接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細(xì)胞濃度，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿，每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請(qǐng)勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí)，請(qǐng)用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí)，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。關(guān)于轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！如想申請(qǐng)PEI試用裝，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！哪個(gè)品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價(jià)比更高？四川液體PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級(jí)的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉(zhuǎn)染試劑）溶液，由PEI MAX配置而成，采用0.1um PES無菌過濾器，完全消除支原體污染風(fēng)險(xiǎn)。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物，這些復(fù)合物很容易通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞，并且Transporter 5-DNA 復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用，有效提高轉(zhuǎn)染效率。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究，可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲（SF9、SF21） 等真核細(xì)胞系，可作用于大到135,000個(gè)核苷酸的質(zhì)粒，所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染。 Transporter 5可節(jié)省試劑準(zhǔn)備時(shí)間，加快項(xiàng)目進(jìn)度。經(jīng)過嚴(yán)格的性能檢測(cè)，確保品質(zhì)，在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復(fù)性好、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑。產(chǎn)品特點(diǎn)：非GMP，研究級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑溶液；高轉(zhuǎn)染效率；無縫過渡到MAXgene GMP；易放大，可預(yù)測(cè)產(chǎn)量；用于工藝開發(fā)，臨床前和早期臨床研究。如想申請(qǐng)PEI試用裝，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！進(jìn)口PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝可用于臨床申報(bào)哪里有賣GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑？

PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)勢(shì)：高質(zhì)量的R&D和cGMP等級(jí)產(chǎn)品l高轉(zhuǎn)染效率，低細(xì)胞毒性；MAXgene符合cGMP標(biāo)準(zhǔn)和ISO13485質(zhì)量管理體系；經(jīng)過驗(yàn)證的生產(chǎn)工藝；全合成，無動(dòng)物源成分；高性價(jià)比，適用于從早期研發(fā)到臨床及商業(yè)化生產(chǎn)的各個(gè)階段l嚴(yán)格控制批間穩(wěn)定性；國內(nèi)外已有多個(gè)項(xiàng)目進(jìn)入臨床階段l具備殘留檢測(cè)方法。PEI MAX 是一款高度濃縮的粉劑，大量科學(xué)家選擇PEI MAX ，在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來，經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評(píng)審的公開研究和出版文獻(xiàn)表明，在HEK293、CHO 和 Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率，在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高，可靠性強(qiáng)。PEI MAX是一種非GMP等級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑，適用于基礎(chǔ)科學(xué)研究及藥物研發(fā)早期階段。如想申請(qǐng)PEI試用裝，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！

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PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗(yàn)。當(dāng)初試驗(yàn)經(jīng)費(fèi)很有限，被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000，選擇PEI，以至于相當(dāng)長的時(shí)間內(nèi)，轉(zhuǎn)染試驗(yàn)都不順利。下面是幾點(diǎn)關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點(diǎn)：1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書，所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時(shí)，一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中，順序不可錯(cuò)，輕微混勻，靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時(shí)，一定要換液！換含有FBS的完全培養(yǎng)液！因?yàn)镻EI對(duì)細(xì)胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗(yàn)涉及到穩(wěn)定篩選，建議把血清濃度適當(dāng)提高。PS：事實(shí)證明，PEI是可行的，已經(jīng)做出穩(wěn)定細(xì)胞系了。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的信息，可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司！?如想申請(qǐng)PEI試用裝，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！?PEI轉(zhuǎn)染試劑可以轉(zhuǎn)染哪些細(xì)胞？液體PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝適用于Hela細(xì)胞轉(zhuǎn)染

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