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來源: 發(fā)布時間:2022-06-30

傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細胞內(nèi)抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性EdU細胞增殖檢測試劑盒的優(yōu)點體現(xiàn)在哪?北京咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒購買

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EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替T滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)檢測DNA復(fù)制活性,通過檢測EdU標記便能準確地反映細胞的增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細胞和組織水平能更準確地反映細胞增殖等現(xiàn)象。浙江品質(zhì)好的EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢EdU細胞增殖檢測試劑盒如何發(fā)揮重要作用?上海東寰告訴您。

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本試劑盒可以檢測到細胞或組織樣品中單個的增殖細胞,同時也可以對細胞或組織樣品總體的細胞增殖情況進行定量檢測。本試劑盒可以檢測培養(yǎng)的細胞或組織樣品,也可以檢測組織切片,但均需提前進行EdU的摻入。細胞增殖能力的檢測是評估細胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認的精確的檢測細胞增殖的方法是直接檢測細胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細胞增殖的方法是放射性標記核苷摻入法,如氚標記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法

細胞增殖是評價細胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標。EdU(5-Ethynyl-2-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團在天然化合物中很少見,能夠在DNA復(fù)制時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在合成的DNA分子中,基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可直接并準確地檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)、病毒繁殖等方面的研究,尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及各種藥物的細胞增殖及活力篩選實驗。EdU細胞增殖檢測試劑盒多少錢?

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通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。EdU細胞增殖檢測試劑盒在社會上的重要性。江西如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒

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細胞活性的細胞增殖檢測方法,能檢測到細胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個的增殖細胞。這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細胞,檢測靈敏度不是很高,通常適用于流式細胞儀檢測。在進行科學(xué)研究時,上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。北京咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒購買

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