沙門氏菌顯色培養(yǎng)基的制備過(guò)程相對(duì)簡(jiǎn)單。首先,將適量的培養(yǎng)基粉末溶解在適量的蒸催水中,并加熱攪拌直至完全溶解。然后,將溶液滅菌并冷卻至適宜的溫度,通常為45-50攝氏度。接下來(lái),將已知數(shù)量的沙門氏菌接種到培養(yǎng)基中,并均勻涂布于培養(yǎng)基表面。將含有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿倒置放置于恒溫培養(yǎng)箱中,以促進(jìn)細(xì)菌的生長(zhǎng)。在培養(yǎng)的過(guò)程中,如果樣品中存在沙門氏菌,它們將會(huì)利用培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行生長(zhǎng),并產(chǎn)生特殊的顏色反應(yīng)。一般情況下經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)時(shí)間(通常為18-24小時(shí)),如果培養(yǎng)基變成紅色或呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn),就可以初步判斷出樣品中存在沙門氏菌。需要注意的是,它只能作為初步的篩查方法,不能作為鑒定手段。對(duì)于培養(yǎng)基呈紅色反應(yīng)的樣品,需要進(jìn)行進(jìn)一步的確認(rèn)測(cè)試,如生化試驗(yàn)和分子生物學(xué)技術(shù),以確定是否確實(shí)存在沙門氏菌。總之,沙門氏菌顯色培養(yǎng)基是一種用于檢測(cè)和鑒定沙門氏菌的重要工具,它通過(guò)特定的成分和化學(xué)反應(yīng),提供了一種快速簡(jiǎn)便的方法來(lái)初步判斷食品樣品中是否存在沙門氏菌。然而,在使用過(guò)程中仍需結(jié)合其他鑒定方法來(lái)進(jìn)行綜合分析,以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。沙門氏顯色培養(yǎng)基的制備方法比較簡(jiǎn)單,由肉湯、膽鹽、蔗糖等組成。泉州沙門氏+顯色培養(yǎng)基科研應(yīng)用
沙門氏顯色培養(yǎng)基的保存方法:避免冷凍:沙門氏顯色培養(yǎng)基不宜冷凍保存,因?yàn)槔鋬鰰?huì)破壞培養(yǎng)基中的成分,影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。如果需要長(zhǎng)期保存,可以將培養(yǎng)基制成小包裝,密封保存在冰箱中。避免污染:在使用沙門氏顯色培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)注意避免污染。在開(kāi)封前,應(yīng)先用消毒液擦拭容器表面,以殺滅表面的細(xì)菌。在使用過(guò)程中,應(yīng)注意避免接觸其他物品,以免污染培養(yǎng)基。注意使用期限:沙門氏顯色培養(yǎng)基的使用期限一般為6個(gè)月至1年,過(guò)期后應(yīng)及時(shí)淘汰。在使用前,應(yīng)檢查培養(yǎng)基的外觀和性狀,如有異常應(yīng)及時(shí)淘汰。鹽城沙門氏顯色培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)應(yīng)用沙門氏顯色培養(yǎng)基成功指標(biāo)是觀察到沙門氏菌在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)和顯色。
沙門氏菌屬(Salmonella)是一群寄生在人類和動(dòng)物腸道中,生化反應(yīng)和抗原結(jié)構(gòu)相關(guān)的革蘭氏陰性桿菌。沙門氏菌屬細(xì)菌的血清型現(xiàn)已達(dá)2500多種。根據(jù)DNA同源性,分兩個(gè)種,即腸道沙門氏菌(S.enterica)和邦戈沙門氏菌(S.bongori)。腸道沙門氏菌又分6個(gè)亞種,能染上人類的沙門氏菌血清型,約1400多種,主要在首先亞種中,即腸道沙門氏菌腸道亞種(S. enterica subsp. Enterica)。門氏菌顯色培養(yǎng)基使用說(shuō)明書:組分:瓊脂 15.0g/L 蛋白胨和酵母粉 7.0 g/L 色素和選擇性物質(zhì) 12.9 g/L。pH值7.6±0.2。保存 該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內(nèi)貯存2周(2℃8℃,避光)。接種:劃線或涂布接種(冰箱內(nèi)保存的平板使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫),在36。
