SCARB2如何調(diào)控MYC轉(zhuǎn)錄活性？

來源：發(fā)布時(shí)間：2024-09-13

SCARB2如何調(diào)控MYC轉(zhuǎn)錄活性？

第一步，SCARB2是否影響MYC蛋白修飾

翻譯后修飾在控制MYC的表達(dá)和活性中起關(guān)鍵作用。Anti-MYC IP-WB實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，SCARB2正向調(diào)控MYC蛋白乙?；揎椝剑▓D1d)。定量質(zhì)譜(MS)蛋白質(zhì)組學(xué)發(fā)現(xiàn)，MYC的賴氨酸(K) 148和326乙?；脑赟CARB2過表達(dá)組富集。構(gòu)建MYC-K148R和K326R突變體，anti-MYC IP-WB 實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)SCARB2只減弱MYC-K148R乙?；揎椝剑▓D1e）。表明SCARB2上調(diào)MYC-K148乙酰化。

第二步，SCARB2通過何種分子影響MYC蛋白乙?；揎?

研究表明p300、HDACs、KAT5、SIRT1和GCN5以直接和間接的方式影響MYC的乙?；腿ヒ阴；?。通過IP-WB篩選發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)SCARB2可恢復(fù)由去乙?；窰DAC3介導(dǎo)的MYC乙酰化降低（圖1f），表明SCARB2主要以HDAC3依賴的方式影響MYC乙?；?。

第三步，MYC蛋白乙酰化修飾影響MYC轉(zhuǎn)錄活性

熒光素酶實(shí)驗(yàn)顯示，K148R突變降低了MYC的轉(zhuǎn)錄活性（圖1g）。ChIP-qPCR結(jié)果顯示，MYC-K148R突變減少了MYC與其靶基因的結(jié)合（圖1h）。研究顯示位于MYC-CT結(jié)構(gòu)域的K148介導(dǎo)MYC與GCN5、KAT5和BRD4等輔因子的相互作用，Co-IP實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了該結(jié)論（圖1i）。功能實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，MYC-K148R突變的HCCLM3細(xì)胞的增殖能力和球形成能力明顯降低（圖1j）。表明，SCARB2增強(qiáng)的MYC-K148乙?；癁殛P(guān)鍵輔因子提供對(duì)接位點(diǎn)，對(duì)MYC的轉(zhuǎn)錄活性至關(guān)重要（圖1k）。

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