EdU(5-Ethynyl-2’- deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性,適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究,尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU與T非常相似,而EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更準確地反映DNA復制活性上海東寰向您介紹EdU細胞增殖檢測試劑盒的好處。河南哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商
EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒的運用方式。
細胞增殖是生活細胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細胞的增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎。方式:真核生物的分裂依據(jù)過程不同有三種方式,有有絲分裂,無絲分裂,減數(shù)分裂。其中有絲分裂是人、動物、植物、等一切真核生物中的一種 為普遍的分裂方式,是真核細胞增殖的主要方式。減數(shù)分裂是生殖細胞形成時的一種特殊的有絲分裂。多細胞生物,以細胞分裂的方式產(chǎn)生新的細胞,用來補充體內(nèi)衰老或死亡的細胞
與BrdU方法相比,EdU檢測方法無需DNA變性,無需抗原修復,無需抗原抗體反應,更簡單、更靈敏、更快速、更準確,是細胞增殖檢測的比較好選擇。更準確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細胞核邊緣清晰完整;更簡單--無需抗原抗體反應,基于小分子化學反應的檢測方法,簡單高效,反應單需要幾分鐘;更靈敏--無需抗體,檢測染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴散,即使單個增殖細胞也能準確檢測;更快速--無需過夜,省卻了抗原抗體反應的復雜繁瑣步驟,完成整個檢測周期單需2.5小時;更兼容--對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標記,能夠同時檢測細胞其他性狀特征上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。
細胞增殖分析是細胞生長和分化研究的關鍵,在藥物開發(fā)階段常用來評估化學藥物的毒性和對細胞生長的控制作用。經(jīng)過之后的細胞分裂階段,各個子代細胞會從母細胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細胞儀對熒光強度進行分析,即可測定出自標記結合起,單個細胞或細胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。通常根據(jù)平均DNA含量或細胞代謝參數(shù)進行細胞增殖檢測,此類分析可以報告出總細胞數(shù)目和活細胞數(shù)目,或者測定出單個細胞內(nèi)的DNA合成情況。細胞增殖染料稀釋分析主要基于細胞膜通透性,熒光團分子、染料進入細胞后,將會共價結合到蛋白質(zhì)上的氨基基團上,從而使染料能夠長時間停留在細胞中。上海東寰告訴您什么是EdU細胞增殖檢測試劑盒?河南咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒公司
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