動細胞計數(shù)器計數(shù)然后繼續(xù)傳代。更多關(guān)于血小板裂解液的相關(guān)信息,歡迎咨詢上海曼博生物!進口血小板裂解液使用注意事項哪家公司有血小板裂解液?
細胞培養(yǎng)基制備1.比較好在4°C下解凍ELAREMPrime血小板裂解液過夜或在37°C水浴中解凍1小時。2.通過將10%ELAREMPrime血小板裂解液添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基(即MEMα、GlutaMAX補充劑、無核苷)和1%的青霉素/鏈霉素作為**終濃度來制備完整的細胞培養(yǎng)基。3.應(yīng)在完全細胞培養(yǎng)基中加入肝素以抗凝。我們建議添加肝素的**終濃度為2IU/mLPLSUPPLEMENT(貨號PL-SUP-500)or0.024mg/mLPLSUPPLEMENT-XF(貨號PL-SUP-500-XF).4.完整細胞培養(yǎng)基可在4°C下儲存,并穩(wěn)定約4周儲存和穩(wěn)定性ELAREMPrime在標簽上注明的失效日期之前是穩(wěn)定的。ELAREMPrime在使用前在-20°C(或在-80°C進行長期儲存)冷凍儲存時穩(wěn)定。解凍后,建議將未使用的ELAREMPrime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍。應(yīng)避免ELAREMPrime的重復(fù)凍融循環(huán),因為這會導(dǎo)不溶性顆粒形成的增加。使用時,只需預(yù)熱一份完整的細胞培養(yǎng)基,并將剩余的培養(yǎng)基冷藏在4-8°C。 更多關(guān)于人血小板裂解液的相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!
ELAREMPrime人血小板裂解液是面向未來需求的先進的細胞培養(yǎng)解決方案?;谌搜“宓慕?jīng)濟實惠的細胞生長促進劑可實現(xiàn)從動物血清添加劑到無異種細胞培養(yǎng)條件的簡單轉(zhuǎn)換。每批ELAREMPrime均由大量血小板單位生產(chǎn),以比較大限度地減少批次間的差異。ELAREMPrime支持細胞擴增,無需批間測試即可提供一致的試驗結(jié)果。ELAREMPrime只供體外實驗和研究使用(RUO),該產(chǎn)品不適合直接用于人類或動物用途。有關(guān)安全預(yù)防措施,請參閱相應(yīng)的SDS。推薦用于與FBS相比,ELAREMPrime人血小板裂解液支持間充質(zhì)干細胞(MSC)的細胞生長性能,而不會丟失表型。非靈長類細胞系的體外繁殖和維持需要根據(jù)具體情況進行測試和優(yōu)化。
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在解凍的ELAREMPrime血小板裂解液中可能會形成不溶性顆粒。顆粒形成不會影響細胞培養(yǎng)性能。如果完全細胞培養(yǎng)基中出現(xiàn)凝結(jié)或不溶性顆粒,建議在ELAREMPrime血小板裂解液在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中稀釋后使用0.22μm過濾器過濾完全培養(yǎng)基。過濾不會影響細胞生長性能(經(jīng)過MSC測試)。但是,不建議對100%濃縮的ELAREMPrime血小板裂解液進行過濾。避免多次凍融循環(huán)ELAREMPrime血小板裂解液,可以很大限度地減少微粒的形成。無菌性ELAREMPrime血小板裂解液經(jīng)過無菌處理。微生物培養(yǎng)測試為陰性。質(zhì)量控制測試在經(jīng)過認證的測試實驗室進行。更多關(guān)于人血小板裂解液的相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!哪家公司可以進口血小板裂解液?國產(chǎn)血小板裂解液來源
血小板裂解液里面的沉淀對細胞有影響嗎?賽多利斯血小板裂解液等級
細胞培養(yǎng)基制備:1.比較好在4°C下解凍ELAREMPrime血小板裂解液過夜或在37°C水浴中解凍1小時。2.通過將10%ELAREMPrime血小板裂解液添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基(即MEMα、GlutaMAX補充劑、無核苷)和1%的青霉素/鏈霉素作為**終濃度來制備完整的細胞培養(yǎng)基。3.應(yīng)在完全細胞培養(yǎng)基中加入肝素以抗凝。我們建議添加肝素的**終濃度為2IU/mLPLSUPPLEMENT(貨號PL-SUP-500)or0.024mg/mLPLSUPPLEMENT-XF(貨號PL-SUP-500-XF).4.完整細胞培養(yǎng)基可在4°C下儲存,并穩(wěn)定約4周儲存和穩(wěn)定性ELAREMPrime在標簽上注明的失效日期之前是穩(wěn)定的。ELAREMPrime在使用前在-20°C(或在-80°C進行長期儲存)冷凍儲存時穩(wěn)定。解凍后,建議將未使用的ELAREMPrime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍。應(yīng)避免ELAREMPrime的重復(fù)凍融循環(huán),因為這會導(dǎo)不溶性顆粒形成的增加。使用時,只需預(yù)熱一份完整的細胞培養(yǎng)基,并將剩余的培養(yǎng)基冷藏在4-8°C。
Sexton的血小板裂解液的血小板來源于美國FDA注冊、AABB認證的美國血庫。單位必須在過期前接受異體輸血。血小板捐獻者接受捐贈前進行徹底篩查和檢測,以降低輸血傳播ganran的風(fēng)險,根據(jù)21CFR610和AABB血庫和輸血服務(wù)標準。 賽多利斯血小板裂解液等級