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實(shí)現(xiàn)病原微生物種類鑒定有哪些技術(shù)手段?病原微生物的研究歷史不算長。發(fā)展至今已經(jīng)有了成套的檢測體系。利用不同類別的微生物有其本身不同于其他微生物的特點(diǎn),如從培養(yǎng)形態(tài)、顯微鏡觀測形態(tài)、生物學(xué)功能、致病性、生物化學(xué)反應(yīng)、抗原抗體反應(yīng)、核酸序列等方面,都可以進(jìn)行相當(dāng)程度的鑒別。即便如此,依然有很多微生物通過傳統(tǒng)技術(shù)無法鑒別。高通量測序技術(shù)問世,給微生物鑒別打開一扇新的大門。它對核酸進(jìn)行測序是非特異的,因此,對一無所知的核酸也可以實(shí)現(xiàn)鑒別。室內(nèi)舒適的溫度,濕度等環(huán)境條件以及相對密閉的室內(nèi)更為各種有害微生物滋生創(chuàng)造了條件。廣東病毒篩查價格
近年來藥品不安全事故不斷發(fā)生,并呈上升趨勢。在藥品質(zhì)量事故的高發(fā)期,強(qiáng)化藥品微生物鑒定工作顯得尤為重要,尤其是無菌藥品。在無菌藥品的生產(chǎn)中,對原料、輔料、包裝材料、生產(chǎn)場所、生產(chǎn)過程的微生物控制是保證藥品質(zhì)量的基礎(chǔ),所以利用微生物鑒定技術(shù)快速、準(zhǔn)確地獲得鑒定結(jié)果,對當(dāng)前無菌藥品微生物鑒定工作來說非常重要。PCR技術(shù)能夠鑒定出藥品中含有診療大腸桿菌、金黃色葡萄球菌以及李斯特桿菌多種成分,相關(guān)**學(xué)者在還沒有經(jīng)過富集化培養(yǎng)就采用免疫磁珠并結(jié)合PCR技術(shù),準(zhǔn)確并快速對藥品進(jìn)行檢測,確定了藥品中含有李斯特菌和大腸埃希氏菌成分;還有有關(guān)**采用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)檢測實(shí)驗(yàn)菌株,確定藥品中多數(shù)菌株呈陰性,而有少量溶血弧菌呈陽性。RNA病毒鑒定檢測有很多微生物通過傳統(tǒng)技術(shù)是無法鑒別的。
在我們食品微生物檢測過程中,除了我們知道要檢測的目標(biāo)微生物之外,往往會出現(xiàn)一些和目標(biāo)微生物表現(xiàn)不一,但你又想知道它是什么菌屬的情況,特別是對于一些生產(chǎn)企業(yè),有時候往往會懷疑是否是因?yàn)檫@個“非目標(biāo)菌”的存在,從而影響到了產(chǎn)品質(zhì)量。那怎么去鑒定那些“非目標(biāo)”微生物呢?又有哪些方法和手段可以采用呢?傳統(tǒng)的細(xì)菌系統(tǒng)分類,也就是常說的鑒定,通常是通過純培養(yǎng)分離后從形態(tài)學(xué)、生理生化反應(yīng)特征以及免疫學(xué)特性(血清學(xué)分析)進(jìn)行鑒定。這也是我們目前國標(biāo)中常用的鑒定手段,這種方法的優(yōu)點(diǎn)就是所用試劑簡單易得,常規(guī)實(shí)驗(yàn)室即可展開,經(jīng)濟(jì)實(shí)用,缺點(diǎn)呢,就是鑒定所需時間較長,且容易判斷不準(zhǔn)確。用這種方法,要先進(jìn)行革蘭氏染色,從鏡檢分析其可能的微生物種屬,再根據(jù)判斷結(jié)果,按照《伯杰氏手冊》上的生化項(xiàng)目進(jìn)行實(shí)驗(yàn),確定其可能的微生物種屬。比如,鏡檢是革蘭氏陽性桿菌,且周圍或菌體頂端有芽孢產(chǎn)生,這時候我們就要往芽孢桿菌的方向去進(jìn)行生理生化鑒定。
