建立一種理想的腰椎間盤突出的動物模型對本病的機制研究和臨床防治具有重要意義。現(xiàn)有模型對腰椎間盤突出癥的模擬均存在明顯不足，或與臨床實際病變部位有一定差距，如慢性坐骨神經(jīng)結(jié)扎模型；或操作難度大，對動物損傷重，如自體髓核移植模型，選擇性神經(jīng)根結(jié)扎模型。因此，急需一種新的操作簡單，重復率高，穩(wěn)定且能準確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動物模型。技術(shù)實現(xiàn)要素：為了建立一種操作簡單，穩(wěn)定好且能準確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動物模型，本發(fā)明提供了一種大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型的制備方法。其包括以下步驟：步驟一、麻醉大鼠；步驟二、于大鼠腰4到骶1水平左側(cè)或右側(cè)作縱行切口，切開皮膚，鈍性分離椎旁肌，暴露腰4椎間孔和腰5椎間孔；步驟三、將壓迫元件插入到左側(cè)或右側(cè)腰4椎間孔及腰5椎間孔中，得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。其中，步驟一具體為：腹腔注射1％戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠后，將大鼠背部剃毛，碘伏消毒背部皮膚，俯臥位固定于動物手術(shù)臺上，鋪無菌巾。在一個具體實施方式中，壓迫元件為l型棒；步驟三具體為：將2根l型棒的***端分別插入到左側(cè)或右側(cè)腰4椎間孔及腰5椎間孔中，l型棒的第二端置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。很多自發(fā)性動物模型在研究人類疾病時具有重要的價值。品質(zhì)好的疾病動物模型建模供應商

1、動物模型名稱：堿燒傷致角膜損傷大鼠模型2、實驗動物種屬：SD大鼠3、實驗動物性別：雌雄不限4、實驗動物年齡：成年5、實驗動物體重：160-200g6、實驗動物環(huán)境：SPF級，1、實驗方法：氫氧化鈉致大鼠角膜化學性損傷。大鼠用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，用干棉棒拭去結(jié)膜囊多余液體，將統(tǒng)一規(guī)格直徑3mm的圓形濾紙片浸入1mol/LNaOH溶液中20s，飽和后取出置于干燥濾紙上1秒以吸去過多的堿液，將濾紙片貼敷于大鼠右眼角膜**90s后移去，立即用滅菌水沖洗結(jié)膜囊及角膜2min。2、檢測標準：肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。C57小鼠疾病動物模型建模評價疾病動物模型建模好做嗎？

    步驟3、pmsg處理c57bl/6雌性小鼠(6周齡，平均體重20g)，46h后注射hcg，與雄性小鼠合籠交配，次日取受精卵進行顯微注射，將步驟1的grna1、grna2、cas9蛋白以及線性化后的打靶載體一起注射到受精卵中，取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠體內(nèi)，產(chǎn)出小鼠，即f0代小鼠。上述步驟中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2～10pmol/ul，cas9蛋白的注射濃度為30～100ng/μl，cas9蛋白購自newenglandbiolabs，貨號為m0386m。步驟4、提取f0代小鼠尾部dna，pcr擴增產(chǎn)物測序，鑒定是否為嵌合體。本發(fā)明用于f0代小鼠pirb基因pcr鑒定的特異性引物如下：pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1對應的擴增產(chǎn)物大小為，primers2對應的擴增產(chǎn)物為。用于f0代小鼠測序的引物如下：sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。

誘發(fā)性**模型的原理是利用外源性致*因素引起細胞遺傳特性異常而呈現(xiàn)出異常生長和高增殖活性，形成**。致*因素主要有化學性、物理性及生物性致*物，而化學性致*物(chemicalcarcinogens)**常見，已確知的多達一千余種，用于誘發(fā)實驗性**的種類亦很多，如苯并薩，申基膽菌、聯(lián)苯胺、亞硝胺類、黃曲霉***類。各種致癢物的致*強度、致*譜等特性相差較大，同一種致*物經(jīng)不同途徑給藥所致**部位或類型可有很大差異。有些化學性致*物具有明顯的親***或組織特性。因此，實驗工作中應根據(jù)需要選用適當致*物和致*途徑，并確定其他影響因素或?qū)嶒灄l件?；驹?利用外源性致*物引起細胞遺傳特性改變，從而出現(xiàn)異常生長和高增殖活性細胞形成**。外源性致*物主要有化學性、物理性(如放射性物質(zhì))及生物性(如誘發(fā)動物**的病毒),其中以化學性致*物**為常用上海東寰提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。

人類疾病的動物模型是指各種醫(yī)學科學研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物，動物疾病模型廣泛應用于疾病機制研究、新藥靶點發(fā)現(xiàn)及篩選、藥效評價、轉(zhuǎn)化醫(yī)學等醫(yī)學前沿領(lǐng)域。動物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面。(一)避免了在人身上進行實驗所帶來的風險(二)臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復制出來(三)可以克服人類某些疾病潛伏期長，病程長和發(fā)病率低的缺點(四)可以嚴格控制實驗條件，增強實驗材料的可比性(五)可以簡化實驗操作和樣品收集(六)有助于更***地認識疾病的本質(zhì)早期階段科學假說與疾病潛在藥物治療效果評價始于小鼠疾病模型構(gòu)建及其實驗室研究。奉賢區(qū)阿爾茲海默癥疾病動物模型建模

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    PMID：15082495、7561688)①HE染色②關(guān)節(jié)側(cè)視圖③PCR鑒定、二、糖尿病相關(guān)動物模型1.糖尿病***1）模型構(gòu)建（PMID：30826357）使用鏈佐星（STZ）注射ApoE-/-小鼠，建立糖尿病ApoE-/-小鼠模型，同時與ApoE-/-小鼠采用高脂喂養(yǎng)18周2）模型檢測指標（PMID：29107826、28345659）3）生化指標檢測4）超聲檢測5）主動脈染色檢測2.糖尿病心肌病1）誘發(fā)性DCM模型模型構(gòu)建（PMID：29732743）實驗動物：大鼠方法：各大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素150mg·kg-1(STZ用mol·L-1，pH，現(xiàn)配現(xiàn)用)，并給予高脂飼料進行喂養(yǎng)。①模型檢測指標血糖檢測②HE染色③超聲心電圖2）自發(fā)性1型DCM模型3）自發(fā)性2型DCM模型3.糖尿病視網(wǎng)膜病變1）模型構(gòu)建PMID：30862093實驗動物：小鼠方法：糖尿病雄性db/db（+/+Leprdb/J）小鼠。喂養(yǎng)至21周2）模型檢測指標①膠質(zhì)原纖維酸性蛋白染色②TUNEL和HE染色DR組視網(wǎng)膜組織內(nèi)核層及外核層結(jié)構(gòu)松散，細胞排列紊亂GCL，神經(jīng)節(jié)細胞層;INL，內(nèi)核層;ONL，外核層三、動物模型構(gòu)建總結(jié)1.臨床資料合理性在納入臨床資料時，需關(guān)注特定疾病患者的流行病學趨勢，即疾病易發(fā)年齡，男女比例等，同時需考慮是否與體重、基因表達等具有相關(guān)性。2.模型合理性選擇合適，簡便。品質(zhì)好的疾病動物模型建模供應商

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