沙門氏菌顯色培養(yǎng)基使用方法:1、稱取沙門氏菌顯色培養(yǎng)基47.5g,混合均勻加熱至100℃,并按常規(guī)不斷攪拌直至完全溶解(不能持續(xù)高溫加熱,建議不要重復(fù)煮溶),不需高壓滅菌,冷至50℃,加入10支沙門氏菌選擇性添加劑(凍干粉每支需先用1ml無菌水溶解),混勻,傾注滅菌平皿。2、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液與增菌液。3、建議使用二步增菌法:(1)前增菌:將處理過的樣品25g置于225mL緩沖蛋白胨水中,混合均勻后37℃培養(yǎng)6~8h;(2)選擇性增菌:取前增菌液1mL加入到9mL四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB)中,混合均勻后37℃培養(yǎng)18~24h;4、用接種環(huán)取增菌液一環(huán),劃線接種于沙門氏菌顯色平板上,置于36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。5、觀察結(jié)果。挑取顯色平板上呈品紅色,扁平透明,邊緣光滑,直徑約2mm的可疑菌落進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)。6、可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管試驗(yàn),對疑似沙門氏菌菌落進(jìn)行生化鑒定。在培養(yǎng)過程結(jié)束后,如果培養(yǎng)基變成紅色或呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn),就可以初步判斷出樣品中存在沙門氏菌。沙門氏顯色培養(yǎng)基作用
沙門氏顯色培養(yǎng)基是一種常用的微生物培養(yǎng)基,其主要成分為肉湯、膽鹽、葡萄糖和碳酸氫鈉等。該培養(yǎng)基的主要作用是用于檢測沙門氏菌的存在,因此在食品、醫(yī)藥、環(huán)境等領(lǐng)域都有普遍的應(yīng)用。食品領(lǐng)域:沙門氏菌是一種常見的食源性的病原菌,可以通過食品污染引起人類的食物中毒。因此,在食品加工和生產(chǎn)過程中,使用沙門氏顯色培養(yǎng)基可以有效地檢測食品中是否存在沙門氏菌。特別是在肉制品、蛋制品、水產(chǎn)品等易受污染的食品中,沙門氏顯色培養(yǎng)基的應(yīng)用更為普遍。濟(jì)南沙門氏菌顯色培養(yǎng)基作用在使用沙門氏顯色培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作和培養(yǎng)條件。
沙門氏菌檢測過程進(jìn)行分析梳理:選擇性分離:XLD瓊脂上沙門氏菌菌落特征:菌落呈粉紅色,帶或不帶黑色中心,有些菌株可呈現(xiàn)大的帶光澤的黑色中心,或呈現(xiàn)全部黑色的菌落;有些菌株為黃色菌落,帶或不帶黑色中心。XLD瓊脂里添加了木糖,腸道細(xì)菌幾乎都可以利用木糖,只有志賀不利用。所以志賀是無色的菌落。其中還添加了賴氨酸,沙門氏菌也能利用木糖產(chǎn)酸,這樣就不能與其他腸道菌區(qū)分開,但是大部分沙門會產(chǎn)賴氨酸脫羧酶,在酸性條件下把賴氨酸脫羧后形成的尸胺是堿性,會中和木糖產(chǎn)的酸,從而使菌落保持無色。再配合硫化氫指示系統(tǒng),沙門就變成了我們看到的形態(tài)。乳糖和蔗糖的存在可以讓產(chǎn)生賴氨酸脫羧酶的大腸菌群大量產(chǎn)酸,從而與沙門氏菌區(qū)分。不同的廠家的沙門氏顯色培養(yǎng)基,由于其培養(yǎng)基上的酶底物和顯色基團(tuán)不同,所以形成的菌落特征就不同,按照廠家的說明書判斷。
沙門氏菌檢測過程進(jìn)行分析梳理之生化鑒定:確定可疑菌后,需要進(jìn)行生化鑒定,若一個(gè)一個(gè)生化管去做,過程十分的繁瑣。根據(jù)國標(biāo)“5.4.3”規(guī)定,可疑采用生化鑒定試劑盒或全自動生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行檢測。沙門氏菌檢測過程進(jìn)行分析梳理之血清學(xué)鑒定:血清學(xué)鑒定是十分必須的步驟,可判定沙門氏菌是否被O多價(jià)抗原和H多價(jià)抗原血清凝集。采用的血清可以是進(jìn)口的或者國內(nèi)生產(chǎn)的,但是國內(nèi)血清的凝集性能有時(shí)不太好,而進(jìn)口血清又太貴。所以只是判定O多價(jià)和H多價(jià)凝集的,用國產(chǎn)的就可以。使用沙門氏菌顯色培養(yǎng)基進(jìn)行沙門氏菌檢測需按特定程序進(jìn)行制備和接種。
如何使用沙門氏顯色培養(yǎng)基進(jìn)行沙門氏菌的檢測?實(shí)驗(yàn)所需材料和設(shè)備包括:沙門氏顯色培養(yǎng)基、接種環(huán)、滅菌鍋、培養(yǎng)皿、烘箱、天平等。實(shí)驗(yàn)過程中的方法和步驟如下:配置沙門氏顯色培養(yǎng)基:將適量的胰蛋白胨、酵母提取物、氯化鈉和瓊脂粉加入燒杯中,加入少量水并攪拌均勻。將混合物加熱至沸騰并保持一段時(shí)間,以便瓊脂粉充分溶解。將混合物倒入培養(yǎng)皿中,凝固后備用。接種:將待檢測樣品進(jìn)行處理,如樣品為食品,需進(jìn)行研磨或勻漿,然后將樣品接種到沙門氏顯色培養(yǎng)基上。每個(gè)培養(yǎng)皿接1-2個(gè)樣品。沙門氏顯色培養(yǎng)基可以用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中沙門氏菌的檢測和防控。紹興沙門氏菌顯色培養(yǎng)基供應(yīng)
沙門氏菌顯色培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)包括檢測結(jié)果準(zhǔn)確性高、使用過程簡單方便等。沙門氏顯色培養(yǎng)基作用
沙門氏顯色培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)在于其快速、準(zhǔn)確、靈敏度高,可以很大程度縮短檢測時(shí)間,提高檢測效率。同時(shí),該培養(yǎng)基對沙門氏菌具有很高的特異性,能夠有效地避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn),使得檢測結(jié)果更加可靠。此外,沙門氏顯色培養(yǎng)基還可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得較佳的檢測效果。例如,可以添加一些特殊營養(yǎng)物質(zhì),如血清、酵母提取物等,以提高沙門氏菌的生長速度和菌落數(shù)量;也可以添加一些抗笙素等物質(zhì),以抑制其他雜菌的生長,提高檢測的特異性。沙門氏顯色培養(yǎng)基是一種非常實(shí)用的食源性致病菌檢測工具,具有普遍的應(yīng)用前景和市場前景。未來可以通過進(jìn)一步的研發(fā)和技術(shù)改進(jìn),不斷提高其靈敏度和特異性,從而更好地保障人類食品安全和健康。沙門氏顯色培養(yǎng)基作用