德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導難轉(zhuǎn)的哺乳動物和嚙齒動物細胞的效率。LentiBOOST 是一種無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑,用于臨床前和臨床應用。作為一種普遍作用的(受體非依賴型)佐劑,可應用于多種臨床相關細胞類型,CD34+造血干細胞(HSCs)、原代 T 細胞和 NK 細胞等,對難轉(zhuǎn)導的小鼠 T 細胞亦有效。LentiBOOST 已成為改進體外 (ex vivo) 基因zhi liao和 CAR-T 細胞zhi liao的臨床轉(zhuǎn)導方案的選擇。近幾年LentiBOOST作為一種無毒性的化學轉(zhuǎn)導增強劑guang fan引起關注。LentiBOOST通過與細胞膜相互作用降低膜黏稠度,提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運,提高轉(zhuǎn)導效率。研究證實LentiBOOST在不影響轉(zhuǎn)導細胞存活、增殖及分化能力的前提下,提高小鼠T細胞、HSCs和人HSCs的慢病毒轉(zhuǎn)導效率。
為提供更好的服務,上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國區(qū)域LentiBOOST產(chǎn)品業(yè)務的Exclusive Distributor,LentiBOOST在中國市場的營銷和技術支持工作仍將由上海曼博生物負責。 什么試劑可以增強慢病毒轉(zhuǎn)導的效率呢?快速慢病毒轉(zhuǎn)導
研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導效率,且對細胞活力或干細胞特性沒有劑量依賴性的不良影響。這種轉(zhuǎn)導增強劑的組合dai biao了一種有價值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應用中 MSCs 慢病毒轉(zhuǎn)導效率的潛力。細胞狀態(tài)對于慢病毒轉(zhuǎn)導效率也具有很大的影響,良好的生長狀態(tài)是達到高gan ran效率的保證,一般選擇細胞形態(tài)較好、輪廓清晰、處于對數(shù)生長期的細胞進行gan ran可提高gan ran效率。更多關于慢病毒轉(zhuǎn)導相關問題,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號查看更多技術文章:Mine-bioMerck慢病毒轉(zhuǎn)導實驗什么是慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑呢?
First代慢病毒載體以Naldini以及Kafri[2]構(gòu)建的三質(zhì)粒系統(tǒng)為dai biao。該載體系統(tǒng)由包裝質(zhì)粒、包膜質(zhì)粒及載體質(zhì)粒3種質(zhì)粒組成。二代慢病毒載體系統(tǒng)是在di yi代基礎上改進的,在包裝質(zhì)粒中刪去了HIV的所有附屬基因vif、vpu、vpr和nef,以減少產(chǎn)生RCR的風險。這些附屬基因的去除并不影響病毒的滴度和轉(zhuǎn)染能力,同時增加了載體的安全性。第三代慢病毒載體系統(tǒng)又增加了兩個安全特性:一是構(gòu)建了自身失活的慢病毒載體,即刪除了U3區(qū)的3’ LTR,使載體失去HIV-1增強子及啟動子序列,即使存在所有的病毒蛋白也不能轉(zhuǎn)錄出RNA;二是去除了tat基因,代之以異源啟動子序列,這樣原始的HIV基因組中的9個基因在慢病毒載體中只保留了3個(gag、pol和rev) ,因此第三代慢病毒載體系統(tǒng)更加安全。與第三代系統(tǒng)相比,第二代慢病毒系統(tǒng)使用更多的HIV蛋白(在較少的質(zhì)粒上)以產(chǎn)生功能性慢病毒顆粒。
德國SirionBiotech公司研發(fā)了LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導難轉(zhuǎn)的哺乳動物和嚙齒動物細胞的效率。LentiBOOST是一種無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑,用于臨床前和臨床應用。作為一種普遍作用的(受體非依賴型)佐劑,可應用于多種臨床相關細胞類型,CD34+造血干細胞(HSCs)、原代T細胞和NK細胞等,對難轉(zhuǎn)導的小鼠T細胞亦有效。LentiBOOST已成為改進體外(exvivo)基因zhi liao和CAR-T細胞zhi liao的臨床轉(zhuǎn)導方案的選擇。SIRIONBiotech的首席執(zhí)行官ChristianThirion博士說,SIRION的貢獻是優(yōu)化病毒載體基因的轉(zhuǎn)導,從而在zhi liao患者中獲得更高的轉(zhuǎn)導效率和長期的基因表達。此外,通過降低生產(chǎn)細胞產(chǎn)品所需的慢病毒載體的數(shù)量,使用諸如LentiBOOST之類的轉(zhuǎn)導增強劑有助于降低生產(chǎn)成本。更多關于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導的相關產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!為提供更好的服務,上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國區(qū)域LentiBOOST產(chǎn)品業(yè)務的Exclusive Distributor,LentiBOOST在中國市場的營銷和技術支持工作仍將由上海曼博生物負責。慢病毒轉(zhuǎn)染可以使用哪些試劑呢?
在病毒附著到宿主細胞后,病毒RNA滲透進宿主細胞,并以此為模板,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成病毒cDNA,在逆轉(zhuǎn)錄和合成雙鏈DNA的過程中,RNA的兩端都進行了復制,產(chǎn)生了長末端重復序列(LTRs),在雙鏈的病毒DNA中,每條鏈含有U3-R-U5序列,然后雙鏈DNA被運送到細胞核內(nèi)。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱為原病毒。德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導難轉(zhuǎn)的哺乳動物和嚙齒動物細胞的效率。LentiBOOST 是一種無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑,用于臨床前和臨床應用。為提供更好的服務,上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國區(qū)域LentiBOOST產(chǎn)品業(yè)務的Exclusive Distributor,LentiBOOST在中國市場的營銷和技術支持工作仍將由上海曼博生物負責。用什么試劑可以做慢病毒轉(zhuǎn)染么?lentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導工藝
什么增強慢病毒轉(zhuǎn)導的效率?快速慢病毒轉(zhuǎn)導
為了達到研究目的,在轉(zhuǎn)導過程中加入轉(zhuǎn)導增強劑也能有效提高轉(zhuǎn)導效率。目前根據(jù)轉(zhuǎn)導增強劑的作用機制可分為兩大類:入胞增強子和入胞后增強子。入胞增強子作用于病毒的附著或進入過程,通過在物理上增加病毒載體顆粒和靶細胞之間的共定位或降低它們之間的排斥力發(fā)揮作用。而入胞后增強子是在病毒進入細胞后發(fā)揮作用,降低細胞質(zhì)中運輸阻礙,Zui終獲得更高的轉(zhuǎn)導細胞比例并提高細胞內(nèi)VCN?;騴hi liao的臨床效果取決于細胞的高水平轉(zhuǎn)導,雖可通過二次轉(zhuǎn)導或提高gan ran復數(shù)(multiplicityofinfection,MOI)增加轉(zhuǎn)導率,但延長體外培養(yǎng)時間可誘導干細胞進入細胞周期而影響其分化增殖能力;提高gan ran復數(shù)會提高插入突變風險和增加生產(chǎn)成本??焖俾《巨D(zhuǎn)導