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江蘇如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書

來源: 發(fā)布時間:2021-12-14

EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒更準(zhǔn)確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡單--無需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法,簡單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無需抗體,檢測染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測;更快速--無需過夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個檢測周期單需2.5小時;更兼容--對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記,能夠同時檢測細(xì)胞其他性狀特征上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒如何去使用呢?江蘇如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書

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EdU細(xì)胞增殖分析試劑采用click 化學(xué)技術(shù),可為新合成的DNA檢測與定量提供比傳統(tǒng)BrdU方法更的替代物。 當(dāng)在DNA合成過程中摻入修飾的核苷EdU(5-乙炔基-2'-脫氧尿苷)時,可以通過快速的“click化學(xué)”反應(yīng)檢測到它,并且對細(xì)胞的破壞作用小。點(diǎn)擊化學(xué)相比于BrdU具有更簡便、更快速、更易操作的優(yōu)點(diǎn)。 與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測法不同,Click-iT EdU檢測法不是基于抗體,因此并不需要DNA變性以檢測摻入的核苷。 此外,Click-iT EdU可以與R-PE、R-PE tandems 和GFP等熒光蛋白復(fù)用提高效力。當(dāng)您平行比較這些方法時,Click-iT EdU和Invitrogen Click-iT Plus EdU在測定細(xì)胞增殖方面的優(yōu)勢是顯而易見的。湖北哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒評價EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒使用時要考慮什么問題?

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EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。

建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片, 可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T )結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。上海東寰告訴您使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的便捷性。

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廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒怎樣使用?上海東寰告訴您。湖南品牌EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒公司

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通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。江蘇如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書

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