配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實施例3建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液25ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成4mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實施例4:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中。歡迎致電咨詢疾病動物模型建模。嘉定區(qū)泌尿疾病動物模型建模
空白組卵巢內(nèi)細(xì)胞形態(tài)完整,可見各級卵泡生長活躍,并大多數(shù)為原始卵泡,卵泡顆粒層較多,黃體發(fā)育好。4mg、6mg組(***、八天給藥)有炎性細(xì)胞浸潤,各級卵泡減少,閉鎖卵泡增加。2mg組(連續(xù)給藥7天)可見很少次各級卵泡,及成熟卵泡,大多數(shù)為閉鎖卵泡,卵泡顆粒層變薄,黃體明顯減少。結(jié)論:使用%氯化鈉溶液及10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥)配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天,造模效果比較好。根據(jù)實驗結(jié)果得出:本發(fā)明可對比不同劑量順鉑、不同給藥時間的卵巢早衰造模方法,從而有效的確定大鼠卵巢模型建立方案。給本領(lǐng)域技術(shù)人員提供上述實施例,以完全公開和描述如何實施和使用所主張的實施方案,而不是用于限制本文公開的范圍。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言顯而易見的修飾將在所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)。宿遷Balbc裸鼠疾病動物模型建模確定研究疾病目的了解影響疾病發(fā)生的內(nèi)在與外在因素。
pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠,pirb基因敲入到特異性組織或細(xì)胞中。其中pirb-cwt小鼠表達(dá)cre,但不含有l(wèi)oxp-pirb等位基因,pirb-chetandpirb-cki小鼠表達(dá)cre并分別含有一個或者兩個loxp-pirb等位基因。其中f3代雜交小鼠純合子/雜合子鑒定所用的pcr引物如下:f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildtypeallele:453bp組織特異性的基因敲入也可以通過加入另一對引物,用pcr來驗證:pcrforconstitutivekiallele:f6:5’-ggcaacgtgctggttattgtg-3’r6:5’-ggctgtactctgaggataggcttag-3’f7:5’-agatctgcaagctaattcctgc-3’withcki:1180bp/215bpconstitutivekiallele:303bp注意:如果dna的樣本不夠純,或者pcr的延伸時間不夠長,可能擴增不出來1180bp的產(chǎn)物。cre陽性pcr鑒定所需的引物如下:forward:5’-gaacgcactgatttcgacca-3’reverse:5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’creamplicon:204bp。序列表西安醫(yī)學(xué)院pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構(gòu)建方法(artificialsequence)1ggcaggcttaaaggctaacctgg23223dna人工序列。
pirb在軸突生長錐表達(dá),位于富含肌動蛋白的前緣和synapsin免疫陽性的囊泡中,在神經(jīng)元突起的表達(dá)呈點狀分布。文獻(xiàn)表明,pirb表達(dá)隨年齡增加,特別是在老齡認(rèn)知損傷的小鼠海馬中,pirb能夠抑制軸突再生和突觸可塑性。研究表明小鼠aβ寡聚體對海馬長時程增強的破壞作用需要pirb的參與,在ad轉(zhuǎn)基因模型中,pirb不僅參與成年小鼠記憶缺失,而且介導(dǎo)幼年小鼠視皮層突觸可塑性的丟失。這些研究提示我們,pirb參與突觸可塑性,抑制pirb可能對ad起到效應(yīng)。模型應(yīng)適用于多數(shù)研究者使用,容易復(fù)制,實驗中便于操作和采集各種標(biāo)本。
實驗期間每天進(jìn)行陰道涂片,觀測動情周期變化。進(jìn)一步地,檢測***水平是指:檢測雌***(e2)、促卵泡生長素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進(jìn)一步地,檢測對比卵巢重量是指:比較各組大鼠雙側(cè)卵巢臟器系數(shù)。進(jìn)一步地,陰道涂片是指:采用陰道脫落細(xì)胞涂片法,使用染色劑為亞甲基藍(lán)。本發(fā)明利用順鉑成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,為基礎(chǔ)研究建立穩(wěn)定的卵巢早衰動物模型奠定了良好的基礎(chǔ)。本發(fā)明使用的各種術(shù)語和短語具有本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般含義。提及的術(shù)語和短語如有與公知含義不一致的,以本發(fā)明所表述的含義為準(zhǔn)。附圖說明圖1:e2水平檢測結(jié)果示意圖。圖2:fsh水平檢測結(jié)果示意圖。圖3:lh水平檢測結(jié)果示意圖。圖4:大鼠體重檢測結(jié)果示意圖。圖5:大鼠卵巢重量統(tǒng)計示意圖。圖6:動情周期檢測(光鏡下10倍)示意圖,其中,a、b、c、d依次為:動情前期,動情期,動情后期,動情間期。圖7:he染色觀察不同方法造模對卵泡形態(tài)的影響(光鏡下10倍)示意圖,其中,a、b、c、d依次為:空白組,2mg組,4mg組,6mg組。具體實施方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。然而,本發(fā)明的范圍并不限于下述實施例。本領(lǐng)域的專業(yè)人員能夠理解,在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下。疾病動物模型建模實驗室。連云港呼吸疾病動物模型建模
早期階段科學(xué)假說與疾病潛在藥物治療效果評價始于小鼠疾病模型構(gòu)建及其實驗室研究。嘉定區(qū)泌尿疾病動物模型建模
pirb在軸突生長錐表達(dá),位于富含肌動蛋白的前緣和synapsin免疫陽性的囊泡中,在神經(jīng)元突起的表達(dá)呈點狀分布。文獻(xiàn)表明,pirb表達(dá)隨年齡增加,特別是在老齡認(rèn)知損傷的小鼠海馬中,pirb能夠抑制軸突再生和突觸可塑性。研究表明小鼠aβ寡聚體對海馬長時程增強的破壞作用需要pirb的參與,在ad轉(zhuǎn)基因模型中,pirb不僅參與成年小鼠記憶缺失,而且介導(dǎo)幼年小鼠視皮層突觸可塑性的丟失。這些研究提示我們,pirb參與突觸可塑性,抑制pirb可能對ad起到***效應(yīng)。但是在cns,pirb的功能和下游抑制性信號通路仍然未被闡明,因此迫切需要pirb的細(xì)胞和動物模型。目前對于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制劑,或者采用慢病毒轉(zhuǎn)染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響,后者慢病毒轉(zhuǎn)染在原代細(xì)胞和在體的轉(zhuǎn)染效率比較低,使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題,我們通過crispr/cas9技術(shù)建立了pirb基因敲入小鼠,將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點,為研究pirb在免疫系統(tǒng)或者神經(jīng)系統(tǒng)的作用和機制提供了很好的工具。技術(shù)實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動物模型。嘉定區(qū)泌尿疾病動物模型建模
上海東寰生物科技有限公司主要經(jīng)營范圍是商務(wù)服務(wù),擁有一支專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊和良好的市場口碑。公司自成立以來,以質(zhì)量為發(fā)展,讓匠心彌散在每個細(xì)節(jié),公司旗下原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測試劑盒,動物疾病模型深受客戶的喜愛。公司從事商務(wù)服務(wù)多年,有著創(chuàng)新的設(shè)計、強大的技術(shù),還有一批專業(yè)化的隊伍,確保為客戶提供良好的產(chǎn)品及服務(wù)。上海東寰生物秉承“客戶為尊、服務(wù)為榮、創(chuàng)意為先、技術(shù)為實”的經(jīng)營理念,全力打造公司的重點競爭力。