步驟3、pmsg處理c57bl/6雌性小鼠(6周齡，平均體重20g)，46h后注射hcg，與雄性小鼠合籠交配，次日取受精卵進(jìn)行顯微注射，將步驟1的grna1、grna2、cas9蛋白以及線性化后的打靶載體一起注射到受精卵中，取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠體內(nèi)，產(chǎn)出小鼠，即f0代小鼠。上述步驟中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2～10pmol/ul，cas9蛋白的注射濃度為30～100ng/μl，cas9蛋白購自newenglandbiolabs，貨號(hào)為m0386m。步驟4、提取f0代小鼠尾部dna，pcr擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序，鑒定是否為嵌合體。本發(fā)明用于f0代小鼠pirb基因pcr鑒定的特異性引物如下：pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1對(duì)應(yīng)的擴(kuò)增產(chǎn)物大小為，primers2對(duì)應(yīng)的擴(kuò)增產(chǎn)物為。用于f0代小鼠測(cè)序的引物如下：sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。便于研究者按實(shí)驗(yàn)?zāi)康男枰S時(shí)采取各種樣品。奉賢區(qū)疾病動(dòng)物模型建模優(yōu)勢(shì)

1、動(dòng)物模型名稱：膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：5周5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：200~220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法：用膽管結(jié)扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3％戊巴比妥鈉麻醉，腹部皮膚消毒，無菌操作沿腹部正中線剪開腹腔，分離出膽管，在膽管近端和遠(yuǎn)端2處結(jié)扎膽管。手術(shù)后正常飼養(yǎng)28天。28天后解剖取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分：0分：無明顯病變；1分：呈局灶性分布，受累面積在30%以下者；2分：呈多灶性分布，受累面積在30%-70%之間者；3分：呈彌漫性分布，受累面積在70%以上者。統(tǒng)計(jì)分析：每份標(biāo)本在低倍視野(10×10)下依次選取左上、右上、左下、右下、中間5個(gè)視野（共1.5mm2）進(jìn)行觀察，測(cè)定并計(jì)算視野內(nèi)小膽管伴纖維組織增生總面積。無錫皮膚疾病動(dòng)物模型建模上海東寰為您提供完善的大鼠動(dòng)物疾病模型。

可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種變化和修飾。本發(fā)明對(duì)試驗(yàn)中所使用到的材料以及試驗(yàn)方法進(jìn)行一般性和/或具體的描述。雖然為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的，但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細(xì)描述。下述實(shí)施例中所涉及的儀器、試劑、材料等，若無特別說明，均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)儀器、試劑、材料等，可通過正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實(shí)施例中所涉及的實(shí)驗(yàn)方法，檢測(cè)方法等，若無特別說明，均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法，檢測(cè)方法等。實(shí)施例1：建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液50ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥，批號(hào)：aa1a8029a)中，配制成2mg/kg順鉑注射液，按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實(shí)施例2：建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液(齊魯制藥，批號(hào)：aa1a8029a)中，配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。

1、動(dòng)物模型名稱：二甲基苯蒽(DMBA)致乳腺*大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雌性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：6~8周齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：80~100g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法：二甲基苯并蒽(DMBA)誘導(dǎo)。大鼠按100mg/kg體重于臀部皮下一次性注射10mg/mL的DMBA溶液1次。正常飼養(yǎng)致24周。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：模型組大鼠第5對(duì)乳房直徑在各測(cè)定時(shí)間點(diǎn)與正常對(duì)照組比較有***性差異；大鼠注射致*劑后乳腺上皮組織逐漸發(fā)生有規(guī)律的變化，乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞首先發(fā)生上皮增生、不典型增生，并逐漸加重，在第9周時(shí)可見同一大鼠的多個(gè)乳腺出現(xiàn)不同程度的導(dǎo)管上皮增生和不典型增生。第13周開始發(fā)現(xiàn)>3mm的乳腺*，至第24周時(shí)70%的大鼠發(fā)生乳腺*，并可見一只大鼠同時(shí)發(fā)生多個(gè)乳腺*，而同一大鼠的其他乳腺亦呈現(xiàn)出不同程度的上皮細(xì)胞增生和不典型增生，提示處于*發(fā)生的不同進(jìn)展階段。驗(yàn)性動(dòng)物模型是指研究者通過使用物理的、化學(xué)的和生物的致病因素作用于動(dòng)物。

1、動(dòng)物模型名稱：膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：5周5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：200~220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法：用膽管結(jié)扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3％戊巴比妥鈉麻醉，腹部皮膚消毒，無菌操作沿腹部正中線剪開腹腔，分離出膽管，在膽管近端和遠(yuǎn)端2處結(jié)扎膽管。手術(shù)后正常飼養(yǎng)28天。28天后解剖取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分：0分：無明顯病變；1分：呈局灶性分布，受累面積在30%以下者；2分：呈多灶性分布，受累面積在30%-70%之間者；3分：呈彌漫性分布，受累面積在70%以上者。小鼠疾病建模請(qǐng)找上海東寰。無錫皮膚疾病動(dòng)物模型建模

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物向小型化的發(fā)展趨勢(shì)更有利于實(shí)驗(yàn)者的日常管理和實(shí)驗(yàn)操作。奉賢區(qū)疾病動(dòng)物模型建模優(yōu)勢(shì)

cns，pirb的功能和下游抑制性信號(hào)通路仍然未被闡明，因此迫切需要pirb的細(xì)胞和動(dòng)物模型。目前對(duì)于pirb基因功能的研究，多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide，pep)和抑制劑，或者采用慢病毒轉(zhuǎn)染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響，后者慢病毒轉(zhuǎn)染在原代細(xì)胞和在體的轉(zhuǎn)染效率比較低，使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題，我們通過crispr/cas9技術(shù)建立了pirb基因敲入小鼠，將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點(diǎn)，為研究pirb在免疫系統(tǒng)或者神經(jīng)系統(tǒng)的作用和機(jī)制提供了很好的工具。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型。奉賢區(qū)疾病動(dòng)物模型建模優(yōu)勢(shì)

上海東寰生物科技有限公司是一家經(jīng)營(yíng)范圍為：從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù)?；ぎa(chǎn)品（除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用物品、易制毒化學(xué)品）的銷售。【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目，經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】。的公司，是一家集研發(fā)、設(shè)計(jì)、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。上海東寰生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì)，以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供原代細(xì)胞，細(xì)胞增殖與凋亡，細(xì)胞檢測(cè)試劑盒，動(dòng)物疾病模型。上海東寰生物繼續(xù)堅(jiān)定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路，既要實(shí)現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長(zhǎng)，又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。上海東寰生物始終關(guān)注商務(wù)服務(wù)行業(yè)。滿足市場(chǎng)需求，提高產(chǎn)品價(jià)值，是我們前行的力量。