《數(shù)字化轉(zhuǎn)型和跨學(xué)科實(shí)踐暑期研討會(huì)》詳解
數(shù)字化轉(zhuǎn)型和跨學(xué)科實(shí)踐暑期研討會(huì)
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現(xiàn)在有一種新的檢測(cè)方法能避免這種情況的發(fā)生——EdU檢測(cè)。EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷)也是一種胸腺嘧啶核苷類(lèi)似物,但其連有的炔羥基團(tuán)在天然化合物中很少見(jiàn),在細(xì)胞增殖時(shí)能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中,基于EdU與染料的共軛反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析,可以有效地檢測(cè)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法相比,更簡(jiǎn)單,更快速,更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度。有哪些領(lǐng)域需要使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒?江西品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)
建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請(qǐng)于4°C條件下避光濕潤(rùn)保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測(cè)。而EdU檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性湖北哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠(chǎng)家上海哪家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒值得信賴(lài)?
本試劑盒使用便捷、兼容性好。本試劑盒只需常用的多聚甲醛固定和TritonX-100穿透,就可以使疊氮化物探針有效進(jìn)入細(xì)胞并發(fā)生點(diǎn)擊反應(yīng),不會(huì)影響細(xì)胞形態(tài),不會(huì)影響基于抗體的免疫熒光和免疫組化檢測(cè),也不會(huì)影響DNA的熒光染色(如PI染色檢測(cè)細(xì)胞周期、DAPI或Hoechst染料檢測(cè)細(xì)胞核)。而B(niǎo)rdU法為了使大分子的BrdU抗體進(jìn)入細(xì)胞并與DNA上的BrdU結(jié)合,需要對(duì)雙鏈DNA進(jìn)行變性處理(如酸變性、熱變性或者DNase消化等),這種變性可能會(huì)影響細(xì)胞形態(tài),影響后續(xù)的免疫熒光和免疫組化檢測(cè)、DNA的熒光染色等。BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測(cè)原理的比較參見(jiàn)圖2。
更準(zhǔn)確--無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來(lái)的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡(jiǎn)單--無(wú)需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法,簡(jiǎn)單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無(wú)需抗體,檢測(cè)染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè);更快速--無(wú)需過(guò)夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個(gè)檢測(cè)周期單需2.5小時(shí);更兼容--對(duì)樣品幾乎無(wú)損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。rdU需要DNA變性后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致BrdU、Hoechst染色彌散,邊緣模糊不清;而EdU邊緣清晰完整,檢測(cè)更靈敏、更準(zhǔn)確EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒常見(jiàn)的用途有哪些?上海東寰告訴您。
細(xì)胞增殖是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類(lèi)似物,其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見(jiàn),能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒通過(guò)基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過(guò)夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域有哪些?浙江如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商
EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的原理是什么?上海東寰告訴您。江西品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)
EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU檢測(cè)染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測(cè),可有效避免樣品損傷,在細(xì)胞和組織水平能更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞增殖等現(xiàn)象。EdU染色(a)通過(guò)用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱(chēng)取適量的粉末進(jìn)行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準(zhǔn)確稱(chēng)量,稱(chēng)量范圍可稍微放寬,但是不應(yīng)超過(guò)±20%,且該粉末較易氧化,使用后請(qǐng)旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報(bào)廢或更換江西品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)