沙門氏菌檢測(cè)過(guò)程進(jìn)行分析梳理之生化鑒定:確定可疑菌后,需要進(jìn)行生化鑒定,若一個(gè)一個(gè)生化管去做,過(guò)程十分的繁瑣。根據(jù)國(guó)標(biāo)“5.4.3”規(guī)定,可疑采用生化鑒定試劑盒或全自動(dòng)生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)。沙門氏菌檢測(cè)過(guò)程進(jìn)行分析梳理之血清學(xué)鑒定:血清學(xué)鑒定是十分必須的步驟,可判定沙門氏菌是否被O多價(jià)抗原和H多價(jià)抗原血清凝集。采用的血清可以是進(jìn)口的或者國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的,但是國(guó)內(nèi)血清的凝集性能有時(shí)不太好,而進(jìn)口血清又太貴。所以只是判定O多價(jià)和H多價(jià)凝集的,用國(guó)產(chǎn)的就可以。沙門氏菌顯色培養(yǎng)基的主要成分包括營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、熒光素等。
沙門氏菌檢測(cè)過(guò)程進(jìn)行分析梳理之血清學(xué)鑒定:(1)以無(wú)菌干凈的玻片為載體,滴一滴生理鹽水,接種管從營(yíng)養(yǎng)瓊脂平面挑取少量菌體,在生理鹽水中涂開(kāi),緩緩?fù)浚^察凝集情況,排除自凝。(2)滴一滴O多價(jià)血清于玻片上,重復(fù)上述步驟,判斷凝集情況,一般情況都會(huì)凝集的。除非是有Vi抗原存在時(shí)(如鼠傷寒沙門氏菌),會(huì)阻止O血清凝集,可挑取菌體至1 mL生理鹽水中制成菌懸液,于酒精燈煮沸在檢查。(3)滴一滴H多價(jià)血清于玻片上,重復(fù)上述(1)中步驟,判斷凝集情況。若凝集效果不明顯,需要用0.6%半固體瓊脂平板誘導(dǎo),帶菌落蔓延生長(zhǎng)是,挑取邊緣部分進(jìn)行檢查。傳統(tǒng)檢測(cè)方法會(huì)漏檢乳糖陽(yáng)性沙門氏菌,無(wú)法滿足要求。廣州沙門氏菌顯色培養(yǎng)基作用
通過(guò)特定的顏色變化顯示出沙門氏菌的存在,使得檢測(cè)過(guò)程更加快速和精確。泉州沙門氏+顯色培養(yǎng)基科研應(yīng)用
沙門氏菌檢測(cè)過(guò)程進(jìn)行分析梳理:選擇性增菌:將培養(yǎng)后BPW搖勻,取1mL轉(zhuǎn)種于10mL 四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB),于42℃±1℃培養(yǎng)18h-24h,同時(shí)再取1mL轉(zhuǎn)種于亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC),于36℃±1℃培養(yǎng)18h-24h。TTB增菌液的配制有兩個(gè)注意事項(xiàng),一是碳酸鈣是TTB的正常成分,作用是中和吸收有毒性的代謝物質(zhì)(主要是培養(yǎng)基酸堿度的變化對(duì)菌生長(zhǎng)的影響)。但是碳酸鈣不溶于水,所以TTB有沉淀是正常的,分裝時(shí)一定搖勻分裝。二是四硫磺酸鈉是TTB抑制性的中心成分,培養(yǎng)基也以此命名,但成分表中并沒(méi)有四硫磺酸鈉,它是在碘液煌綠加入后,硫代硫酸鈉經(jīng)碘氧化生成的。四硫磺酸鈉對(duì)大腸菌群有抑制作用,但不穩(wěn)定,所以碘液和煌綠必須在臨用前加入。SC培養(yǎng)后,若菌生長(zhǎng),培養(yǎng)液會(huì)變紅,但是變紅不意味著沙門氏菌的存在,還需要往下進(jìn)行。泉州沙門氏+顯色培養(yǎng)基科研應(yīng)用