對于無菌藥品生產(chǎn)來說,生產(chǎn)區(qū)域的微生物種類非常有限,更具無菌藥品的具體生產(chǎn)內(nèi)容和過程,潔凈區(qū)內(nèi)會有芽孢桿菌占絕大多數(shù)酵母菌、霉菌和葡萄球菌少量存在,放射根瘤菌、苛養(yǎng)顆粒鏈菌等少數(shù)微生物種類。在無菌藥品生產(chǎn)過程中,應(yīng)初步建立微生物數(shù)據(jù)庫,建立潔凈區(qū)微生物數(shù)據(jù)庫是追溯潔凈區(qū)微生物污染來源的有效方法,有效指導(dǎo)并控制無菌藥品生產(chǎn)中的污染問題。同時,為防止微生物污染,通過微生物數(shù)據(jù)庫并結(jié)合一些常規(guī)方管理法,比如對污染源及其途徑進(jìn)行了解,并進(jìn)行微生物限度檢查,控制藥品質(zhì)量。注意在潔凈區(qū)的人員數(shù)量應(yīng)控制好,并要求人員具有自我約束的意識等,從而有效控制潔凈區(qū)微生物。在生產(chǎn)中應(yīng)用微生物鑒定技術(shù)和檢測設(shè)備向微型化以及多功能化方向發(fā)展,更具有較快的檢測速度以及更為準(zhǔn)的鑒定結(jié)果。知病原鑒定測序?qū)嶒?yàn)基于二代測序技術(shù)。
對于無菌藥品生產(chǎn)來說生產(chǎn)區(qū)域的微生物種類非常有限,更具無菌藥品的具體生產(chǎn)內(nèi)容和過程,潔凈區(qū)內(nèi)會有芽孢桿菌占絕大多數(shù)酵母菌、霉菌和葡萄球菌少量存在,放射根瘤菌、苛養(yǎng)顆粒鏈菌等少數(shù)微生物種類。在無菌藥品生產(chǎn)過程中,應(yīng)初步建立微生物數(shù)據(jù)庫,建立潔凈區(qū)微生物數(shù)據(jù)庫是追溯潔凈區(qū)微生物污染來源的有效方法,有效指導(dǎo)并控制無菌藥品生產(chǎn)中的污染問題。同時,為防止微生物污染,通過微生物數(shù)據(jù)庫并結(jié)合一些常規(guī)方管理法,比如對污染源及其途徑進(jìn)行了解,并進(jìn)行微生物限度檢查,控制藥品質(zhì)量。注意在潔凈區(qū)的人員數(shù)量應(yīng)控制好,并要求人員具有自我約束的意識等,從而有效控制潔凈區(qū)微生物。在生產(chǎn)中應(yīng)用微生物鑒定技術(shù)和檢測設(shè)備向微型化以及多功能化方向發(fā)展,更具有較快的檢測速度以及更為準(zhǔn)的鑒定結(jié)果。微生物檢測中含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱為混和培養(yǎng)物。廣東病毒篩查價格
快速檢測方法是指從樣品制備到出具檢測結(jié)果的整個檢測過程能夠在短時間內(nèi)完成的檢測方法。廣東病毒篩查價格
病原微生物檢測方法-多種PCR結(jié)合使用,基因芯片技術(shù)與多重PCR結(jié)合可以通過PCR對目的基因進(jìn)行放大,通過基因芯片的熒光探針增加檢測的靈敏性和特異性,使得兩種檢測技術(shù)的優(yōu)勢互補(bǔ),已應(yīng)用于病原微生物的檢測。將病原體特異性基因作為靶基因設(shè)計(jì)出引物與探針,進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增,制備出寡核苷酸芯片,再對待測樣本靶基因進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增,將擴(kuò)增產(chǎn)物與病原菌多重PCR基因芯片檢測體系雜交,可根據(jù)雜交信號直觀地判讀樣品中所含病原體的種類、型別、毒力、侵襲力,從而對病原體進(jìn)行檢測和鑒定。廣東病毒篩查價格
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